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文档简介
专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过_,赋予生物以_,创造出_。基因工程是在 _上进行设计和施工的,又叫做_。(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”_(1)来源:主要是从_中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种_ _的核苷酸序列,并且使每一条链中 _ _部位的两个核苷酸之间的_断开,因此具有_ 性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:_ _和 _ _2.“分子缝合针”_ (1)两种DNA连接酶( 和 )的比较:相同点:都缝合_ _键。区别:EcoliDNA连接酶来源于_ _,只能将双链DNA片段互补的_ 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合_ ,但连接平末端的之间的效率较_ 。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将_ _加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_ _的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”_ _(1)载体具备的条件:_。_。_。(2)最常用的载体是_ _,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ,并具有_ 能力的_ _DNA分子。(3)其它载体:_ _ (二)基因工程的基本操作程序第一步:_ _1.目的基因是指: 。2.原核基因采取 获得,真核基因是_ _。人工合成目的基因的常用方法有_ _和_ _。3.PCR技术扩增目的基因(1)原理:_ _(2)过程:第一步:加热至9095使_ _;第二步:冷却到5560,_ _;第三步:加热至7075,热稳定 酶从 起始互补链的合成。第二步:_ _1.目的:使目的基因在受体细胞中_ _ _,并且可以 ,使目的基因能够 。2.组成:_ _ _ _ _(1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的_ _,是_ _ _酶识别和结合的部位,能驱动基因 ,最终获得所需的 。 (2)终止子:也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 。(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中 ,从而将 筛选出来。常用的标记基因是_ _。 第三步:_1.转化的概念:是 进入 内,并且在受体细胞内_ _ _和_ _的过程。2.常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 _,其次还有_ _和 _ _等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是_ 。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是 、 、 ,最常用的原核细胞是 _,其转化方法是 先用 _ _处理细胞,使其成为 _ ,再将 _ _溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含 的依据是 。第四步:_ _1.首先要检测 上是否插入了 ,方法是采用 2.其次还要检测 _,方法是采用 作探针 杂交。3.最后检测 ,方法是从转基因生物中提取 ,用相应的_ _进行_。4.有时还需进行 水平的鉴定。如 。(四)蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以 的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过_ _,对现有蛋白质进行 ,或制造一种 _,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产 的蛋白质)A为_ _ B为 。专题2 细胞工程(一)植物细胞工程 1.理论基础(原理):_全能性表达的难易程度受精卵生殖细胞胚胎干细胞干细胞体细胞排序_ _ _。植物细胞_动物细胞(大于或小于)2.植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞 _ 试管苗 植物体(2)用途:微型繁殖、_、_、_、细胞产物的工厂化生产。(3)地位:是培育转基因植物、_ _培育植物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括 等。化学法一般是用_ _作为诱导剂。(3)意义:_ _ _(二)动物细胞工程 1. 动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ,将它分散成_,然后放在适宜的_中,让这些细胞 。(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用_ _处理分散成_制成_转入培养瓶中进行_培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_培养。(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就 ,称为_。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面_时,细胞就会 ,这种现象称为_。(4)动物细胞培养需要满足以下条件 的环境:培养液应进行_处理。通常还要在培养液中添加一定量的_,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止_。