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第36讲 基因工程1(2013大纲全国高考)下列实践活动包含基因工程技术的是()a水稻f1花药经培养和染色体加倍,获得基因型纯合新品种b抗虫小麦与矮秆小麦杂交,通过基因重组获得抗虫矮秆小麦c将含抗病基因的重组dna导入玉米细胞,经组织培养获得抗病植株d用射线照射大豆使其基因结构发生改变,获得种子性状发生变异的大豆解析:选ca项属于单倍体育种,原理是染色体变异,不包含基因工程技术;b项属于杂交育种,原理是基因重组,不包含基因工程技术;c项中将含有目的基因的重组dna导入受体细胞,属于基因工程,原理是基因重组,包含基因工程技术;d项属于诱变育种,原理是基因突变,不包含基因工程技术。2(2013广东高考)从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽p1。目前在p1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是()a合成编码目的肽的dna片段b构建含目的肽dna片段的表达载体c依据p1氨基酸序列设计多条模拟肽d筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽解析:选c由题意可知,已经获得该目的基因片段,不需要合成编码目的肽的dna片段;需要构建含目的肽dna片段的表达载体,但这不是第一步;蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能,设计p1氨基酸序列,从而推出其基因序列;该基因表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽p1,而目的肽是抗菌性强但溶血性弱的药物,所以必须对其进行改造,保持其抗菌性,抑制其溶血性。3(2013安徽高考)下图为通过dna分子杂交鉴定含有某特定dna的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是()a根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目b外源dna必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制c重组质粒与探针能进行分子杂交是因为dna分子脱氧核糖和磷酸交替连接d放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定dna的细菌菌落位置解析:选d通过菌落数只能大约推测出活菌数,不能准确计算活菌数;外源dna可以随质粒复制而复制,依赖于质粒上的复制原点,而启动子和终止子与基因表达有关;dna杂交是利用碱基互补配对原则进行的;因为放射性标记的dna探针能与相应的dna杂交,产生放射自显影,而只有特定的dna才与探针相结合,所以可以显示原培养皿中含有特定dna的细菌菌落位置。4(2012江苏高考)图1表示含有目的基因d的dna片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有msp、bamh、mbo i、sma4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为ccgg、ggatcc、gatc、cccggg。请回答下列问题。(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_连接。(2)若用限制酶sma 完全切割图1中dna片段,产生的末端是_末端,其产物长度为_。(3)若图1中虚线方框内的碱基对被ta碱基对替换,那么基因d就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的dna片段,用限制酶sma i完全切割,产物中共有_种不同长度的dna片段。(4)若将图2中质粒和目的基因d通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因d不能正确表达,其最可能的原因是_。解析:本题考查基因工程的操作过程,意在考查考生的识图能力和分析推理能力。(1)一条脱氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间是通过“脱氧核糖磷酸脱氧核糖”相连的。(2)从sma的识别序列和酶切位点可知,其切割后产生的是平末端,图1中dna片段有两个sma的识别序列,故切割后产生的产物长度为5343537(bp)、79633790(bp)和6583661(bp)的三个片段。(3)图示方框内发生碱基的替换后,形成的d基因失去了1个sma的识别序列,故d基因、d基因用sma完全切割所得产物中,除原有d基因切割后形成的3种长度的dna片段外,还增加一种d基因被切割后出现的长度为5377901 327(bp)的dna片段。(4)目的基因的两端都有bamh的识别序列,质粒的启动子后抗生素a抗性基因上也有bamh的识别序列,故应选用的限制酶是bamh,此时将抗生素b抗性基因作为标记基因,故筛选时培养基中要添加抗生素b。因为经同种限制酶切割后目的基因和质粒有正反两种连接方式,若重组质粒导入受体细胞却不能正确表达,很可能是由于导入受体细胞的重组质粒是由目的基因

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