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文档简介
选修一部分考点十三微生物的培养及其在食品发酵生产中的应用高考预测(1)微生物的培养和利用是高考考查的重点和热点,试题多与社会、生活热点密切联系,通过一些新的情境或材料进行考查,主要内容涉及:微生物的培养、分离、纯化和计数。培养基的成分、制备及对微生物的选择作用。果酒和果醋的制作原理、过程。(2)结合微生物培养的有关知识考查微生物在食品发酵生产中的应用将是高考命题的趋势。预测体验1 下图是苹果醋的制作流程简图下列有关叙述不正确的是()a利用细胞的固定化技术可提高过程微生物的利用率b图中需要通氧的是过程的初期和过程c温度是影响过程能否顺利完成的重要条件d制酒和制醋的微生物进行细胞呼吸产生co2的场所都是细胞质基质d利用细胞的固定化技术可提高过程微生物的利用率;图中需要通氧的是过程的初期酵母菌数量增加和过程醋酸菌发酵;过程顺利完成有严格的温度要求;制酒和制醋的微生物进行细胞呼吸产生co2的场所前者是细胞质基质,后者进行有氧呼吸场所是细胞膜。2下列有关泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定的实验叙述中,正确的是()a将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水(盐和清水的质量比为41)混匀装瓶b发酵过程始终要保持密封状态,泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水c在酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色沉淀d随发酵进行,亚硝酸盐含量逐渐增加,用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定b盐和清水的质量比为14;乳酸菌为厌氧菌,发酵过程始终要保持密封状态,泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水;在酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,再与n1荼基乙二胺盐反应形成玫瑰红色沉淀;随发酵进行,亚硝酸盐含量逐渐增加,用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定,还要进行计算。3下列在微生物的实验室培养过程中,关于平板划线操作的叙述正确的是()a使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌b打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞好棉塞c将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可d最后应将平板倒置,放入培养箱中培养d使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程仍要灭菌;打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞;将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线后盖上皿盖;最后应将平板倒置,放入培养箱中培养。4(2014湖北三校联考)在日常生活中,一提到细菌、真菌及病毒这些微生物,人们往往首先想到它们的害处,其实,很多微生物对人类是有益的,它们与我们人类的关系非常密切,而且人类已经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题:(1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序:配制培养基接种培养观察记录纯化培养。采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是_。若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌能否将酒精转变成醋酸?_,原因是_。(2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的_,_可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。(3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌,经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌的常用方法有_和_。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、_。解析(1)采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环。目的是灭菌;若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌不能将酒精转变成醋酸,原因是醋酸菌是好氧菌,葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长。