营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入_ _等天然成分。温度:适宜温度:哺乳动物多是36.50.5 ;pH:7.27.4 。气体环境:95% 5% 。O2是_ _所必需的,CO2的主要作用是_(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、_、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为_核移植(比较容易)和_核移植(比较难)。(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞_ _;卵(母)细胞 。(3)体细胞核移植的大致过程是:为_为_。(4)体细胞核移植技术的应用:加速家畜 改良进程,促进良畜群繁育; 保护 物种,增大存活数量;生产珍贵的 ; 作为 的供体;用于 的移植等。(5)体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着 问题、表现 缺陷等。3.动物细胞融合(1)动物细胞融合也称_,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来 细胞遗传信息的单核细胞,称为_(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有_、 、 等。(3)动物细胞融合的意义:克服了_,成为研究 、 、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动,聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合植物细胞杂交,灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一4.单克隆抗体(1)抗体:一个B淋巴细胞只分泌一_ _。从血清中分离出的抗体 、 、 。(2)单克隆抗体的制备过程:(3)杂交瘤细胞的特点:既能_ _,又能产生_ _。(4)单克隆抗体的优点:_ _。(5)单克隆抗体的作用: 作为诊断试剂 :准确识别各种 物质的细微差异,并跟 发生特异性结合,具有 、 、 、 的优点。 用于治疗疾病和运载药物 :主要用于治疗 ,可制成“ ”,也有少量用于治疗其它疾病。专题3 胚胎工程(一)动物胚胎发育的基本过程1、胚胎工程是指对动物_所进行的多种显微操作和处理技术,如_、_、_、_等技术。经过处理后获得的 ,还需移植到_生产后代,以满足人类的各种需求。2、动物胚胎发育的基本过程(1)受精场所是母体的_。(2)卵裂期:特点:细胞有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积_。 (3)桑椹胚:特点:胚胎细胞数目达到32个左右时,胚胎形成致密的细胞团,形似桑椹。是_(全能或者已分化)细胞。(4)囊 胚:特点:细胞开始出现_(该时期细胞的_)。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为_,将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称_。(5)原肠胚:特点:有了_ (几层)胚层的分化,具有 腔和 腔。(二)胚胎干细胞1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于_中分离出来。2、具有胚胎细胞的特性,在形态上表现为_小,_大,_明显;在功能上,具有发育的 ,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外,在体外培养的条件下,可以 而不发生 ,可进行 保存,也可进行 。3、胚胎干细胞的主要用途是:可用于研究哺乳动物 ;是在体外条件下研究 的理想材料,在培养液中加入 ,如牛黄酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,这为揭示 的机理提供了有效的手段;可以用于治疗人类的某些 ,如帕金森综合症、少年糖尿病等;利用可以被诱导分化形成新的 的特性,移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能;随着组织工程技术的发展,通过ES细胞 ,定向培育出_ _,用于_ _ _,解决供体器官不足和器官移植后_ _的问题。 (三)胚胎工程的应用1.体外受精和胚胎的早期培养(1)卵母细胞的采集和培养:主要方法:用_处理,使其排出更多的卵子,然后,从_中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。第二种方法:从刚屠宰母畜的 中采集卵母细胞;第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从_中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞,都要在体外经 后,才能与 受精。(2) 精子的采集和获能:在体外受精前,要对精子进行_处理。(3) 受精:获能的精子和培养成熟的卵细胞在_溶液或专用的 溶液中完成受精过程。(4)胚胎的早期培养:精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入 中继续培养,以检查_和_。培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需添加 、 、 、 等营养成分,以及_等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时,可将其取出向_ 。不同动物胚胎移植的时间不同。(牛、羊一般要培育到_ _或_ _阶段才能进行移植,小鼠、家兔等实验动物可在 的阶段移植,人的体外受精胚胎可在 阶段移植。)2.