江苏省射阳县第二中学高三生物教学资料 微生物的分离与培养活动导学案（无答案）.doc

活动导学案【活动目标】：1、了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术 2、利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数3、简述纤维素酶的种类及作用，从土壤中分离出分解纤维素的微生物；掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术【活动重点】1、培养基的成分，类型 ，消毒和灭菌的区别2、运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。3、从土壤中分离某种特定微生物的操作技术，探讨微生物的利用。【活动难点】： 1、运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。2、纤维素酶的组成及作用 3、研究培养基对微生物的选择作用【活动方案】： 活动一、培养基与无菌技术1、 培养基对的营养构成：一般都含有水、_ _、氮源、无机盐，还要满足微生物生长对 ph、_以及 o2的要求。2、类型：3、消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌例题：配制培养基的叙述中，正确的是a制作固体培养基必须加入琼脂 b加入青霉素可得到放线菌c培养自生固氮菌不需氮源 d发酵工程一般用半固体培养基活动二、微生物培养的基本技术1、配制培养基 2、灭菌: 3、接种(1)接种过程：洗净双手点燃酒精灯接种贴标签。(2)接种工具：包括_、涂布器。(3)接种方法：平板划线法、_法。(4)注意事项：整个操作过程要在_旁完成。4、培养 接种后的培养皿放入恒温箱内培养。5、纯化大肠杆菌(1)微生物接种的最常用方法是 和 。(2)平板划线法：通过 在琼脂固体培养基表面 的操作，将聚集的菌种 。(3)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别 ，进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得 。活动三、分离与计数土壤中分解尿素的细菌的实验1菌种筛选(1)培养基：_ _培养基。 (2)特点：_是唯一氮源。2统计菌落数目(1)计算方法：直接计数法；间接计数法。(2)平板计数公式： 每克样品中的菌株数_3分离分解尿素的细菌的实验设计原则(1)设立重复组原则 统计某一稀释度下的平板上的菌落数时，要至少涂布 3 个平板作重复组，来增强实验结果的说服力与准确性。(2)对照原则： 对照实验的概念：除了被测试条件以外，其他条件都相同的实验。主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响。提高实验的可信度。例如为了确认培养基是否被杂菌污染，需以 培养基培养作为空白对照。 断培养基中是否有杂菌污染，需将 的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上的菌落数目，进行对比得出结论。4.分解尿素的细菌的鉴别(1)在培养基中加入 指示剂，则培养基会变红；(2)检测 的变化来判断是否存在。例题：分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是加尿素 不加尿素 加琼脂 不加琼脂 加葡萄糖不加葡萄糖 加硝酸盐 不加硝酸盐a b c d活动四、纤维素和纤维素酶 纤维素分解菌的筛选1、纤维素：是_类物质，广泛存在于自然界，如棉花、木材、作物秸秆等。2、纤维素酶：(1)纤维素酶是一种_酶。(2)三种组分：_、cx 酶和葡萄糖苷酶。(3)作用结果：最终将纤维素分解成_。在下面的反应式中填写相应的酶：纤维素纤维二糖 葡萄糖3、纤维素分解菌的筛选方法： 法。筛选原理：刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被 分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现 我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。活动五、分离土壤中纤维素分解菌实验操作 1分离纤维素分解菌的实验设计(1)实验流程：土壤取样 (此步可省略)梯度稀释将样品涂布到鉴别 的培养基上挑选产生 的菌落。(2)土壤取样：采集土样时，可以选择 的环境。(3)选择培养：目的：增加纤维素分解菌的 ，确保能够从样品中分离到所需要的 。选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 ml培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养12 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。挑选菌落 a刚果红染色法，挑选 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 b常用的刚果红染色法包括两种，一种是先 ，再加入 进行 反应，另一种是在 时就加入刚果红。例题：在加入刚果红纤维素的培养基中出现透明圈的菌落是 a分解尿素的细菌 b硝化细菌 c分解纤维素的细菌 d乳酸菌【课后作业】：1pcr是一种在体外将少量dna大量复制的技术，所需要的酶是从什么菌中提取的taq细菌 芽孢杆菌 火球菌 病毒 a b c d2下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 akh2po4、naz hp04、mgs047h20、葡萄糖、尿素、琼脂、水 bkh2p04、na2hpo4、mgso47h20、葡萄糖、琼脂、水 ckh2po4、na2hp04、mgs047h20、尿素、琼脂、水 dkh2p04、na2 hp04、mgso47h20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水3某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上 菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落 数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 ml) a2.34x108 b2.34x109 c234 d234 4在做分离分解尿素的细菌实验时，a同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个茵落。a同学的结果产生原因可能有 由于土样不同 由于培养基污染 由于操作失误 没有设置对照 a b c d5关于土壤取样的叙述错误的是 a土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 b先铲去表层土3 cm左右，再取样 c取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 d应在火焰旁称取土壤61.纤维素酶可以将下列哪种物质分解 a牛肉片 b鱼片 c滤纸条 d塑料条7微生物体内能够分解纤维素成纤维二糖的是ac1 酶和 cx 酶 bc1 酶、葡萄糖苷酶 ccx 酶、葡萄糖苷酶 d葡萄糖苷酶8刚果红染色时，加入刚果红可在制备培养基时 梯度稀释时 倒平板时 涂布时 培养基上长出菌落时a b c d9下列关于分离纤维素分解菌实验的叙述，错误的是a经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上b选择培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少c经稀释培养后，用刚果红染色d对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上10关于测定土壤中细菌的数量，正确叙述是 a一般选用103107倍的稀释液分别涂布 b测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释 c测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释 d当第一次测量某种细菌的数量，可以将101107倍的稀释液分别涂布到平板上培养11关于微生物的培养，叙述错误的是 a细菌一般在3037c的温度下培养12 d b放线菌一般在2528c的温度下培养57 d c霉菌一般在2528c的温度下培养34 d d不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间12需要在火焰旁操作的有 土壤取样 称取土壤 稀释土壤溶液 涂布平板微生物的培养 a b c d13. 有关培养基的叙述正确的是a培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质b培养基只有两类：液体培养基和固体培养基c固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基d微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌14培养流感病毒时，应选用a固体培养基 b含有多种无机盐的培养液 c活的鸡胚 d无菌的牛肉汤15.以下关于微生物对氧的需求的叙述中正确的是a产甲烷杆菌属厌氧呼吸，但氧的存在不影响其生存b链球菌进行厌氧呼吸，不能接触空气c黄色短杆菌在氧气充足时才能产生谷氨酸d谷氨酸棒培育杆菌是厌氧呼吸16微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是a乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的 b微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子 c培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利d生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足来17可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 a以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂b以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂c以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹试剂d以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂18下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中，错误的是a用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板b取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 ml，分别涂布于各组平板上c将实验组和对照组平板倒置，37 恒温培养2448hd确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数19苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要