(2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是毛霉。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。答案(1)灭菌不能醋酸菌是好氧菌,葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长(2)毛霉肽和氨基酸脂肪酶(3)平板划线法稀释涂布平板法无机盐、碳源、氮源53540%的甲醛水溶液(福尔马林)可作为防腐剂,其防腐的原理是使蛋白质变性。自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌。下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程。请分析回答:(1)过程的目的是_,过程培养出的是_。(2)上述实验中,不需要进行灭菌处理的是_,培养基灭菌的常用方法为_。(3)由的接种可选用_法,通过培养能获得_。经过过程后,取样测定甲醛浓度,选出_,再分离、培养菌株。此菌种异化作用的类型是_。(4)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响,进行了相应实验并得到如下结果。由图可知,当甲醛的初始浓度小于1200 mg/l时,菌株_;当甲醛的初始浓度增高至1600 mg/l时,48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱,甚至失去降解能力,其原因可能是_。解析(1)过程的目的是增加目的菌的菌群数量,过程培养基中以甲醛为唯一碳源,培养出的是以甲醛为唯一碳源的细菌。(2)实验中,活性污泥不需要进行灭菌处理,培养基需要灭菌常用方法为高压蒸汽灭菌法。(3)由培养能获得单个菌落,接种方法常用平板划线法或稀释涂布法,经过过程后,取样测定甲醛浓度,选出甲醛浓度最低的培养瓶,再分离、培养菌株,此菌种异化作用的类型是需氧型。(4)由图示结果可知,当甲醛的初始浓度小于1200 mg/l时,菌株可经过最第96小时可以完全降解甲醛;而当甲醛的初始浓度增高至1600 mg/l时,由于甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性,致使48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱,甚至失去降解能力。答案(1)增加目的菌的菌群数量(提高菌的种群密度)以甲醛为唯一碳源的细菌(2)活性污泥高压蒸汽灭菌法(3)平板划线法(稀释涂布法)单个菌落甲醛浓度最低的培养瓶需氧型(4)可以完全降解甲醛甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性,从而降低了细菌降解甲醛的能力(甲醛浓度过高会产生毒害作用,降低了细菌降解甲醛的能力)6近期网络上流行一种利用制作酸奶来判断牛奶好坏的方法,以下自制酸奶的方法也随之在网络广泛流传:将牛奶倒入玻璃杯,放在沸水中加热10分钟。降温到42 ,每杯牛奶加入015 g酸奶发酵剂。用干净小勺搅拌均匀,在杯子外封上保鲜膜。在42 下保温5小时后,放在40 冰箱中冷藏1小时。请回答相关问题:(1)牛奶在沸水中加热10分钟,属于_(消毒/灭菌)的方式,你推测酸奶发酵剂中含有的成分是_,第步降温到40 的目的是_,第步封上保鲜膜的目的是_。(2)除了沸水中加热10分钟外,本过程中还有哪些操作避免了酸奶被杂菌污染?其原理是?(写出两条即可)操作:_,原理:_操作:_,原理:_操作:_,原理:_(3)酸奶中的多种活菌对健康有益,若要检测不同酸奶中各种有益菌的数量是否达标,可采用_法。答案(1)消毒乳酸菌避免高温使菌种失活避免杂菌掉落,构建无氧环境(2)操作:加入酸奶发酵剂原理:迅速使乳酸菌形成优势种群,抑制杂菌生长操作:封上保鲜膜原理:避免杂菌掉落、并抑制耗氧杂菌生长操作:42 下保温5小时原理:这是乳酸菌的最适温度,其它杂菌在此温度下竞争力弱。(3)稀释涂布平板(法)7苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋,再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味,又有果汁的香甜,喝起来非常爽口。苹果醋还能保健养生、消除疲劳、美容养颜,是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作流程简图,请据图回答问题。(1)为了提高该微生物的利用率,最好用_方法对其进行固定。若要检测是否产生了苹果酒可用_试剂进行检测。(2)过程中使用的微生物是_,该微生物的代谢类型是_。该微生物可以从食醋中分离纯化获得,方法是:第一步:配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的_等基本营养成分。第二步:对培养基用_方法进行灭菌。第三步:接种。微生物常用的接种方法有_。第四步:培养。温度控制在_。第五步:挑选符合要求的菌落。解析(1)微生物可用包埋法进行固定。检测酒精用酸性重铬酸钾溶液,显示灰绿色。(2)由酒精得到原醋,用醋酸菌进行发酵;醋酸菌是异养需氧型;微生物生长所需要的营养物质有水、碳源、氮源、无机盐等;培养基用高压蒸汽法进行灭菌;微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。