山西医科大学生化讨论2.doc

山西医科大学生化讨论课答案一、DNA复制、RNA合成、蛋白质合成三个过程忠实性的保持。DNA复制：严格的碱基配对 DNA聚合酶对碱基的选择 复制出错时，即时校读 DNA损伤后修复 DNA复制需要RNA引物。RNA合成：严格的碱基配对 RNA聚合酶与启动子结合后才启动转录真核生物不同基因有不同的转录因子，启动特定基因的转录RNA合成后需加工修饰，防止核酸酶的水解蛋白质合成：密码子的简并性,减少基因突变造成的影响 mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子的碱基配对 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA的高度特异性 氨基酰-tRNA与起始密码子AUG的特异性识别 mRNA在小亚基上的定位结合（原核S-D序列，真核帽结合蛋白复合物）分子伴侣使肽链正确折叠。二、1.模板链：下面的一条链。2.mRNA：5CGCAGGAUCAGUCGAUGUCCUGUG33.翻译从起始密码子AUG开始，从53方向进行。4.原核细胞 存在S-D序列，在起始密码子AUG上游含有AGGA序列。真核细胞结构基因分为编码区和非编码区，内含子5端常含GU序列，而此链无。三、1.过程: 获取编码动物激素的基因 构建基因表达载体 将目的基因与载体拼接 重组DNA分子导入大肠杆菌 筛选含目的基因的受体细胞.2.问题: 原核表达体系缺乏转录后加工机制 ，不宜表达真核基因组DNA;缺乏翻译后加工机制，表达出的真核蛋白质不能适当折叠或糖基化修饰;表达的蛋白质常形成不溶性包涵体;很难表达出大量的可溶性蛋白.3.解决方法:构建表达载体时,选择适当的翻译控制序列,合理设计多接头克隆位点.在目的基因前连上一个为特殊多肽编码的附加序列，表达融合蛋白 在目的基因与附加序列之间加入适当的裂解位点.五、若某一基因的编码序列中发生一个碱基突变，则该基因的表达产物在结构上会发生的改变有：1.错配同义突变:突变产生的密码子编码与原来相同的氨基酸，产生相同结构的多肽链。 错义突变:突变产生的密码子编码与原来不同的氨基酸，产生不同结构的多肽链。 无义突变:突变产生终止密码子,使翻译提前终止，产生不同结构的多肽链。2.框移突变(缺失,插入)突变点以后的氨基酸排列顺序全部改变,产生不同结构的多肽链六、1.mRNA：5-GUAGCCUACCCAUAGG- 32.若理解为mRNA的一段序列,则不可产生多肽,因为它无起始密码子。 若理解为整条mRNA序列,则根据读码方式的不同,可产生3种多肽。 5-GUAGCCUACCCAUAGG-3 5-GUAGCCUACCCAUAGG- 3 5-GUAGCCUACCCAUAGG- 33.位于终止部分，因为含有终止密码子UAG。七、原核生物在转录时，可在电子显微镜下观察到“羽毛现象”的原因：同一DNA模板上可有多个转录同时进行。RNA链上的小黑点是多聚核糖体，一条RNA链上有多个核糖体。转录尚未完成，翻译已在进行。四、原核生物与真核生物在遗传信息的传递、表达及调控中的主要区别。区别原核生物真核生物复制复制起始一个多个复制单位一个双向复制多个双向复制引物长，多短，少DNA聚合酶 DNA-pol, 三种 DNA-pol 在复制延长中起催化作用都有53聚合酶活性和35外切酶活性DNA-pol，五种DNA-pol在复制延长中起催化作用都有53核酸外切酶活性末端无端粒有端粒复制转录RNA聚合酶核心酶2全酶23种， RNA聚合酶,起始亚基辨认起始点需启动子，RNA聚合酶和转录因子参与延长转录延长时，翻译同时进行 转录与翻译不同步 延长中，有核小体移位和解聚现象终止依赖因子和非依赖因子转录终止和加尾修饰同时进行翻译起始因子IF-1，2，3三种eIF,十多种核糖体70S(30S,50S)80S(40S,60S)起始氨基酰 -tRNAfMet- tRNA fMet即甲酰甲硫氨酰-tRNAMet- tRNAi Met即甲硫氨酰-tRNAmRNA与小亚基的结合S-D序列帽结合蛋白复合物起始复合物的形成mRNA先与小亚基结合再识别 fMet-tRNA fMetmRNA先识别 Met-tRNAi Met再结合小亚基E位的有无有E位无E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落调控调节蛋白特异因子，阻遏蛋白，激活蛋白反式作用因子特异DNA序列操纵序列顺式作用元件特点 因子决定RNA聚合酶识别特性操纵子模型的普遍性阻遏蛋白的负性调节转录翻译同时进行加工修饰简单 多种RNA聚合酶染色质结构发生改变（对核酸酶敏感，拓扑结构变化，甲基化修饰，组蛋白变化）以正性调节为主转录翻译分隔进行加工修饰复杂八、mRNA、tRNA和rRNA的结构特点及其在蛋白质生物合成过程中的作用。结构特点在蛋白质合成中的作用mRNA 5端 7-甲基鸟嘌呤帽结构3端polyA尾蛋白质生物合成的直接模板tRNA 含稀有碱基，3端以CCA结束