高中生物 5.3血红蛋白的提取和分离同步作业（含解析）新人教版选修1.doc

2014-2015年人教版选修一5.3血红蛋白的提取和分离同步作业一、单项选择1. deae-纤维素离子交换层析法可用于分离纯化蛋白质，主要是由于（ ）a蛋白质的溶解度不同 b蛋白质与层析介质吸附力不同c蛋白质分子能与其对应的配体进行特异性结合 d蛋白质所带电荷不同2. 利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是()a蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小b蛋白质相对分子质量的大小c蛋白质所带电荷的多少 d蛋白质溶解度的大小3. 凝胶色谱法分离蛋白质时由色谱柱下端最先流出的是( )a.相对分子质量较小的蛋白质b.相对分子质量较大的蛋白质c.凝胶颗粒d.葡萄糖或琼脂糖分子4. 下面说法不正确的是()a.在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液ph的影响，维持ph基本不变b.缓冲溶液通常由1-2种缓冲剂溶解于水中配制而成c.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程d.透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内5. 使用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量时，可选用一组已知相对分子质量的标准蛋白同时进行电泳，根据已知相对分子质量的标准蛋白的电泳区带位置，用电泳迁移率和相对分子质量的对数作标准曲线，可以测出未知蛋白的相对分子质量。下列说法不正确的是( )a.sds能与蛋白质形成复合物而掩盖不同蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率取决于分子的大小b.与已知相对分子质量的标准蛋白的电泳带相等，只能估计出待测蛋白质的相对分子质量c.sds在引发剂和催化剂的作用下参与构成聚丙烯酰胺凝胶d.如果只是分离混合物而不需要测定蛋白质的相对分子质量时，就无需加入sds，此时的电泳迁移率取决于所带电荷和分子的大小6. 关于凝胶色谱柱的装填，除哪项外均为正确解释()a.交联葡聚糖凝胶(sephadexg75)“g”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值b.色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装c.用300ml物质的量浓度为20mmol/l的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12hd.凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液7. (多选)电泳实现样品中分子的分离是利用了()a各种分子带电性质的差异b分子本身的大小c电荷的多少d分子形状的差异8. 利用凝胶色谱法分离蛋白质时，蛋白质洗脱出来的顺序是()相对分子质量最大的相对分子质量最小的相对分子质量适中的a b c d9. 下列有关叙述错误的是（ ）a用醋酸菌制作果醋时，需通入氧气b利用凝胶色谱法可分离相对分子质量不同的蛋白质c进行dna粗提取时，用酒精提取含杂质较少的dnad接种前需对培养基、培养皿、实验操作者的双手等进行灭菌处理10. 下列有关电泳的叙述，不正确的是()a电泳的支持介质可用醋酸纤维薄膜，滤纸、琼脂凝胶等b带电粒子的电荷量、粒子大小和形状都可以影响泳动速度c点样时，应将有记号的一面向上平铺在玻璃板上进行点样d电泳时，电流强度越大，电泳效果越好二、非选择题11. 商品化植酸酶主要来自微生物，首先筛选出产酶的菌株，然后制备植酸酶，请根据下面的流程图回答以下问题： (1)中的主要成分有哪些？_；中包含哪些成分？_。(2)请写出一种纯化得到植酸酶的方法：_；其依据是_。12. 青蒿素是治疗疟疾的重要药物。研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径（如图中实线方框内所示），并且发现酵母细胞也能够产生合成青蒿素的中间产物fpp（如图中虚线方框内所示）。结合所学知识回答下列问题：（1）若利用植物组织培养技术进行青蒿素的工厂化生产，可将青蒿细胞经培养获得的 细胞置于发酵罐中培养，从中提取青蒿素。（2）根据图示代谢过程，科学家在培育能产生青蒿素的酵母细胞过程中，需要向酵母细胞中导入的基因是 ，具体操作中可利用 技术检测目的基因是否导入酵母菌中。