高中生物 专题2课题1 微生物的实验室培养精讲导学课件 新人教版选修1.ppt

专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养 一 培养基1 概念 人们按照微生物对 的不同需求 配制出供其 的营养物质 2 种类 营养物质 生长繁殖 液体 琼脂 3 营养组成 各种培养基一般都含有 提供碳元素的物质 提供氮元素的物质 和无机盐 此外还需要满足微生物生长对 特殊营养物质 如维生素 氨基酸和碱基等 以及 的要求 水 碳源 氮源 ph 氧气 二 无菌技术1 关键 防止 的入侵 外来杂菌 2 消毒和灭菌 表面或内部 强烈 能 巴氏消 毒法 灼烧灭菌 三 大肠杆菌的纯化培养1 制备培养基 1 最常用的细菌培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 2 配制步骤 配方 黏稠 称量纸 迅速 琼脂 琼脂糊底 烧杯破裂 高压蒸汽 干热 50 酒精灯火焰 2 纯化大肠杆菌 1 纯化培养方法 在牛肉膏蛋白胨培养基上纯化大肠杆菌 最常用的方法有 法和 法 2 纯化培养的原理 想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的 即获得较纯的菌种 平板划线 稀释涂布平板 菌落 3 平板划线法 通过 在琼脂固体培养基表面连续 的操作 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 其具体操作是 将 放在火焰上灼烧 直到接种环烧红 在火焰旁冷却 并打开棉塞 将试管口通过 将已冷却的接种环伸入菌液中 沾取一环菌液 将试管口通过火焰 并塞上棉塞 接种环 划线 接种环 接种环 火焰 左手将皿盖打开一条缝隙 右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内 划三至五条 线 盖上皿盖 注意不要划破培养基 灼烧 待其冷却后 从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线 重复以上操作 在三 四 五区域内划线 注意不要将最后一区的划线与第一区相连 将平板 放入培养箱中培养 平行 接种环 倒置 4 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度 然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基的表面 进行培养 其操作步骤是 系列稀释 梯度稀释 操作 稀释 涂布 涂布平板操作 a 将涂布器浸在盛有 的烧杯中 b 取少量菌液 不超过0 1ml 滴加到培养基 c 将沾有少量 的涂布器在火焰上引燃 待酒精燃尽后 冷却8s 10s d 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面 涂布时可转动培养皿 使菌液分布均匀 酒精 表面 酒精 四 菌种的保藏 频繁 长期 固体斜面 液体 甘油 产生变异 思考辨析 1 判断正误 1 平板划线操作中 接种结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物 分析 接种结束后灼烧接种环的目的是及时杀死接种环上残留的菌种 避免细菌污染环境和感染操作者 2 在稀释涂布平板法操作中吸管要在酒精灯火焰周围使用 3 平板划线时 在第一次划线后 每次划线都要从上一次划线的末端开始 4 消毒和灭菌实质上是相同的 分析 消毒使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物 不包括芽孢和孢子 灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 2 问题思考 1 在配制培养基时 各组分溶化以后是否立即进行灭菌 为什么 提示 不是 由于不同的微生物生长对ph的需求不同 所以在培养基各组分溶化后需要先用酸或碱将ph调至微生物生长的最适宜条件 再进行灭菌处理 2 倒平板时为何将灭过菌的培养皿放在酒精灯的火焰旁 提示 避免周围环境中微生物的污染 一 制备培养基1 配制原则 1 目的明确 不同微生物需求不同 根据培养目的进行配制 2 营养要协调 营养物质的浓度和比例要适宜 3 ph要适宜 为维持ph的相对恒定 可在培养基中加入缓冲剂 常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾 2 培养基的营养成分及功能 易错提醒 有关培养微生物所需营养的几点提醒 1 不同微生物对营养的需求不同 所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同 2 对异养微生物来说 含c h o n的化合物既是碳源又是氮源 能源 3 培养微生物时营养物质要协调 营养物质过少不能满足微生物的营养需要 过多对微生物的生长有抑制作用 典例训练1 下表是某微生物培养基成分 请据此回答 1 上表培养基可培养的微生物类型是 