醋酸菌的最适生长温度是3035 。答案(1)包埋酸性的重铬酸钾(2)醋酸菌异养需氧水、碳源、氮源、无机盐高压蒸汽平板划线法、稀释涂布平板法3035 8回答与酵母菌相关的生物技术问题。(1)用葡萄酿制果洒时,不可过度清洗葡萄,原因是_。发酵装置如图,葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约1/3的空间,其目的是_。若阀a、b一直打开,最后的发酵产物是_(果酒/果醋)。若想得到另外一种发酵产物,阀a、b的正确操作应为_。(2)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:步骤1:野生菌培养一段时间后,接受紫外线照射进行诱变处理。步骤2:制备选择培养基:在基本培养基的基础上,注意添加_和调低ph,加琼脂后灭菌,制成固体平板。步骤3:将诱变处理后的菌液稀释涂布平板。步骤4:根据_选出突变菌。(3)上述步骤2、3的目的分别是_和_。(4)植物秸秆的主要成分为木质素、纤维素和半纤维素,但是酵母菌却无法直接利用,原因是_。若要酵母菌能利用植物秸秆进行发酵制取酒精,请提出解决该问题的方法。_。(列举两种方法)解析(1)果酒制作用的酵母菌来自葡萄的表皮,过度清洗葡萄会使酵母菌流失。酵母菌发酵产生二氧化碳,发酵时要留有大约1/3的空间,防止发酵旺盛时汁液溢出来。若阀a、b一直打开,有氧环境酵母菌发酵受抑制,醋酸杆菌在有氧条件下产生果醋。要得到果酒,关紧阀a造成无氧环境,间歇性打开阀b排出二氧化碳。(2)获得耐高糖和耐酸特性的酵母菌,需用选择培养基,加入高浓度的糖,降低ph。能在此培养基上生长的酵母菌一定是耐高糖和耐酸特性的。(3)稀释涂布平板法能获得单一的菌落。(4)酵母菌中缺乏纤维素酶和半纤维素酶,故酵母菌不能利用植物秸秆。若要酵母菌能利用植物秸秆进行发酵制取酒精,一种方案是让酵母菌能分解纤维素和半纤维素(基因突变、基因工程),另一种方案是将纤维素和半纤维素分解后供酵母菌利用。答案(1)避免葡萄表皮上的酵母菌大量流失防止发酵旺盛时汁液溢出来果醋一直关紧阀a,间歇性打开阀b(或“先短时间阀a、b都打开,后关紧阀a,间歇性打开阀b”)(2)高浓度蔗糖(或葡萄糖)是否能在选择培养基上生长(3)提供高糖和酸性的筛选环境获得单一的菌落(4)缺乏相应分解酶系(或缺乏纤维素酶和半纤维素酶)在酵母菌中转入分解酶系相关基因;利用酶或微生物分解麦秆;利用物理和化学方法分解麦秆;将酵母菌与其他能分解麦秆的微生物混合发酵(答出其中两项即可)考点十四酶的应用与生物材料中物质的提取高考预测(1)通过分析近几年高考试题,可以看出考查点主要涉及以下内容:固定化酶与固定化细胞技术的方法及制备。植物芳香油和胡萝卜素的提取。血红蛋白的提取和分离。(2)血红蛋白的提取和分离是高考命题的热点,在高考中多次涉及,在今后高考仍将会有所涉及。预测体验1固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶,以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括酶活性和酶的数量。下图甲、乙、丙为部分研究结果。下列叙述中,错误的是()a由甲图可知,固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强b由乙图可知,浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好c由丙图可知,固定化酯酶一般可重复使用3次,之后若继续使用则酶活力明显下降d固定化酶的酶活力较高,主要原因是增加了酶与底物的接触面积d由甲图可知,50 游离酯酶酶活力较小,固定化酯酶比游离酯酶对温度变化的适应性更强;由乙图可知,浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好;由丙图可知,固定化酯酶一般可重复使用3次,之后若继续使用则酶活力明显下降;固定化酶的酶活力较高,主要原因是固定化酶的结构更稳定。2下列有关蛋白质和dna的提取和分离的说法,正确的是()a可用蒸馏水胀破细胞的方法从猪红细胞中提取dna和蛋白质b提取dna时,可用不同浓度的nac1溶液反复溶解与析出蛋白质c透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜d用玻璃棒快速搅拌有利于提取dnac猪红细胞无细胞核,不能用于所取dna;提取dna时,可用不同浓度的nac1溶液反复溶解与析出dna以去除杂质;透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜;提取dna时,为防止dna分子断裂,不能用玻璃棒快速搅拌。3酶制剂、固定化酶已广泛应用于多个领域,下列有关叙述正确的是()a透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化b从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响小c尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用dph相同时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉b酶的分离与纯化不能用酸解法;从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响小;尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,不能反复使用;加酶洗衣粉洗涤效果在最适ph时最好。