对乙酰氨基酚.ppt

第六章芳酸类非甾体抗炎药物分析AnalysisofAromaticcarboxylicacids药分分析教研室 Chemicalstructure featureIdentificationDetectionofspecificimpuritiesinAspirin Sodiumaminosalicylate ClofibrateAssay 第一节典型药物的结构与性质 苯甲酸类水杨酸类其他芳酸类 一 苯甲酸类 甲芬那酸mefenamicacid 丙磺舒 pKa3 4 代表药物 甲芬那酸mefenamicacid 丙磺舒 pKa3 4 性质 酸性 含量测定 FeCl3 赭色 鉴别 紫外吸收 鉴别 含量测定 二 水杨酸类 二 水杨酸类 代表药物 二 水杨酸类 代表药物 二 水杨酸类 代表药物 贝诺酯 二 水杨酸类 性质 1 酸性 水杨酸类基本结构为邻羟基苯甲酸 易形成分子内氢键 增强羧基中氧氢键的极性 酸性强于苯甲酸 含量测定 2 吸收光谱特征 苯环及特征取代基 鉴别含量测定 二 水杨酸类 性质 3 与Fe3 反应 特征鉴别反应具有酚羟基结构 弱酸环境与Fe3 生成紫色配位化合物 4 水解反应 杂质检查 三 其他芳酸类 布洛芬ibuprofen 酰胺基 水解后芳伯氨基特性酚羟基 与FeCl3显色水解产物反应 较弱酸性紫外 红外吸收 对乙酰氨基酚 paracetamol 第二节鉴别试验 鉴别反应 与铁盐反应重氮化 偶合反应氧化反应水解反应 UVIRTLCHPLC 紫堇色 一 与铁盐反应 蓝紫色 芳香第一胺类鉴别反应具芳伯 氨基或潜在芳伯氨基的药物 二 重氮化 偶合反应 对乙酰氨基酚 潜在芳伯氨基 二 重氮化 偶合反应 随即变为棕绿色 三 氧化反应 四 水解反应 六 紫外分光光度法 七 红外分光光度法 八 薄层色谱法 制剂鉴别 辅料干扰 分离后鉴别比移值相同 九 高效液相色谱法 保留时间相同 第三节特殊杂质检查 阿司匹林中特殊杂质的检查对乙酰氨基酚特殊杂质的检查甲芬那酸中特殊杂质的检查二氟尼柳中特殊杂质的检查 一 合成工艺 一 阿司匹林中特殊杂质检查 一 阿司匹林中特殊杂质检查 二 检查 水杨酸有关物质 为合成中间体和水解产物 二 检查 水杨酸 方法 高效液相色谱法应用范围 原料 片剂 肠溶片 肠溶胶囊等 二 检查 水杨酸 检查 酚 苯酯类杂质 方法 高效液相色谱法 梯度洗脱 二 检查 有关物质 对乙酰氨基酚 特殊杂质 中间体 副产物及分解产物 例 对氨基酚 对氯苯乙酰胺 O 乙酰基对乙酰氨基酚 偶氮苯 氧化偶氮苯 苯醌和醌亚胺等 二 对乙酰氨基酚中的特殊杂质 一 合成工艺 1 对氨基酚及有关物质乙酰化不完全或贮藏不当引起水解 毒性较大并有色泽 检查方法 高效液相色谱法 注 对氨基酚对照溶液不稳定 应临用前新鲜配制 二 对乙酰氨基酚中的特殊杂质 2 对氯苯乙酰胺以对氯苯乙酰胺为对照品 HPLC限度检查 二 检查 一 合成工艺 邻 氯苯甲酸 2 3 二甲基苯胺 甲芬那酸 三 甲芬那酸中特殊杂质的检查 二 检查 2 3 二甲基苯胺的检查 方法 高效液相色谱法 一 合成工艺 四 二氟尼柳中特殊杂质的检查 二 检查 正相TLC检查有关物质A 供试品溶液 本品 甲醇 10mg ml对照溶液 50 g ml甲醇溶液方法 照薄层色谱法试验 吸取上述两种溶液各5 l 分别点于同一硅胶GF254薄层板上 以正己烷 二氧六环 冰醋酸 85 10 5 为展开剂 展开 晾干 置紫外光灯 254nm 下检视 供试品溶液如显杂质斑点 与对照溶液的主斑点比较 不得更深 反相HPLC检查有关物质B供试品溶液与对照溶液 有关物质A项色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 以水 甲醇 乙腈 冰醋酸 55 23 30 2 为流动相 检测波长为254nm 理论板数按二氟尼柳峰计算不低于2000 精密量取对照溶液20 l注入液相色谱仪 调节检测灵敏度 使主成分色谱峰的峰高为满量程的20 25 精密量取供试品溶液与对照溶液各20 l 分别注入液相色谱仪 记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍供试品溶液的色谱图中如有杂质峰 各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积 第四节含量测定 酸碱滴定法 以阿司匹林为例 双相滴定法 以苯甲酸钠为例 紫外分光光度法 以对乙酰氨基酚为例 HPLC法 阿司匹林栓剂 以阿司匹林为例 