高中生物 第二章 第2节 单克隆抗体课件 新人教版选修3.ppt

单克隆抗体 获得杂交细胞 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理 化学方法 同左 灭活的病毒 物理 离心 振动 电刺激 化学 聚乙二醇 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 杂交前细胞处理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 比较植物 动物细胞融合 单克隆抗体 1 常规抗体的制备 方法 缺陷 向动物体内反复注射某种抗原 使动物产生抗体 然后从动物血清中分离所需抗体 产量低 纯度低 特异性差 为什么产量低 为什么纯度低 1 抗原诱导动物产生的效应b细胞数量有限 2 抗原比较复杂 可能诱导产生多种效应b细胞 产生多种抗体 3 另动物在未接触注射的抗原之前 体内可能就存在多种效应b细胞 多种抗体 据研究 动物在免疫的过程中 体内产生的特异性抗体种类可达百万种以上 但每一个b淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 如何获得纯度高 产量大的抗体呢 设计方案 一个b淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖 杂交瘤细胞 大量抗体 1 定义 克隆单一的杂交瘤细胞所产生的大量抗体 2 单克隆抗体 由于每个 淋巴细胞只能分泌一种抗体 则每个杂交瘤细胞只能分泌一种抗体 由一个杂交瘤细胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份也是单一的 2 制备过程 图解 1注射抗原的目的是什么 2从小鼠脾脏中提取的b细胞都能产生抗体吗 3都能产生所需抗体吗 1诱导其融合的方法有哪些 2为什么要用许多b细胞和许多瘤细胞融合 3用一个b细胞和1个瘤细胞融合行吗 1融合后培养液中有几种细胞 2其中杂交瘤细胞有几种 1怎样筛选出杂交瘤细胞 2淘汰了哪些细胞 3筛选出的杂交瘤已经符合要求了吗 4杂交瘤细胞有何优点 1为何要进行克隆化培养 2为何进行专一抗体检测 3筛选的出杂交瘤细胞为什么还要再次筛选 并多次筛选 怎样筛选 1注射到小鼠血液中培养行吗 2体内培养为何优于外培养 整个制备过程至少要经过两次筛选 第一次筛选在选择性培养基上进行 得到杂交瘤细胞 多种 第二次筛选在多孔培养板上进行 在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养 并进行专一抗体检测 从而筛选出能产生特异性抗体的细胞群 该筛选要重复多次 确保筛选出的细胞群来自单个杂交瘤细胞 细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的 所以产生的抗体必然是化学性质单一的 特异性强的单克隆抗体 这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义 只不过克隆的不是b淋巴细胞 而是杂交瘤细胞 介绍一种选择性培养基 已知细胞合成dna有d和s两条途径 其中d途径能被氨基嘌呤阻断 人淋巴细胞中有这两条dna合成途径 但一般不分裂增殖 鼠骨髓瘤细胞中尽管没有s途径 但能不断分裂增殖 将这两种细胞在试管中混合 加peg促融 在筛选培养基上筛选获得杂种细胞 2 过程 文字 b淋巴细胞骨髓瘤细胞 诱导融合 b b细胞 b 瘤细胞 瘤 瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞 b 瘤细胞 克隆化培养 抗体检测 获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 体外培养 单克隆抗体 3 单克隆抗体的应用 单克隆抗体的优点 特异性强 灵敏度高 产量大 作为诊断试剂 准确识别各种抗原物质的微细差异 并与其特异性结合 具有准确 高效简易 快速的优点 如 早早孕诊断试剂盒 用于 运载药物 制成 生物导弹 抗癌细胞的单克隆抗体 药物药物 放射性同位素 化学药物和毒素等物质 治疗疾病 主要用于癌症治疗 问题思考 除通过杂交瘤细胞产生单克隆抗体外 还有什么方法 1 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合 得到杂交细胞 经培养可产生大量的单克隆抗体 与骨髓瘤细胞融合的是 a 经过免疫的b淋巴细胞b 没经过免疫的t淋巴细胞c 经过免疫的t淋巴细胞d 没经过免疫的 淋巴细胞 a 巩固练习 2 动物细胞融合的目的中最重要的是 a 克服远缘杂交不亲和b 制备单克隆抗体c 培育新品种d 生产杂种细胞3 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中 正确的是 诱导融合的方法完全相同b 所用的技术手段基本相同c 所采用的原理完全相同d 都能形成杂种细胞 a d 4 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是 a 由小鼠能产生抗体的b淋巴细胞与肝细胞融合b 由小鼠一个b淋巴细胞诱导融合而成c 由小鼠一个b淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成d 由小鼠一个b淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 d 4 单克隆抗体制备过程中 骨髓瘤细胞和b淋巴细胞诱导融合后 要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 b淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞a b c d c 5 由单克隆抗体研制而成的 生物导弹 由两部分组成 一是 瞄准装置 二是杀伤性 弹头 下列对此描述正确的是 多选 a 瞄准装置 是由识别肿瘤的单克隆抗体构成b 弹头 是由放射性同位素 化学药物和毒素等物质构成c 弹头 中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能d 生物导弹 是利用细胞工程制备出来的 abd 6 填空题 1 技术是单克隆抗体技术的基础 2 单克隆抗体与常规抗体相比 最大的优越性是 3 动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合的诱导剂外 还可以采用 4 选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