4随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因测序工作的完成,人类跨入了蛋白质时代。若要对蛋白质进行研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题:(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步:_、_、_和纯度鉴定。(2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白,实验前取新鲜血液,需要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样做的目的是_。(3)血红蛋白的提取又可以细分为:红细胞的洗涤、_、分离血红蛋白溶液和_。其中分离血红蛋白溶液时需要用到_(仪器)分出下层红色透明液体。(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡必须重新装。这是因为_。解析本题主要考查dna和蛋白质技术当中蛋白质的提取分离技术。柠檬酸钠是一种抗凝剂,能够防止血液凝固。凝胶色谱柱中如果产生了气泡,气泡就会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。答案(1)样品处理粗分离纯化(2)防止血液凝固(3)血红蛋白的释放透析分液漏斗(4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果5(2014洛阳模拟)“树橘柚者,食之则甘,嗅之则香”,每年的10月,是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝:不仅果肉的营养价值高,其药用价值也高,其皮、核、络、叶都是“地道的药材”。一项研究显示,每天吃一个橘子可以降低患某些癌症(如口腔癌、喉癌和胃癌)的风险。据材料回答问题:(1)某橘子盛产地想建立一个大型的果酒、果醋加工厂,所需的发酵菌种是酵母菌和醋酸菌,接种培养这两种微生物的最常用方法是_和_。(2)有人用压榨法提取橘皮精油以获取利润,提取时往往选用新鲜的材料,理由是_。新鲜的橘皮中含有大量的果蜡、_和_,如果直接压榨,出油率较低。用压榨法提取橘皮精油前需要将橘皮在_中浸泡10小时以上,这样可以提高出油率。压榨是个机械加压过程,要求是_。(3)在提取芳香油的过程中,要在得到的乳浊液中加入氯化钠并放置一段时间,一段时间后芳香油将分布于液体的上层,原因是_。加入氯化钠的作用是_。(4)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状,欲利用植物组织培养技术大量繁殖,最好选_(填“花粉”或“一般的完整体细胞”)作为培养材料;若用花药进行离体培养,则应选择花粉发育至_期的花药,其培养成功率最高。确定花粉发育时期的最常用的方法有_法。答案(1)稀释涂布平板法平板划线法(2)芳香油含量较高果胶水分石灰水既要将原料压紧,防止原料滑脱,又要将油分挤压出来(3)油的密度比水的小增加水层密度,使油和水分层(4)一般的完整体细胞单核醋酸洋红6在20世纪50年代,酶已经大规模地应用于各个生产领域,到了20世纪70年代,人们又发明了固定化酶与固定化细胞技术。请回答下列有关固定化酶和固定化细胞方面的问题:(1)在实际生产中,固定化酶技术的优点是_;与固定化酶技术相比,固定化细胞固定的是_。(2)制备固定化酵母细胞常用的包埋材料是_,使用了如图所示的方法_(填图号及名称)。(3)酶活性一般用酶催化某一化学反应的速率表示。在酶活性测定过程中,酶促反应速率用单位时间内或单位体积中_来表示。(4)使用纤维素酶和化学方法都能分解纤维素,请指出使用酶处理的优点:_。(5)为什么一般不能用加酶洗衣粉洗涤丝绸及羊毛衣物?_。解析固定化酶技术的优点:酶既能与反应物接触,又容易与产物分离,并且固定在载体上的酶能被反复利用;由于细胞中含有多种酶,所以固定化细胞固定的是多酶系统。制备固定化酵母细胞时常用的是包埋法,如题中图所示,其包埋材料是海藻酸钠。在酶活性测定过程中,酶促反应速率可用单位时间内或单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。使用酶处理有机物,具有处理效率高、反应条件温和、不污染环境、成本低等优点。由于丝绸及羊毛衣物的成分以蛋白质为主,加酶洗衣粉中的蛋白酶会水解丝绸及羊毛衣物中的蛋白质,从而损坏衣物。探究“雕牌”复合加酶洗衣粉的最佳洗涤温度时,单一变量应为温度。从表中可看出,在洗涤含不同污染物的衣物时,需要的最适温度不同。答案(1)酶既能与反应物接触,又容易与产物分离,且能反复利用多酶系统(一系列、多种酶)(2)海藻酸钠包埋法(3)反应物的减少量或产物的增加量(4)处理效率高、反应条件温和、不污染环境、成本低(5)加酶洗衣粉中的蛋白酶会将丝绸及羊毛衣物中的蛋白质成分水解,损坏衣物选修三部分考点十五基因工程高考预测(1)基因工程是高考命题的重点和热点,命题点主要涉及以下内容:基因工程的原理和操作工具;基因工程的操作流程;基因工程与胚胎工程、植物组织培养内容的综合考查。