2020年微生物的检验培训总结.doc

微生物的检验培训总结 1.“菌株的传代次数不得超过5代”表示菌株传代只能传递到第四代，使用第四代时意味着菌株已经是第五代，因此，传代记录中不能显示传5代。 2.标准菌株确认工作是否齐全：存活性确认，纯度确认，菌落形态、染色镜检及生化反应进行确认。 3.菌种保藏所用的冰箱是否经过确认，是否容易结霜，且保存菌种（尤其是特异菌株）是否采用两种以上的方式，防止意外流失。 4.培养基的适用性检查： 微生物限度检查中培养基适用性检查：在注重回收率达到70%时，是否确保检查用培养基上的菌落形态同对照培养基上一致。 控制菌检查中培养基适用性检查：促生长能力-最短培养时间内长出相应的菌落；抑制能力-最长培养时间下不得有菌生长；细菌培养时间：18-24-48小时；真菌培养时间：24-48-72小时，促生长取最短时间，抑制取最长时间。因此供试品在检查时，培养时间应取最长时间。 环境监测的培养基适用性检查：“中国药典附录：药品微生物实验室规范指导原则”中规定：用于环境监测的培养基须特别防护，最好是双层包装和终端灭菌。如果不能采用终端灭菌的培养基，在使用前应进行100%的预培养避免假阳性出现。同时做促生长试验，防止假阴性出现。 沉降菌监测所用培养基的适用性检查： 培养基回收率确认（同微生物限度检查的培养基适用性检查）； 确认培养基放置最长时间，在标准风速下，一般不宜超过2小时； 同时确认温度、湿度及风速对培养基放置的影响。 5.洁净区微生物监控标准的理解是否到位？如何计算平均值。 6.生产抗生素的洁净区进行环境监测，其培养基是否添加有中和剂，如亚硫酸氢钠、聚山梨酯等。 7.洁净室是否使用消毒剂与杀孢子轮滑使用，杀孢子剂一般半月1次（建议） 8.无菌检查： 在结果进行观察时，最好将集菌器置于黑白背景下观察，确保不能因灯检原因而出现假阴性。无菌检查结果判断： 集菌器出现浑浊，但证明不是微生物，判供试品符合规定； 以下情况可证明无菌检查结果无效：设备及环境微生物监控结果不符合规定；回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素（阴性对照失败、培养基的灵敏度试验失败等）；供试管中生长的微生物经鉴定后确认是物品或无菌操作技术所引起。此时可以提出复验申请，复验取样条件：尽可能使用原样品（全检量的2-3倍） 尽可能使用与第一份相同的另一份样品（如理化检验样品） 尽可能在同一处重新取样 9.超净工作台及生物安全柜中不能使用酒精灯：酒精灯的使用会导致局部温度对流，在生物安全柜中则会造成洁净气流紊乱，从而将台面污染的灰尘或者周围污染的空气带入到无菌操作区，从而污染样品；另外超净工作台中放置酒精灯，洁净风是超外吹的，对流空气中污染的菌可能对操作人员造成伤害。 10.实验室进行调查：一般将重分析、重检验、重取样同时进行，可以节省调查时间，延缓车间库存时间。 11.制药用水中生物膜（生物膜形成微生物生长的物理和化学屏障。不仅增加了微生物对热、各种药物、杀菌刺、去污剂和清洁剂的抗性；而且，有利于微生物捕获营养物质。加速生长繁殖。）出现的可能现象：在同一或同几个监测点多次检测均出现菌落；菌落的种类多样，形态多样； 措施：