植物组织培养复习题 大二 生物技术及应用.doc

植物组织培养复习题 大二 生物技术及应用1植物组织培养:指将植物的立体器官，组织，细胞以及去除细胞壁的原生质体，放在离体无菌条件下，在人工控制的环境下，培养在人工配制的培养基上对其进行克隆，使其生长，分化并成长为完整植株的过程。2细胞全能性：是指植物的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并且具有发育成完整植株的潜在能力。（植物组织培养的理论依据）3褐变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质4体细胞胚：高等植物的体细胞在一定条件下所诱导形成的胚5玻璃化：指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩芽，叶片往往会出现半透明状或水渍状6胚胎培养：将植物的胚胎和母体分离，培养在已知化学成分的培养基上7胚乳：是胚胎发育过程中提供养料的主要场所8胚乳培养：将胚乳从固体上分离出来，放在无菌人工环境条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程9花药培养：是指应用组织培养技术，将花药发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养，以诱导其花粉粒改变发育过程，形成花粉胚或愈伤组织，从而分化成苗的技术10花粉培养：将花粉从花药中游离出来，再进行离体培养11继代培养：即定期把它转移到新鲜的相同培养基上的培养12无病毒苗：指不该含有该种植物的主要危害病毒13微尖嫁接技术：在人工培养基上，培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗技术1植物生长素的调节物质：生长素（在于诱导遇上组织的形成） 细胞分裂素（促进细胞分裂与分化，延迟细胞衰老，增强蛋白质合成，促进侧芽生长） 赤霉素（能促进已分化芽的伸长生长）2植物组织培养类型：愈伤组织培养 器官培养 胚培养 细胞和原生质体培养 3培养基的成分包括：无机营养 维生素类 氨基酸 有机附加物 植物生长调节物质 糖类 水 琼脂 4培养基种类：态相（固体 液体）培养过程（初代 继代）作用（诱导 增殖 生根） 营养水平（基本 完全）5植物生长调节物质包括：内源激素生长素 细胞分裂素 赤霉素 脱落酸 乙烯 人工合成的植物生长调节剂6微尖嫁接脱毒主要程序：无菌砧木培养 茎尖准备 嫁接 嫁接苗培育 移植8试管苗的生态环境及特点 环境：高温且恒温 高温 弱光 无菌 特点:a试管苗生长细弱，茎叶表面角质层不发达b试管苗茎叶虽呈绿色，但叶绿体的光合作用较差c试管苗的叶片气孔数目少，活性差d试管苗根的吸收功能弱e对逆境的适应和抵抗能力差7外植体的接种：（无菌操作）-是经过表面灭菌后植物材料切碎或分离出器官，组织，细胞，转放到无菌培养基上的全部操作过程。 培养：光照 温度 湿度 氧气9茎尖培养可分为：茎尖分生组织培养 普通茎尖培养10茎尖微繁技术一般方法：a无菌培养体系的建立 b芽的增值 c中间繁殖体的繁殖 d壮苗的生根 e试管苗的移植11ms培养基的特点：无机盐的浓度高，具有高含量是N k 尤其硝酸盐的用量很大，同时还含有一定量的铵盐，这使得他的营养丰富，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，有加速愈伤组织和培养物生长的作用，当培养物久不转移时仍可维持其生存12外植体的选择;a选择优良的种质 b选择健壮的植株 c选择最适的时期 d选择适宜的大小13单倍体植株在育种中的作用：a克服后代分离，缩短育种年限 b选择效率高 c有利于隐性基因控制性状的选择 d快速获得自交系的超雄株14脱毒方法（茎尖脱毒方法）a原理：病毒在植物体内的分布，茎尖大小与脱毒效果 b方法：取样消毒 剥取茎尖与接种 培养 生根诱导15其他组织培养脱毒方法：愈伤组织培养脱毒方法 珠心胚胎培养脱毒 微尖嫁接脱毒 花药培养脱毒 16理化方法脱毒 理化脱毒方法：物理方法（高温处理 低温处理）化学（病毒抗血清预处理 rna合成抑制剂处理 三氮唑核处理）17污染:是指在组培过程中培养基和培养料滋生杂菌，导致培养失败的现象。原因：a培养基及各种器具消毒不彻底 b外植体灭菌不彻底，在菌残存在细胞组织中c操作时人为因素带人d环境不清洁e超净工作区污染 措施：做好器具灭菌 外植体灭菌 做好无菌操作技术 搞好组培室环境条件 正确使用和维护好超净工作台18为什么脱毒出来进行病毒鉴定？ 脱毒处理后产生无病毒原种苗只是脱出了原母株上的特定病毒，抗病性并未增加，因而在自然条件下易受病毒再侵染而丧失其利用价值，因此还须病毒鉴定19培养基的配制方法：将配制好的母液按顺序排列，并逐一检查是否沉淀和变色，避免使用已失效的母液，先取适量的蒸馏水放入容器，然后依次用专用的移液管按需要量吸取预先配制好的各种母液及生长调节物质等，并混合在一起，再讲琼脂和糖加入其中，最后加蒸馏水定容至所需体积，用ph调至所需数值，然后分装培养瓶中。20超净工作台：a用水和肥皂洗净双手，穿上吗，灭菌过的专用实验服，帽子和鞋子进入接种室。b打开超净工作台和无菌操作时的紫外灯，照射20分钟。c操作前10分钟使超净工作台处于工作状态，让过滤室空气吹拂工作台面和四周的台壁。d照射20分钟后并关闭紫外灯。21高压灭菌锅的使用：灭菌前一定要在灭菌器内加蒸馏水淹没电热丝，待压力达到49.0kpa时。开启排气阀，将内部的冷空气排除，当压力升到108kpa，温度为121摄氏度时，维持15-20分钟，即可达到灭菌目的，灭菌后应尽快的转移培养基，使其冷却。22外植体的灭菌：在灭菌前先要进行预处理，采用预处理方法，先对植物组织进行修正，去掉不需要的部分，将准备的植物材料在凉水中冲洗干净。表面灭菌处理方法，把材料放在70%的酒精中，约30秒后，在0.1%的升汞中浸泡10分钟，然后用无菌水冲洗3-5次，灭菌是进行搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触。23褐变：影响因素：a基因型 外植体的生理状态 培养基的成分 材料转移时间 b措施 ：1选择适宜的外植体及最佳培养基 2连续转移 3加抗氧化剂 4加活性炭 玻璃化：a产生因素：激素浓度