(2)以最新的基因工程的研究成果为背景,结合生物工程的其他技术进行综合考查将是高考的命题趋势。预测体验1基因工程利用某目的基因(图甲)和pl噬菌体载体(图乙)构建重组dna。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是bgl、ecor和sau3a。下列分析错误的是()a构建重组dna时,可用bgl和sau3a切割目的基因和pl噬菌体载体b构建重组dna时,可用ecor和sau3a切割目的基因和pl噬菌体载体c图乙中的p1噬菌体载体只用ecor切割后,含有2个游离的磷酸基团d用ecor切割目的基因和p1噬菌体载体,再用dna连接酶连接,只能产生一种重组dnad从图甲看出,用ecor切割目的基因后两端各有一切口,与图乙中ecor切口对接时,可有两种可能,即可产生两种重组dna。2下列有关基因工程和酶的相关叙述,正确的是()a同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒,因此不具备专一性b运载体的化学本质与载体蛋白相同c限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸ddna连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键c一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割dna分子,因此具有专一性;运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等,成分不单一,载体蛋白本质是蛋白质;烟草花叶病毒的核酸为rna,限制酶不能切割;dna连接酶可催化黏性末端黏合后的磷酸二酯键形成。3下列有关培育转基因动物的相关叙述,正确的是()a整个培育过程的设计和施工都是在细胞水平上进行的b培育转基因动物所需的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的c转基因动物的培育成功,表明科学家可打破物种界限,定向改造生物性状d转基因动物与原动物相比,由于发生了基因突变而使其基因型发生了改变c转基因动物培育的转基因过程是在分子水平进行操作;目的基因获取可以从cdna文库、化学合成法等;转基因动物的培育成功,表明科学家可打破物种界限,定向改造生物性状;转基因技术原理是基因重组。4(2014青岛质检)如图所示是转基因绿色荧光鼠的培育过程,据图回答相关问题。(1)若需在短时间内获得较多的gfp基因,通常采用_技术。(2)过程是转基因技术的核心步骤,为使gfp基因在小鼠细胞中高效表达,需要把gfp基因片段正确插入表达载体的_之间。(3)过程在使用合成培养基进行培养时,通常需要加入_等天然成分。(4)过程通常采用的技术是_;在个体水平上检测gfp基因是否表达的方法是_。(5)过程通过_技术实现。科学家欲获得多个相同性状的绿色荧光小鼠,则应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或_,将其移入盛有操作液的培养皿中,然后用分割针进行分割。答案(1)pcr(2)启动子和终止子(3)血清(或血浆)(4)显微注射观察小鼠是否发出绿色荧光(5)胚胎移植囊胚5浙江大学农学院喻景权教授课题组最新研究发现,一种植物激素油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后,许多参与农药降解的基因(如p450基因和红霉素抗性基因)表达和酶活性都得到提高,在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质,有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作,请回答:(1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有_、_。步骤用pcr技术扩增基因时用到的耐高温的酶通常是指_。(2)图中导入重组质粒的方法是_,在导入之前应用_处理受体细菌。(3)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用_制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入_可将含有目的基因的细胞筛选出来。(4)请指出喻景权教授课题组这一最新研究发现的生态学意义:_。解析进行基因工程操作时,首先要获取目的基因,其方法有多种:从cdna文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或pcr合成等。图中的受体细胞是细菌,故用转化法导入表达载体,导入后,需检验和筛选。该项研究的生态学意义在于分解了残留农药,保护了环境。答案(1)从cdna文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或pcr合成(任选其中两项即可)耐热的dna聚合酶(2)转化法氯化钙溶液(3)红霉素抗性基因红霉素(4)加速农药的分解,降低植物体内的农药含量,有利于保护环境和人体健康6我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图,请分析回答。