直接滴定法水解后剩余滴定法 USP 两步滴定法 一 酸碱滴定法 溶剂 中性乙醇乙醇 溶解ASA 防止ASA在水溶液中滴定过程水解中性乙醇 对指示剂 酚酞 而言为中性 可消除滴定误差指示剂 酚酞用NaOH标准溶液直接滴定 直接滴定法 原理 ChP用于阿司匹林原料药的测定 优点 简便 快速缺点 酯键水解干扰 不断搅拌 快速滴定 酸性杂质干扰 如水杨酸 适用条件 不能用于含水杨酸过高或制剂分析 只能用于合格原料药的含量测定应用范围 水杨酸 双水杨酯 丙磺舒 布洛芬等 直接滴定法 利用阿司匹林分子中的酯键 先加过量定量的NaOH溶液使之水解 然后用H2SO4滴定剩余的NaOH 同时做空白 水解后剩余滴定法 USP 过量定量 原理 USP29方法 取本品约1 5g 精密称定 精密加入NaOH滴定液 0 5mol L 50 0ml 水浴上煮沸10min 放冷 以酚酞为指示剂 用H2SO4液 0 25mol L 滴定剩余的NaOH 并将滴定结果用空白试验校正 每1ml的NaOH液 0 5ml L 相当于45 04mg的C9H9O4 水解后剩余滴定法 USP 水解后剩余滴定法 USP 计算公式 特点 优点 消除了酯键水解的干扰缺点 酸性杂质干扰 ChP用于阿司匹林片剂的含量测定 两步滴定法 阿司匹林片剂中加稳定剂 酒石酸 枸橼酸制剂过程产生水解产物 水杨酸 醋酸 消耗NaOH 测定结果偏高 采用两步滴定法测定片剂中阿司匹林含量 第2步 水解与测定 采用剩余滴定法 第1步 NaOH中和所有的酸 ASA CA TA SA HAc 放冷后 用H2SO4滴定液滴定剩余的NaOHV 空白滴定消耗H2SO4V0 两步滴定法 Ch P 阿司匹林片 取本品10片 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于阿司匹林0 3g 置锥形瓶中 加中性乙醇 对酚酞指示剂显中性 20ml 振摇使ASA溶解 加酚酞指示液3滴 滴加NaOH液 0 1mol L 至显粉红色 再精密加NaOH液 0 1mol L 40ml 置水浴上加热15min 并时时振摇 迅速放冷至室温 用H2SO4液 0 05mol L 滴定 并将滴定的结果用空白试验校正每1ml的NaOH液 0 1mol L 相当于18 02mg的C9H8O4 两步滴定法 特点消除了酸性杂质的干扰降低了酯键水解的干扰 计算公式 两步滴定法 片粉重0 5312g 标示量0 1gV3 02mlV020 18ml 例 称取10片重1 8240g CNaOH0 1032mol L C0 05120mol L Ch P氯贝丁酯的Assay采用两步滴定法 酸碱滴定法小结 苯甲酸钠的测定有机酸碱金属盐类的常用测定方法 在水和与水不相混溶的有机溶剂 乙醚 中用标准酸进行滴定 二 双相滴定法 苯甲酸钠易溶于水 水溶液呈碱性 可用酸滴定滴定过程析出的苯甲酸微溶于水 使溶液浑浊 与苯甲酸钠构成缓冲对使终点pH突跃不明显 干扰终点的正确判断 因此 利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质 采用双相滴定法 二 双相滴定法 水 乙醚 原理 二 双相滴定法 苯甲酸钠置分液漏斗 水25m1乙醚50ml甲基指示液2滴 水层呈橙黄色 水层显橙红色 分出H2O层乙醚层用H2O5ml洗涤 洗液合并 水层加乙醚20ml HCl继续滴定至水层显持续的橙红色 直接紫外分光光度法柱分配色谱 紫外分光光度法 三 紫外分光光度法 吸收系数法 对乙酰氨基酚标准对照法 二氟尼柳胶囊 三 紫外分光光度法 直接紫外分光光度法 含量测定 取本品约40mg 精密称定 置250ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液50ml溶解后 加水至刻度 摇匀 精密量取5ml 至100ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液10ml 加水至刻度 摇匀 照紫外 可见分光光度法 药典Chp2005版附录 A 在257nm的波长处测定吸光度 按C8H9NO2的吸收系数 为715计算 即得 对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收 中国药典采用百分吸收系数 法 测定对乙酰氨基酚的含量 例 对乙酰氨基酚 片剂 咀嚼片 注射液 栓剂 胶囊 颗粒剂 吸收系数法 阿司匹林胶囊的含量测定 上样 样品的氯仿溶液冲洗 氯仿 弃去 洗脱 冰HAc CHCl3测定 280nm计算 