色谱、质谱部分习题课.pdf

色谱 质谱部分知识点汇总 及习题解答 翟超 2012 4 1 总纲 气相色谱法 液相色谱法 色谱法导论 分子质谱法 Couple 分离能力分离能力 结构鉴定能力结构鉴定能力 色谱法导论 1 色谱法分类 流动相的物理状态 2 基本概念 术语 分配系数K 通过不同组分K 值的差别和大小来判断分离的可能性 和洗脱顺序 保留因子 选择因子 色谱图的相关概念 基线 色谱峰高 标准差 半峰宽 底宽 保留值 比移值 死时间 保留时间 调整保留时间 3 色谱动力学基础理论 塔板理论 速率理论 理论塔板数 有效理论塔板高 Van Deemter方程 4 基本分离方程 分离度 分离方程 分离速度方程 5 色谱定性分析 6 色谱定量分析 外标法 内标法 归一化法 相对校正因子 习题部分 色谱导论 18 12 在气相色谱中使用同一根色谱柱同一根色谱柱 分别采用相对分子质量和扩散 系数不同的N2和H2作为载气 比较两者的H u曲线 试说明为什么 1 用N2比用H2做载气的最佳Uopt要小 2 用N2比用H2做载气的最小板高较低 3 载气流速大于Uopt时 用N2比用H2做载气的板高上升较快 且板高较高 载气流速大于Uopt 时 传质是引起色 谱峰展宽的因素 4 载气流速小于Uopt时 用N2比用H2做载气的板高上升较慢 且板高较低 5 快速分析时 应选用H2做载气 18 14 18 22 内标法测天然产物中A B含量 选用化合物S为内标 1 称量S和纯A B各180 4mg 188 6mg 234 8mg于25mL容量瓶中配制三元标样混 合物 进样20 L 洗出S A B的峰面积分别为48964 40784 42784 计算相对定量 校正因子 2 称取测定试样622 6mg 内标物34 00mg 与 1 相同条件下洗出的S A B的 峰面积分别为32246 46196 65300 计算A B的含量 36 56 气相色谱法 1 气相色谱仪 浓度型 质量型 气路系统 进样系统 分离系统 温控系统 检测器 1 检测器的主要性能指标 灵敏度 检出限 2 常用检测器及其基本原理 流程图 基本部件 填充柱 毛细管柱 汽化室 色谱柱 检测器的温度 程序升温 热导检测器 氢火焰离子化检测器 电子捕获检测器 热导检测器 气相色谱法 5 气相色谱定性分析 单柱比较 双柱比较 峰高加入法 6 气相色谱定量分析 7 超临界流体色谱 优势 SFC比 HPLC的柱效高 分离速度快 SFC比GC的柱温低 易于分离热不稳定的大分子化合物 2 毛细管气相色谱 3 固定相 4 气相色谱分离条件的选择 温度的选择 载气 线速度 柱温 柱长 内径 载体 进样量 进样时间 习题部分 气相色谱法 19 13 试设计下列试样测定的色谱分析操作条件 1 乙醇中微量水的测定 都是500 以下的易挥发组分 目标分析物 水 GDX 极性化合物的分析 2 超纯氮中微量氧的测定 都为气体 分子筛 吸附气体 3 蔬菜中有机磷磷农药的测定 4 微量苯 甲苯 二甲苯异构体的测定 无色或淡黄色油状液体 不溶于水 溶于脂肪族 和芳香族烃类 挥发性 低于DOP 有良好的耐 热性 19 14 关于灵敏度和检出限的计算 高效液相色谱法 1 高效液相色谱特点 分类 正相 反相 液液 液固 化学键合相 3 固定相和流动相 4 吸附 分配分配 离子交换 体积排阻 5 反相色谱分离条件的优化 2 高效液相色谱仪 流动相储器和溶剂处理系统 高压泵系统 进样系统 分离系统 检测系统 常用检测器及其基本原理 程序升温和梯度洗脱的异同 程序升温和梯度洗脱的异同 习题部分 液相色谱法 20 5 预测下面两组溶质在正相和反相色谱的洗出顺序 1 正己烷 正己醇 苯 2 乙酸乙酯 乙醚 硝基丁烷 何为正相 反相 正相 流动相非极性 固定相极性 极性弱的先出峰 反相 流动相极性 固定相非极性 极性强的先出峰 分子质谱法 1 基本原理 3 质谱图 分子质谱离子类型 四类离子化及其反应 2 质谱仪 离子源 EI CI ICP 质量分析器 TOF IT 四级杆 检测器 真空系统 计算机控制和数据处理系统 分子离子 同位素离子 重排离子 重排离子 麦式重排 亚稳离子 基本概念 基峰 同位素峰 稳定性 芳香环 共轭多烯 环状化合物 羰基化合物 醚 酯 胺 酸 醇 高度分支的烃类 zyxw ONHC zyxw M M 04 037 002 008 1100 1 z xw M M 20 0 200 02 008 1 100 2 2 4 应用 5 联用技术 GC MS HPLC MS CE MS MS MS 定性分析 分子量确定 化学式确定 结构鉴定 定量分析 S Cl Br等天然丰度比较高 采用二项式展开式 a b n 断裂规律 断裂 异裂 均裂 饱和烷烃 支链烷烃 醛 酮 酸 酯 酰胺 醇 醚 胺 卤化物 芳香族化合物 分子质谱法 习题部分 分子质谱法 23 3 电子轰击源中 单电荷离子通过1000v电场加速后 试计算获得的