胚胎移植(1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到_其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“_ ”,接受胚胎的个体称为“_”。(供体为优良品种,作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。)地位:如转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎,都必须经过_才能获得后代,是胚胎工程的最后一道“工序”。(2) 胚胎移植的意义:大大缩短了_,充分发挥雌性优良个体的 能力。(3) 生理学基础:动物发情排卵后,同种动物的供、受体生殖器官的_。这就为供体的胚胎移入受体提供了_。早期胚胎在一定时间内处于_状态。这就为胚胎的收集提供了可能。受体对移入子宫的外来胚胎_(发生或者不发生) 反应。这为胚胎在 的存活提供了可能。供体胚胎可与受体子宫建立正常的_联系,但供体胚胎的 在孕育过程中不受影响。 (4) 基本程序主要包括:对供、受体的选择和处理 。选择_优秀的供体,有健康的体质和正常繁殖能力 的受体,供体和受体是_ _(相同或者不同)物种。并用激素进行_ _,用_ _对供体母牛做_ _处理。配种或人工授精 。对胚胎的收集、检查、培养或保存 。配种或输精后第7天,用特制的 装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到_ _或_ _阶段。直接向受体移植或放入196的 中保存。对 进行移植。移植后的检查。对受体母牛进行_ _的检查。3.胚胎分割(1)概念:是指采用机械方法将 _ _切割2等份、4等份等,经移植获得 的技术。(2)意义:来自同一胚胎的后代具有_ _(相同或者不同)的遗传物质,属于_ _(有性还是无性)繁殖。(3)材料:发育良好,形态正常的 。(桑椹胚至囊胚的发育过程中,细胞开始分化,但其 仍很高 ,也可用于胚胎分割。)(4)操作过程:对囊胚阶段的胚胎分割时,要将_分割,否则会影响分割后胚胎的_ _和_ _。41 转基因生物的安全性(一)转基因成果令人叹为观止11972年 国的 第一次重组DNA获得成功。 2转基因生物的重要成果微生物方面:如可以清除石油污染的( );使用DNA重组的微生物生产( )转基因动物:受到( )获得成功的鼓舞,在培育( )方面不断取得辉煌成就。还把转基因动物变成( )让他们的奶制品中富含人类所需要的蛋白质。转基因植物:培育出了具( )( )( )( )等全新形状的农作物;全球种植转基因农作物面积做大的国家是( )种植最多的转基因农作物是( ),其次是( )(二)对转基因生物安全性的争论1在转基因生物中,有时候会出现一些人们意想不到的后果。原因是:(1);(2);(3)。2转基因生物引发人们在、和三个方面发生了激烈的争论。(见下表)来源:争论不赞成赞成食物安全观点绝对不能对转基因食物安全性掉以轻心( )理由反对“ ”,对食物安全性检测不仅要( ),还应包括( )。担心出现( )。担心出现( )。担心( )。担心侵犯宗教信仰或素食者的权益。“实质性等同”是( )。( )。科学家负责的态度可以防止新的过敏原产生。至今尚未发现因食用转基因而影响人体健康的实例。没有足够的证据证明转基因食物有问题生物安全观点( )转基因农作物不大可能对( )构成威胁理由可能会扩散到种植区外变成野生种类;或者( )。有可能成为“ ”,威胁生态系统其他生物的生存。可能重组出对人类或其他生物有害的病原体。有可能使杂草成为除不掉的“超级杂草”扩散到种植区外,会很快死亡。要表现出人们赋予的新性状,必须具有( )。由于( )的存在,他们很难与其他植物杂交。花粉( )有限。花粉( )有限环境安全观点转基因生物会对生态系统稳定性和人类生活环境造成破坏( ) 理由打破( )的缘由界限,改变了生态系统中( )和( )。重组微生物可能( )。 重组DNA与微生物杂交,可能( )转基因植物花粉中含有( ),可通过蜜蜂进入蜂蜜,在经过( )传递;最后有可能进入其他动物和人体内。转基因并不会改变( ),不会破坏生态系统的稳定性。转基因抗虫植物的种植,可以大大( )抗除草剂农作物的种植,减轻了农田管理的负担,保护了农田土壤环境。某些新闻报道不实,增加了( )(三)理性看待转基因技术 1正确的做法,而不能。2制定政策和法规,如我国制定的基因工程安全管理办法、。42 生物技术的伦理问题(一)克隆技术引发的伦理问题观点理 由不赞成克隆人严重违反人类( ),是克隆技术的滥用。克隆人冲击了现有的( )等传统的( )。克隆人是人为制造( )和( )上都不健全的人。克隆技术尚不成熟。赞成有人认为:是一项科学研究,社会应该允许科学家研究克隆人。伦理道德观念可以改变。技术性问题可以通过( )( )和( )等得到解决。中国禁止( )克隆人;坚持四不原则:( )、不允许、( )、不接受任何( )克隆人实验;不反对( )克隆人。(二)设计试管婴儿技术引发的伦理问题观点理 由不符合伦理道德把试管婴儿当做( ),是对生命的不尊重。早期的生命也有活下去的权力,( )多余的胚胎无异于“谋杀”。有人会滥用设计试管婴儿技术,如( )。符合伦理道德( )是为了救人,是救治患者最好、最快捷的方法之一。提供骨髓中的( )细胞不会对试管婴儿造成损伤。脐带血乃婴儿的“ ”政府观点2003年7月,中国卫生部在 中规定,“实施体外受精胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部的批准证书”,而“ ”就包括在衍生技术之中。(三)基因检测引发的伦理问题 1基因身份证:把个人的基因和基因检测出来,记录在磁卡上,做成个人基因身份证。2基因检测的优点:通过基因检测可及早采取措施,适时治疗,挽救患者生命。3基因检测引发的问题及解决办法(1)问题:目前,人类对基因结构及基因相互作用尚缺乏足够认识,要想通过达到预防疾病的目的是困难的;基因检测结果本身会给受检者带来巨大的;个人基因资讯泄露会造成,导致失业、婚姻困难、人际关系疏远等。(2)解决办法:对于基因歧视现象,可以通过正确的
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