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5 RACE试剂盒原理及注意事项 SMARTer RACE5 3 KitFromTaKaRaCode 624858 原理 SMARTScribeReverseTranscriptaseSMARTerIIAOligonucleotide 70 5 RACEFirst StrandcDNASynthesis试剂清单 10 lSMARTerIIAOligonucleotide 24 M 70 10 l5 RACECDSPrimerA 12 M 40 l5XFirst StrandBuffer RNAse Free 5 lDithiothreitol DTT 100mM 1mlDeionizedH2O10 lRNaseInhibitor 40U l 20 lSMARTScribeReverseTranscriptase 100U l 10 ldNTPmix 20mM 5 RACEPCR试剂清单 400 l10XUniversalPrimerAMix UPM 混合引物 50 lUniversalPrimerShort 10 M 已合成 1 25mlSeqAmpPCRBuffer 2X 混合试剂 50 lSeqAmpDNAPolymerase 已用完 GSP引物设计 23 28bp 50 70 GCTm 65 C bestresultsTm 70 CProductrange 1 3kbAddGATTACGCCAAGCTTto5 ends linearizedpRACEvector NestedprimerLongprimer 5 CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT 3 Shortprimer 5 CTAATACGACTCACTATAGGGC 3 RACE ReadycDNA获得 在全部过程中都使用Tricine EDTABuffer稀释cDNA样本Protocol有变化 20ul 5 RapidAmplificationofcDNAEnds 5 RACE Protocol改动 含dNTP 已用完 混合引物 5 RapidAmplificationofcDNAEnds 5 RACE Program变化 详细参照试剂盒配套说明书 实验室常用DNApolymerase EasyTaqAP111TaKaRaTaqR001B Protocol EasyTaqAP111 TaKaRaTaqR001B Program EasyTaqAP111 TaKaRaTaqR001B Additional 两者均在扩增产物3 端带A碱基Eas
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