QA-T-003TN检测方法.doc

Heinz(China)文件主题：全氮和蛋白质含量的测定方法实施日期： 文件编号：QA-T-003文件分类：质量保证文件文件版本：02编写： 审核： 批准：被替代版本：01发放范围QA1 目的规范检验方法，确保检测的准确性。2 适用范围本方法适用于亨氏(中国)调味食品有限公司的产品和原材料的全氮/蛋白质含量的测定。3 使用的仪器、试剂3.1 仪器：FOSS 2020型消化炉、FOSS 2200型自动蒸馏仪、BRAND数显滴定仪。3.2 试剂：浓H2SO4（95%98%）、催化剂（CuSO4、K2SO4）、40%的NaOH水溶液 、甲基红指示剂(C=0.1%的乙醇溶液)、溴甲酚绿指示剂(C=0.1%的乙醇溶液)、4%的硼酸水溶液(内含0.7%的甲基红指示剂及1%的溴甲酚绿指示剂)。 4 操作步骤4.1样品取样量的确定，如表1,其它未在表中列出来的样品，根据其全氮含量来确定其取样量，保证其全氮含量为7mg28mg(根据步骤5中计算公式，初步判定取样量)，其中需要称重取样的均需精确到0.0001g。表1:样品名称取样量酱油产品、半成品、酸水解植物蛋白液、头油、二油、浓缩豉油 1ml 三油、四油 2ml黄豆0.13g0.50g面粉0.36g1.00g4.2 准确称取（或量取）样品置于干燥的FOSS消化管中，加入一片CuSO4-K2SO4混合催化剂和10ml浓H2SO4。4.3将加入样品及试剂的消化管插入已预热的消化炉中，并按消化炉的操作方法连接仪器，样品开始消化。4.4 继续消化直到全部样品变为绿色澄清液，按样品的类型不同，所需消化的时间不一样，样品的类型及消化所需最少时间参考表2(如果消化炉未预热就放入消化管进行消化，要相应的加上消化炉预热的时间约40min），其它未在表中列出来的样品，根据其全氮含量来确定其消化时间。在消化过程中一定要保证消化时间足够，否则会导致消化不完全而使结果偏低。含糖量高的样品消化过程中要多观察，如果发现消化过程中发泡过多，蒸馏起来的酸雾不能将粘在消化管壁的碳化物冲下去时，用手摇动消化管，使粘在消化管壁的碳化物冲下去，避免消化不完全。表2:样品名称消化时间酱油生抽产品（包括成品、半成品）、酸水解植物蛋白液、头油、二油、浓缩豉油、三油、四油 0.5h1h 酱油老抽产品（包括成品、半成品）1.5h黄豆、面粉等原材料1.5h4.5 将消化完成的样品消化管从消化炉中取出，放冷后进行蒸馏。4.6 选择合适的蒸馏程序（见FOSS自动定氮仪作业指导书），按蒸馏仪的使用方法进行操作。4.7蒸馏步骤完成后，然后放低接收液三角瓶，使冷凝管口离开液面约1cm，用蒸馏水冲洗蒸馏物输出管，取下三角瓶。4.8 滴定，将三角瓶内接收液用0.1000mol/l HCl标准溶液滴定至紫红色。4.9 取与处理样品相同量的混合催化剂、浓硫酸按同一方法做试剂空白试验。5 计算 式中： V1样品滴定时耗用HCl标准溶液体积，ml； V2空白滴定时耗用HCl标准溶液体积，ml； N0.1000mol/l HCl 标准溶液当量浓度，mol/l； 0.014氮的毫克当量； V样品的体积（或重量），ml（或g）；蛋白质含量（%）= FTN蛋白含量（%）= FTN/（1-水分%）式中：F氮换算的蛋白质的系数，黄豆为5.71，面粉为5.70，小麦为5.