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实验五鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价 一 实验目的 1 掌握鸡新城疫的临诊要点 2 了解和掌握鸡新城疫的实验室诊断和免疫监测技术 二 实验内容 1 鸡新城疫的临诊要点 2 鸡新城疫的实验室诊断 3 鸡新城疫的免疫效果评价 HA和HI的原理 1 HA试验 许多病毒表面有血凝素 能与各种动物的红细胞表面受体结合 而出现红细胞凝集现象 简称为病毒的血凝现象 2 HI试验 病毒的红细胞凝集现象 可以被特异性免疫血清所抑制 称HI试验 1 鸡新城疫的血凝试验 HA 材料 新城疫病毒鸡胚接种尿囊液1份0 6 鸡红细胞悬液1管生理盐水或PBS1瓶96孔微量血凝板1块微量加样器1支 病毒血凝试验的操作方法 以100 凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价 即为一个凝集单位 单位 L 置于振荡器上振荡1分钟 静置后30min开始观察结果 待对照孔红细胞已沉淀即可进行结果观察 红细胞全部凝集 沉于孔底 平铺呈网状 即为100 凝集 不凝集者 红细胞沉于孔底呈点状 以100 凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价 即为一个凝集单位 从表4 1看出 该新城疫病毒液的血凝价为1 128 则l 128为1个血凝单位 1 64 l 32分别为2 4个血凝单位 或将128 4 32 即1 32稀释的病毒液为4个血凝单位 结果判定 2 鸡新城疫的血凝抑制试 HI 材料 除血球凝集试验所用材料外 血清取鸡免疫血清或者取高免卵黄抗体 病毒血凝抑制试验的操作方法 以100 抑制凝集 完全不凝集 的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价 即HI效价 单位 L 以100 抑制凝集 完全不凝集 的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价 即HI效价 凡被已知新城疫阳性血清抑制血凝者 该病毒为新城疫病毒 从表4 2看出 该血清的HI效价为1 64 用以2为底的负对数 log2 表示 即6log2 结果判定 1 免疫鸡群发生新城疫流行有何特点 2 简述确证新城疫的实验室诊断
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