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黄曲霉毒素B1酶联免疫竞争检测法 酶联免疫竞争法工作原理 样品 样品 黄曲霉毒素B1分子 微孔板 微孔表面情况 AFB1抗体 标准品 标准溶液 酶标抗原 酶标抗原 酶 AFB1 标准品 样品和酶标抗原加进微孔 样品 酶标抗原 样品孔 先加 后加 标准品 酶标抗原 标准孔 先加 后加 孵育30分钟 抗原与抗体结合 微孔清洗 洗涤5次 间隔2分钟 加入酶催化反应底物 加入反应底物A和B 孵育15分钟 显色 反应孔 阴性对照孔 阴性对照孔 没有黄曲霉毒素B1分子与酶标抗原竞争所有抗体都与酶标抗原结合 阳性对照孔 1ng ml标准孔 黄曲霉毒素B1分子结合到抗体上剩余的抗体再与酶标抗原结合 阳性样品 酶标抗原结合得越少 颜色越浅 加入终止液 反应液由蓝色变成黄色 上酶标仪读取数据 画标准曲线 调零孔 阴性孔 0 1ng ml 0 5ng ml 1ng ml 5ng ml 10ng ml 酶联免疫竞争法标准曲线 0 1 1 10 ng ml O D 不同温度条件下的标准曲线 0 1 1 10 ng ml O D 调零孔 阴性孔 0 1ng ml 0 5ng ml 1ng ml 5ng ml10ng ml 以相对吸光度值为纵坐标三种不同温度下的标准曲线Y A A阴性孔 0 1 1 10 ng ml 100 50 调零孔 阴性孔 0 1ng ml
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