对照品比较法 柱分配色谱 紫外分光光度法 柱分配色谱 紫外分光光度法 水杨酸的限量测定 冲洗 氯仿分次洗 阿司匹林 洗脱 冰HAc 乙醚 解吸 洗脱 氯仿 水杨酸 测定 306nm A样 A对限量 以阿司匹林标示量计 允许水杨酸的量为0 75 对照溶液75 g 10ml 50ml 样品液100mg 50ml 若有少量FeCl3被冲洗下来 色带变黄 影响结果 磷酸可与Fe3 形成不溶性磷酸铁而避免干扰 与水杨酸形成紫色配位物 使水杨酸保留在柱上 高浓度尿素的存在可使配位物在柱上的移动变慢 谱带较窄 阿司匹林栓剂采用HPLC法测定含量色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶 ODS 流动相 乙腈 四氢呋喃 冰醋酸 水 20 5 5 70 检测波长 276nm系统适用性试验 n 按阿司匹林应不低于3000 R 阿司匹林 水杨酸的分离度应大于1 5 四 HPLC法 C样 A样 A标 C标 溶液配制 对照品溶液 阿司匹林适量 用1 冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释制成每ml约含0 1mg的溶液 供试品溶液 取供试品适量 精密称定 相当于阿司匹林0 1g 置50ml量瓶中 加1 冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度 取其续滤液5ml 置100ml量瓶中 用1 冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度 取10微升注入高效液相色谱仪 对氨基水杨酸钠的法定方法 重氮化法 五 重氮化法 思考题 根据阿司匹林的合成工艺及化学结构 说明阿司匹林特殊杂质检查项目的制订依据与检查原理 中国药典对乙酰水杨酸片含量测定为什么采用两步滴定法 试述柱分配层析法检查阿司匹林片剂中游离水杨酸的方法和原理 4 用化学法区别乙酰水杨酸 水杨酸 苯甲酸 例 1 5 A 两步酸碱滴定法B 直接酸碱滴定法C 两者皆是D 两者皆不是1 苯甲酸钠的测定2 氯贝丁酯的测定3 盐酸的测定4 酸碱滴定法5 阿司匹林片的测定 例6 采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时 已知阿司匹林的分子量为180 2 所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0 1mol L 请问1ml氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是A 180 2mgB 180 2gC 18 02mgD 1 802mgE 9 01mg C 例7 阿司匹林加碳酸钠试液加热后 再加稀硫酸酸化 此时产生的白色沉淀应是A 苯酚B 乙酰水杨酸C 水杨酸D 醋酸钠E 醋酸苯酯 C 例8 水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应 要求溶液的pH值是A 10 0B 2 0C 7 8D 4 6E 2 0 0 1 D 例9 两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时 第一步滴定反应的作用是A 测定阿司匹林含量B 消除共存酸性物质的干扰C 使阿司匹林反应完全D 便于观测终点E 有利于第二步滴定 B 例10 对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是A 水杨酸B 间氨基酚C 氨基酚D 苯酚E 苯胺 例11 能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有A 苯甲酸钠B 水杨酸C 丙酸睾酮D 对乙酰氨基酚E 氢化可的松 B ABD 例12 采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时 加入乙醚的目的是A 防止反应产物的干扰B 乙醚层在水上面 防止样品被氧化C 消除酸碱性杂质的干扰D 防止样品水解E 以上都不对 A 例13 采用两步滴定法测定阿司匹林制剂含量时 被测组分与标准溶液的反应摩尔比为A 2 1B 1 2C 1 1D 3 1E 以上都不对 例14 阿司匹林中含量最高的杂质为A 乙酰水杨酸酐B 乙酰水杨酸水杨酸C 水杨酸D 水杨酰水杨酸E 以上都不对 C C 例15 区别水杨酸和苯甲酸钠最常用的试液