（3）实验发现，酵母细胞导入相关基因后，该基因能正常表达，但酵母菌合成的青蒿素仍很少，根据图解分析原因可能是 。(4) 若把此转基因酵母细胞制成固定化细胞，配制的海藻酸钠浓度是很关键，原因海藻酸钠的浓度过高， ；海藻酸钠的浓度过低， 。3参考答案一、单项选择1.【答案】d【解析】分配层析利用样品各组分在固定相和流动相间溶解度的不同(分配系数不同)来进行分离；吸附层析法利用吸附剂表面对样品组分吸附能力强弱不同来进行分离；亲和层析由于配体与待分离物质进行特异性结合；deae-纤维素离子交换层析法利用样品组分对离子交换剂静电力的差异来进行分离。2.【答案】b【解析】凝胶色谱法所用的凝胶实际上是一些微小多孔的球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。3.【答案】b【解析】利用凝胶色谱法分离蛋白质过程中相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶颗粒内部，通过的路程较短，速度较快，先洗脱出来；相对分子质量较小的蛋白质能够进入凝胶颗粒内部，通过的路程较长，速度较慢，后洗脱出来。因此最先流出的应是相对分子质量较大的蛋白质，而凝胶颗粒是不能流出的。4.【答案】d【解析】透析袋一般是用硝酸纤维素(又叫玻璃纸)制成的。透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。5.【答案】c【解析】聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂n，n亚甲基双丙烯酰胺在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶，即sds不参与构成聚丙烯酰胺凝胶。6.【答案】d【解析】本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(sephadexg75)，其中g表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，因此，一旦发现有气泡，必须重装;在洗脱过程中，应在约50cm高的操作压下，用300ml物质的量浓度为20mmol/l的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12h，以使凝胶装填紧密;凝胶溶胀时，应使用蒸馏水将其充分溶胀，制成凝胶悬浮液。7.【答案】abcd【解析】电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状、电荷的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。8.【答案】c【解析】分子很大，完全不能进入凝胶内的任何孔隙的蛋白质洗脱出来的时间最短；分子大小适中，能进入凝胶内孔隙中孔径大小相应部分的蛋白质，洗脱出来的时间次之；分子很小，能进入分子筛全部孔隙内的蛋白质，洗脱出来的时间最长。9.【答案】d【解析】试题分析：醋酸菌是一种好氧细菌，能在氧气充足的情况下将糖分或乙醇转化为醋酸，所以用醋酸菌制作果醋时，需通入氧气，a项正确；凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，因此利用凝胶色谱法可分离相对分子质量不同的蛋白质，b项正确；dna不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，进行dna粗提取时，可用酒精提取含杂质较少的dna，c项正确；接种前需对培养基、培养皿等进行灭菌处理，实验操作者的双手需要进行消毒处理，d项错误。 10.【答案】d【解析】电泳时，每厘米膜宽电流强度为0.40.8 ma较好，并不是电流越强越好。二、非选择题11.【答案】(1)小分子杂质 含植酸酶等多种蛋白质(2)凝胶色谱法 根据蛋白质之间分子大小差异进行纯化(或电泳法 根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化)【解析】植酸酶是蛋白质，属于大分子有机物，含酶的发酵液经过透析后，能够除去小分子杂质，这样就能够得到植酸酶。对于粗提取的植酸酶可以用凝胶色谱法进行提纯，由于蛋白质带有电荷，亦可用电泳法进行纯化。12.【答案】ii（9分）（1）愈伤组织（1分）（2）ads酶基因（1分） dna分子杂交技术（1分） （3）酵母细胞中部分fpp用于合成固醇（2分）（4）凝胶珠不易形成；形成凝胶珠内包埋细胞过少（各2分）【解析】（1）利用植物组织培养技术进行工厂化生产青蒿素时，通常从培养的愈伤组织中提取青