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现代生物科技专题 3.3 动物细胞工程预测点1.动物细胞培养与核移植技术的应用1.如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:(1)OA段的培养称为_培养,此时细胞生长表现为_。AB段可能发生了_现象,这一现象与细胞膜上的_有关。(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行_,不同的是植物细胞还要进行_。(3)为制备单克隆抗体,需将_注射到小鼠体内,以获得_细胞,同时可选取图中_点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞。为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用_培养基达到目的。【解析】(1)据图中不同阶段细胞的增殖代数可知,OA段细胞快速增殖,可能为原代培养,此时细胞生长表现为贴壁生长;AB段细胞不再增殖,可能发生了接触抑制现象,这一现象与细胞膜上的糖蛋白有关。(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,细胞均要进行增殖或分裂,但植物组织培养过程中植物细胞还要进行脱分化和再分化过程。(3)制备单克隆抗体,首先应将抗原注射到小鼠体内,以获得浆细胞;D点细胞增殖代数达到了60次以上,故此时细胞发生了癌变,获得了无限增殖的能力。筛选杂交瘤细胞应选用选择培养基。答案:(1)原代贴壁生长接触抑制糖蛋白(2)增殖或分裂脱分化和再分化(3)抗原浆D选择2.微载体是由天然葡聚糖等组成的颗粒,其直径很小,常用于贴壁生长的细胞培养。微载体大规模细胞培养技术已广泛应用于科研生产,其流程图如下。(1)微载体加入培养罐中后,通过搅动使其保持悬浮状态,这样做的目的是_。(2)图中过程a所使用的酶是_。(3)培养罐中所补充气体的作用是_。(4)在产生单克隆抗体过程中,杂交瘤细胞在加入培养罐前,需进行筛选,其目的是筛选出_。【解析】(1)搅拌培养液可以使培养细胞与营养物质充分接触,便于营养物质的吸收、利用。(2)图中过程a是制备单细胞悬液的过程,需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(3)培养罐中需要补充氧气和二氧化碳,其中氧气可以满足培养细胞有氧呼吸的需要,二氧化碳可以维持一定的pH。(4)在产生单克隆抗体过程中,杂交瘤细胞在加入培养罐前,需要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。答案:(1)使培养细胞与营养物质充分接触,便于营养物质的吸收、利用(2)胰蛋白酶或胶原蛋白酶(3)氧气可以满足细胞有氧呼吸的需要,二氧化碳可以维持一定的pH(4)能产生所需抗体的杂交瘤细胞3.人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大,通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增,使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术,将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中,那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,根据图示回答:世纪金榜导学号77982233(1)以上过程涉及的现代生物技术中,属于细胞工程的有_。(2)在进入之前要构建基因表达载体,这是基因工程的核心,除目的基因外,基因表达载体还必须含有_。(3)图中一般选择培养10代以内的细胞,原因是_,从到的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞,对卵母细胞的去核处理一般选择在_期进行。(4)培养细胞与植物组织培养所用的培养基在物理性质上有何不同?有什么意义?_。【解析】(1)图中形成的过程为核移植,由重组细胞发育成的过程需经动物细胞培养。(2)基因表达载体除含有目的基因外,还应含有启动子、终止子和标记基因。(3)培养10代以内的细胞可以保持正常的核型,对卵母细胞的去核处理一般选择在M中期。(4)动物细胞培养时,培养基为液体培养基,可以使培养细胞与营养物质充分接触,利于营养物质的吸收、利用。答案:(1)核移植技术、动物细胞培养(2)启动子、终止子、标记基因(3)培养10代以内的细胞可以保持正常的核型M(或减数第二次分裂)中(4)前者为液体培养基,后者为固体培养基,前者可以使培养细胞与营养物质充分接触,利于营养物质的吸收、利用预测点2.单克隆抗体技术的应用4.人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:(1)将特定的抗原注入小鼠,目的是_。(2)不能通过直接培养产生特异性抗体的效应B细胞来获得大量抗体,原因是_。(3)对于抗体检测呈_性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到310个/mL,每孔加入细胞稀释液_(填“0.1”“1”或“10”)mL,使每个孔内不多于1个细胞,达到单克隆培养的目的。(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是_。(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路:_。【解析】(1)将特定的抗原注入小鼠,目的是刺激小鼠产生能产生特定抗体的效应B细胞。(2)效应B细胞高度分化,直接进行培养时不会通过分裂产生大量效应B细胞。(3)抗体检验呈阳性,说明该杂交瘤细胞可产生所需抗体;为保证每个小孔不多于1个细胞,根据浓度可推断加入细胞稀释液的量:设加入细胞稀释液的最大量是X,则10个/mLX=1个,X=0.1 mL。(4)小鼠的抗体与人的抗体不同,故在人体内可引起免疫排斥反应,所以题图所示过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体。(5)根据所给信息可知,还可通过转基因技术或核移植技术获得既能大量增殖,又能产生特定抗体的杂交细胞。答案:(1)刺激小鼠产生能分泌特定抗体的效应B细胞(2
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