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专题2 微生物的培养与应用1.(2013.潍坊摸底)下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()a微生物培养前,需对培养基进行消毒b测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法c分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度d分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中的唯一氮源2.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是( )a涂布了一个平板,统计的菌落数是230b涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238c涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163d涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值2333.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物:(1)在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;(2)在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;(3)在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。依次利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出( )大肠杆菌霉菌放线菌圆褐固氮菌根瘤菌a、 b、c、 d、4.下列有关刚果红染色法的叙述,不正确的是( )a刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入b刚果红可以在菌落形成后加入c刚果红在菌落形成前倒平板时加入,加入的刚果红不需要灭菌d在菌落形成后加入刚果红时,刚果红不需要灭菌5.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( )化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线消毒高压蒸汽灭菌巴氏消毒法a bc d6(2013衡阳模拟)下列关于大肠杆菌的培养中叙述不正确的是()a在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑ph、温度和渗透压等条件b在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行消毒c若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的稀释度d使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃7.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌a bc d8(2013西城模拟)下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是()a利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数b接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落c以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌d用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少9.如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5,下列操作方法正确的是( )a操作前要将接种环放在火焰旁灭菌b划线操作须在火焰上进行c在5区域中才可以得到所需菌落d在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌10.分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是( )加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐 a b c d11. 2012吉林二模富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是利用不同微生物生命活动特点的不同,制定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下列问题。(1)重复培养的目的是_。(2)的菌落中大部分是降解_微生物。设置的目的是_。(3)采用单细胞挑取法,将所选菌种接种到的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是:接种环要_灭菌,待其_后,再挑取菌落接种到试管中,并塞好棉塞,操作完成后需将接种环在火焰上灼烧,目的是_。(4)如果用这种方法分离土壤中的纤维素分解菌,经常用加入了_的鉴别培养基,在该培养基上,纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现_。12下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答:试剂牛肉膏蛋白胨nacl琼脂水用量5 g10 g5 g20 g1000 ml(1)培养基的类型有很多,但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后,一般还要调节ph,并对培养基进行_处理。该培养基从物理性质上分类属于_。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后,发现培养基上菌落连成一片,可能的原因是什么?(列举两项)_。选修一 专题二练习答案1.解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度,以便能从中选择出菌落数在30300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中的唯一氮源。答案:a2.解析:在设计实验时,一定要涂布至少3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以a、b不正确。c项虽涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,此时,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。答案:d3.解析:利用(1)可以分离出圆褐固氮菌(自生固氮菌),而不能分离出根瘤菌(共生);利用(2)可以除去和而分离出,再用(3)除去而分离出。答案:b4.解析:从对两种筛选纤维素分解菌的方法进行比较分析入手,结合微生物培养过程无菌条件的控制方法来解答该题。刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入,也可以在菌落形成后加入。若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红,则所加刚果红要进行灭菌,以防杂菌的侵入,影响纤维素分解菌菌落的形成;若在菌落形成后加入刚果红,则不需要灭菌。答案:c5.解析:培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。答案:a6.解析:本题主要考查微生物培养和无菌操作的相关知识。培养过程中,除营养条件要满足需要外,还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件是否适宜;灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以,对培养基和培养皿进行灭菌而不是消毒;使用稀释涂布平板法时要保证样品稀释比例合适,这样才会有更科学的数据;有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。答案:b7.解析:平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故正确;平板划线法采用接种针进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故错误;纯化时,要进行无菌操作,需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故错误。答案:c8.解析:接种划线可以将菌体分散,最后得到单个菌体细胞,经过培养可以得到单个菌落;用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数;在泡菜的腌制过程中,开始亚硝酸盐含量增加,10天后含量开始下降;以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌。答案:a9.解析:在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。答案:d10.解析:分离土壤中分解尿素的细菌,应该以尿素为唯一氮源,不用加硝酸盐来提供氮源;另外还要加葡萄糖提供碳源;加琼脂配制固体培养基,以利于分离、鉴定、计数等。答案:b11.解析:(1)通过重复培养可获得更多的分解对羟基苯甲酸的微生物。(2)通过培养分离获得的主要是分解对羟基苯甲酸的微生物。(3)接种微生物时要对接种环进行灭菌,待接种环冷却后再接种,接种完毕后还需对接种环灼烧以杀灭残留的微生物。(4)刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,该复合物就无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。答案:(1)扩大培养(使分解对羟基苯甲酸微生物的比例增高) (2)对羟基苯甲酸 对照作用 (3)在火焰上灼烧冷却 杀灭残留物 (4)刚果红 透明圈12.解析:培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源。配制培养基时加入了琼脂,因此该培养基属于固体培养基。培养基配制完成后要调ph和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素,可作为有机碳源。分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂
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