2 若不慎将过量nacl加入培养基中 如不想浪费此培养基 可再加入 用于培养 3 若除去成分 加入 ch2o 该培养基可用于培养 4 表中营养成分共有类 5 不论何种培养基 在各种成分都溶化后分装前 要进行的是 6 上表中各成分质量确定的原则是 7 若上表培养基用于菌种鉴定 应该增加的成分是 解题关键 判断微生物的代谢类型依据培养基中有无有机碳源 根据培养基提供的主要营养成分分析表格中的培养基成分 培养及配制的原则是目的明确 营养协调 ph适宜 解析 题表中的营养物质有水 无机盐 氮源三类 缺乏碳源和特殊营养物质 该培养基中没有碳源 说明培养的微生物是从空气中获得碳源的 即可判断培养的微生物就是自养型微生物 该培养基中加入了过量食盐 就可以培养耐盐的金黄色葡萄球菌 但金黄色葡萄球菌是异养型微生物 这个培养基还需要加入有机碳源 该培养基若加入 ch2o 培养基中就有了碳源 但除去成分 却使培养基中没有了氮源 这时就只能用于培养固氮微生物了 微生物生长需要一定的ph 所以培养基装瓶前需要调节ph 表中各成分含量要根据微生物的生长需要来确定 对于菌种鉴定 往往用的是固体培养基 而表中没有凝固剂 故需要加入常见的凝固剂 琼脂 答案 1 自养型微生物 2 含碳有机物金黄色葡萄球菌 3 固氮微生物 4 3 5 调节ph 6 依微生物的生长需要确定 7 琼脂 或凝固剂 变式训练 下列叙述正确的是 a 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质b 培养基只有两类 液体培养基和固体培养基c 固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基d 微生物在固体培养基上生长时 可以形成肉眼可见的单个细菌 解析 选a 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求 配制出的供其生长繁殖的营养基质 培养基的种类根据划分依据的不同而不同 如根据化学成分可分为天然培养基和合成培养基 固体培养基是液体培养基添加凝固剂而形成的 其他成分均相同 微生物形体微小 肉眼无法看到 必须借助仪器才能看到 在固体培养基上用肉眼观察到的是一个菌落 二 常见消毒与灭菌方法的比较 思维拓展 1 酒精消毒时 70 的酒精杀菌效果最好 原因是浓度过高 菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜 乙醇分子不能渗入其中 浓度过低 杀菌能力减弱 2 具体选择消毒还是灭菌需要考虑 一是要考虑效果 灭菌的效果比消毒要好 二是要考虑操作对象的承受能力 活体生物材料 操作者的手等只能采用消毒 而不能灭菌 典例训练2 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽 酒精 火焰灼烧等几种不同的处理 这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 a 接种针 手 培养基b 高压锅 手 接种针c 培养基 手 接种针d 接种针 手 接种环 解题关键 解决该题需明确 消毒 杀死部分微生物 灭菌 杀死所有微生物 二者采用的方法 程度不同决定了它们的适用范围不同 解析 选c 本题考查学生对无菌技术的掌握 高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备 通常用于培养基的灭菌 用酒精擦拭双手是消毒的一种方法 火焰灼烧 可以迅速彻底地灭菌 适用于微生物的接种工具 如接种针 接种环 三 纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项1 平板划线法中几次灼烧接种环的目的 2 稀释涂布平板法操作比较复杂 且各个细节均需保证无菌操作 应特别注意 1 酒精灯与培养皿的距离要适宜 2 吸管头不要接触其他任何物体 3 吸管要在酒精灯火焰周围使用 4 涂布器末端浸在盛有70 酒精的烧杯中 取出时 要让多余的酒精在烧杯中滴尽 然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 注意防火 易错提醒 1 在稀释涂布平板操作中 每个步骤都要注意无菌操作 以防培养基被污染 影响实验效果 2 每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板 作为实验重复 求平均值 若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者 应舍弃该实验数据 不进行统计 计算 3 平板冷凝后 皿盖上会凝结成水珠 凝固后的培养基表面的湿度也比较高 将平板倒置 既可以使培养基表面的水分更好地挥发 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染 典例训练3 稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法 下列相关叙述