(1)铁结合蛋白基因来自菜豆,且基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用_法获得此目的基因或用_扩增目的基因。(2)构建重组ti质粒时,通常要用_分别切割_。将重组ti质粒转入农杆菌时,可以用_处理农杆菌,使重组ti质粒易于导入。(3)将含有重组ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得_;培养基3与培养基2的区别是_。检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻_。(4)为研究外源基因的遗传方式,将t0代植株上收获的种子种植成t1代株系,检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数t1代株系内,抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为31,此结果说明外源基因的遗传符合_。有少数t1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感,但其体内能检测到铁结合蛋白基因,造成这一结果最可能的原因是_。解析(1)由于铁结合蛋白基因的脱氧核苷酸序列已知,因此可以用化学合成或从基因文库中获取目的基因法获得此目的基因或用pcr扩增目的基因。(2)构建重组ti质粒时,通常要用限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的dna片段和质粒。将重组ti质粒转入农杆菌时,要用cacl2处理农杆菌,使重组ti质粒易于导入。(3)将含有重组ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得含有重组质粒即有潮霉素抗性的愈伤组织;对于培养基3与培养基2可以通过调节生长素和细胞分裂素的浓度比例实现其不同的作用,通过检测转基因水稻种子中铁含量,可以知道培育转基因水稻的目的是否达到。(4)在检测的多数t1代株系内,抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为31,说明外源基因的遗传符合基因分离定律。有少数t1代株系的植株中,潮霉素抗性基因没有表达,可导致植株表现为对潮霉素敏感,但其体内能检测到铁结合蛋白基因。答案(1)化学合成(从基因文库中获取目的基因)pcr(2)(同种)限制性核酸内切酶含目的基因的dna片段和质粒cacl2(3)含有重组质粒(有潮霉素抗性)的愈伤组织生长素和细胞分裂素的浓度比例(成熟)种子中铁含量(4)基因分离定律潮霉素抗性基因没有表达(或“潮霉素抗性基因丢失”)7下图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程:(1)将野生绿草莓的叶片离体组织培养成四倍试管苗的过程,体现了植物细胞的_性,此过程中秋水仙素的作用机理是_。(2)欲获得抗虫草莓可从蛋白酶抑制剂基因、生长素诱导基因中选择_作为目的基因,要鉴定草莓的抗虫性,从个体水平上可采用_实验。(3)过程常规方法采用杂交育种,还可先用花药离体培养分别获得抗虫草莓和凤梨草莓的_,再用_技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓,该技术常用的酶有_。(4)帮助农民发展经济时,要注意一些实际问题,如草莓新品系应种植在阳光充足,疏水性好的土壤里,这主要体现了生态工程的_。a物种多样性原理b整体性原理c协调与平衡原理 d物质循环再生原理解析(1)将野生绿草莓的叶片离体组织培养成四倍试管苗的过程,体现了植物细胞的全能性,此过程中秋水仙素的作用机理是抑制纺锤体形成从而引起细胞内染色体数目加倍。(2)欲获得抗虫草莓应选择蛋白酶抑制剂基因作为目的基因,要鉴定草莓的抗虫性,从个体水平上可采用抗虫接种实验。(3)要获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓,可先用花药离体培养分别获得抗虫草莓和凤梨草莓的单倍体,再用植物体细胞杂交技术进行细胞融合,该技术常用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁。(4)草莓新品系应种植在阳光充足,疏水性好的土壤里,这体现了生态工程的协调与平衡原理。答案(1)全能抑制纺锤体形成(从而引起细胞内染色体数目加倍)(2)蛋白酶抑制剂基因抗虫接种(3)单倍体植物体细胞杂交纤维素酶和果胶酶(4)c8(2014郑州模拟)我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗,其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质(s蛋白,对应的基因为s基因),请回答下列问题。(1)在这项技术中,s基因属于_。(2)用_处理s基因和运载体,并用_使之结合,这里的dna片段两两结合的产物有_种,除了s基因,构建好的表达载体还应具有_等结构。(3)将表达载体导入到哺乳动物细胞,筛选得到工程细胞。使用合成培养基培养工程细胞时,通常需要加入_等天然成分。工程细胞在生长过程中有_现象,需要定期使用_酶处理,以便于分瓶继续培养,在培养过程中,定期收集培养液,分离纯化即可得到所需产品。(4)由于哺乳动物细胞娇嫩挑剔,培养较难,成本较高,近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”,从饲养的转基因动物分泌的乳汁中提取所需产品。