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课时作业(四十三)多聚酶链式反应扩增dna片段(pcr技术)一、单项选择题1下列有关pcr技术的说法不正确的是() apcr技术需要特殊的dna解旋酶 bpcr技术体外复制dna以指数形式扩增 cpcr技术的原理与dna复制的原理相同 dpcr技术的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列2下列有关pcr技术的叙述正确的是() a作为模板的dna序列必须不断的加进每一次的扩增当中 b作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中 c反应需要的dna聚合酶必须不断的加进反应当中 d反应需要的dna连接酶必须不断的加进反应当中3从2001年初到现在,青岛某实验基地已孕育出上百只转基因克隆羊,它们的体内分别携带包括干扰素、抗凝血酶素、乙肝表面抗原在内的多种药用蛋白基因。这意味着,它们可以通过产奶的方式源源不断地提供药用蛋白基因,其应用前景非常光明。在其实验研究过程中,经常利用pcr技术制取大量的有关药用蛋白基因来供实验用。下列有关pcr技术的叙述中,不合理的是() apcr扩增反应中加入引物的作用是结合在模板dna上,提供dna延伸起始位点 bdna聚合酶的作用是从引物的5端开始催化dna链的延伸 cpcr技术依据是dna的热变性原理 dpcr的反应过程一般经历三十多个循环,每次循环都包括变性、复性、延伸4关于pcr技术下列说法中错误的有几项()关于复性的目的是使原来分开的dna的两条单链重新连接成双链pcr技术是扩增完整的dna分子dna聚合酶不能从头开始合成dna,只能从5端延伸dna链dna引物在细胞外可在dna聚合酶的作用下合成 a有一项 b有二项 c有三项 d有四项5聚合酶链式反应(pcr技术)是体外酶促合成特异dna片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的dna得以迅速扩增,其简要过程如下图所示。下列关于pcr技术的叙述,不正确的是 ()第5题图 apcr技术是在实验室中以少量dna制备大量dna的技术 b反应中新合成的dna又可以作为下一轮反应的模板 cpcr技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增 d应用pcr技术与探针杂交技术可以检测基因突变6退火温度是影响pcr特异性的较重要的因素。变性后温度快速冷却至4060,可使引物和模板发生结合。pcr的结果可不考虑原来解旋开的两个dna模板链的重新结合,原因不包括() a由于模板dna比引物复杂得多 b引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞 c加入引物的量足够多而模板链数量少 d模板链加热解旋已经变性不可能再次结合7pcr利用了dna热变性的原理,pcr仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对pcr过程中“温度的控制”的说法错误的是() a酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链 b延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度 cdna聚合酶具有耐高温的能力 ddna解旋酶具有耐高温的能力8关于pcr 技术的以下叙述错误的是() apcr反应中温度的周期性改变是为了dna聚合酶催化不同的反应 bpcr呈指数扩增dna片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板 c若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热dna聚合酶催化的pcr技术 dpcr反应包括多次循环,每次循环包括三步:变性、复性和延伸9“x基因”是dna分子上一个有遗传效应的片段,若要用pcr技术特异性地拷贝“x基因”,需在pcr反应中加入两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的dna分子,如图2所示,其中第种dna分子有几个()图1图2第9题图 a2 b4 c6 d810如图中pcr第二轮产物a、b、c、d分别是以pcr第一轮产物的哪一条单链dna为模板复制产生的()第10题图 a b c d二、非选择题11在遗传病及刑事侦破案件中常需要对样品dna进行分析,pcr技术能快速扩增dna片段,在几个小时内复制出上百万份的dna拷贝,有效地解决了因为样品中dna含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。第11题图(1)在相应的横线上写出引物,并在复性这一步骤中将引物置于合适的位置。(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的dna分子。(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32p标记,请分析循环一次后生成的dna分子的特点:_,循环n次后生成的dna分子中不含放射性的单链占总单链的比例为_。(4)pcr反应过程的前提条件是_,pcr技术利用dna的_原理解决了这个问题。(5)在对样品dna进行分析的过程中发现,dna掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是_。12多聚酶链式反应(pcr)是一种体外扩增dna片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和dna序列测定等方面。回答以下问题:(1)细胞内dna复制过程中,引物的作用是_,而且dna复制的前提是_。(2)pcr利用了_原理,可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。(3)pcr技术用到的酶是_,与细胞内dna复制时发挥相同作用的酶相比区别在于_。(4)下面表格是dna体内复制与pcr反应的部分比较结果。通过比较分析,请推导出pcr反应合成dna子链时能量来源于_。原料atpdna体内复制四种脱氧核苷酸需要pcr反应脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸不需要(5)假如pcr反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为_。13多聚酶链式反应(pcr)是一种体外迅速扩增dna片段的技术。请回答下列有关pcr技术的基本原理及应用问题。(1)dna的两条链是反向平行的,通常将_的末端称为5端,当引物与dna母链通过碱基互补配对结合后,dna聚合酶就能从引物的_开始延伸dna链。 (2)pcr利用dna的热变性原理解决了打开dna双链的问题,但又导致了dna聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种taq细菌中分离到_,它的发现和应用解决了上述问题。要将taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫_。 (3)pcr的每次循环可以分为_三步。假设在pcr反应中,只有一个dna片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有_个这样的dna片段。 (4)请用简图表示出一个dna片段pcr反应中第二轮的产物。14近10年来,pcr技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用dna半保留复制,在试管中进行dna的人工复制(如图所示)。第14题图(1)加热使dna双链打开,这一步是打开_键,称为_,在细胞中是在_酶的作用下进行的。 (2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在dna聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两条dna分子,此过程中原料是_,遵循_。 (3)pcr技术的必需条件,除了模板、原料、_酶以外,至少还有三个条件,即:液体环境、适宜的_和_。(
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