在这种技术中,构建表达载体时需要将s基因与_等调控组件重组在一起,并将表达载体通过_的方式,导入到哺乳动物的_(填细胞名称)。(5)人的肠道具有独立的黏膜免疫系统,这使得口服疫苗成为可能,但有效的口服疫苗必须要在到达肠道的过程中躲避胃酸和蛋白酶的降解,否则就会失效。如果要生产口服的乙肝疫苗,理想的受体是植物细胞,理由是_。可食的转基因的植物疫苗的优点有(至少答出两点):_。解析(1)s基因为目的基因。(2)用同一种限制酶切割s基因和运载体会使其产生相同的黏性末端,用dna连接酶连接时会出现目的基因运载体、目的基因目的基因、运载体运载体3种两两连接产物;基因表达载体应含有目的基因、标记基因、启动子和终止子等结构。(3)动物细胞培养液中需加入动物血清,动物细胞培养时,会出现贴壁生长和接触抑制现象,需要用胰蛋白酶定期处理。(4)为保证目的基因表达,需将目的基因和启动子、终止子调控组件重组在一起,常用显微注射法把基因表达载体注射到动物受精卵中。(5)因植物细胞有细胞壁,可以使疫苗成分避开胃酸和蛋白酶的降解;可食的转基因植物疫苗具备可以直接口服、使用简便、便于推广;运输方便、贮存简单等优点。答案(1)目的基因(2)同一种限制酶dna连接酶3启动子、终止子、标记基因(3)动物血清贴壁生长和接触抑制胰蛋白(4)乳腺蛋白基因的启动子显微注射受精卵(5)植物细胞有细胞壁,可以使细胞中的疫苗成分避开胃酸和蛋白酶的降解生产简单、成本低廉,容易大量生产制造;直接口服,使用简便,便于推广;运输方便,贮存简单(其他合理答案亦可)考点十六细胞工程和胚胎工程高考预测(1)从近几年的高考命题情况看,考查点主要分布如下:动物细胞培养与单克隆抗体的制备。植物组织培养及其应用。胚胎工程的操作流程及其应用。(2)细胞工程、胚胎工程与基因工程是现代生物科技的核心,在高考试题中多综合考查。预测体验1下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述不正确的是()a图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原b利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙c用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长d丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁c用特定的选择培养基对乙筛选,融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长,只有融合的杂种细胞能生长。正确选项为c。2中国社会科学院生命伦理专家邱仁宗表示,“禁止克隆人并不意味着禁止克隆技术。科学技术从来就是双刃剑,各国都应加强克隆技术的规范和管理。”下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程,以下说法正确的是()a“治疗性克隆”的过程中涉及到转基因、核移植、细胞培养、胚胎移植等现代生物技术b“治疗性克隆”的结果说明动物细胞具全能性c“治疗性克隆”的过程中有细胞的分裂和分化d“治疗性克隆”的器官在移植方面的主要优点是其遗传物质与患者完全相同,没有免疫排斥反应c治疗性克隆主要涉及核移植,细胞培养等,不涉及转基因技术,没有新个体的产生不能说明动物细胞具有全能性,治疗性克隆器官遗传物质和患者不完全相同,去核卵细胞也有部分遗传物质,但是克隆过程出现细胞的分裂和分化,答案为c。3下列对“试管婴儿”和克隆动物培育过程的叙述中,正确的是()“试管婴儿”的产生是有性生殖克隆动物的产生是无性生殖“试管婴儿”是辅助生殖的技术可以用雄性动物的体细胞核进行克隆a bc dd“试管婴儿”的产生是有性生殖的过程、是一项辅助生殖的技术;克隆动物的产生是无性生殖的结果,可以用雄性动物的体细胞核进行克隆。4“三北防护林”工程建设既要考虑到树种的生态适应性,又要考虑到树种的多样性。这分别体现了生态工程的()a系统学原理和物种多样性原理b协调与平衡原理和物种多样性原理c整体性原理和物种多样性原理d物种多样性原理与整体性原理b“三北防护林”工程建设既要考虑到树种的生态适应性,又要考虑到树种的多样性,分别体现了生态工程协调与平衡原理和物种多样性原理。5下列有关动物胚胎移植的叙述中,正确的是()a受体母畜必须选择遗传性状优良的品种b试管婴儿只是受精过程在试管中进行c超数排卵技术要使用一定的促排卵剂d受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能成功移植c动物胚胎移植过程中受体母畜必须选择健康品种;试管婴儿是受精过程和早期胚胎发育在体外中进行的;超数排卵技术要使用一定的促排卵剂;受孕母畜体内的受精卵或胚胎不一定均能成功移植。6细胞工程和胚胎工程都涉及细胞融合技术,下图表示细胞融合过程,请据图回答:甲细胞乙细胞重组细胞(1)要培育“白菜甘蓝”杂种植株,在诱导融合前,需用_去除白菜和甘蓝细胞的细胞壁,目的是_。(2)在单克隆抗体制备过程中,甲、乙两细胞分别是_和_,从融合细胞中挑选所需的杂交瘤细胞需经过_次筛选。(3)在胚胎工程中,从良种母牛采集的卵母细胞需要进行体外培育,
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