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文档简介

第2讲 微生物的培养与应用 考纲要求 目 录 contents 考点一微生物的实验室培养 考点二微生物的筛选与计数 课堂练真题 明高考规律 课下练模拟 试自身能力 微生物的实验室培养 考点一 微生物分离 鉴定 活菌计数 菌种保藏 加凝固剂 如琼脂 固体培养基 观察微生物的运动 分类鉴定 加凝固剂 如琼脂 半固体培养基 工业生产 不加凝固剂 液体培养基 用途 特点 培养基种类 用伊红 美蓝培养基鉴别大肠杆菌 鉴别不同种类的微生物 产生特定的颜色或其他变化 培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别培养基 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 从众多微生物中分离所需的微生物 依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计 培养基中加入某些化学物质 选择培养基 举例 用途 原理 制备方法 种类 高压蒸汽灭菌法 干热灭菌法 灼烧灭菌法 化学药剂消毒法 巴氏消毒法 煮沸消毒法 常用方法 杀死物体内外所有的微生物 包括芽孢和孢子 仅杀死物体表面或内部的部分微生物 不包括芽孢和孢子 结果 强烈的理化因素 较为温和的物理或化学方法 条件 灭菌 消毒 项目 培养基及容器的灭菌 玻璃器皿 金属工具 接种工具 用酒精擦拭双手 用氯气消毒水源 不耐高温的液体 日常用品 应用范围 高压蒸汽灭菌锅 恒温121 维持15 30min 干热灭菌箱 60 170 维持1 2h 酒精灯火焰的外焰 70 酒精 氯气等 80 煮15min或在70 75 煮30min 100 煮沸5 6min 使用条件 灭菌 消毒 项目 操作复杂 需要涂布多个平板 不能对微生物计数 缺点 既可以获得单细胞菌落 又能对微生物计数 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 优点 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 适用于好氧菌 适用范围 从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 菌体获取 稀释度要足够高 为确保实验成功可以增加稀释度的范围 每次划线前后均需灼烧接种环 注意事项 一系列的梯度稀释 涂布平板法操作 接种环在固体平板培养基表面连续划线 关键操作 稀释涂布平板法 平板划线法 项目 杀死接种环上残存的菌种 避免微生物污染环境和感染操作者 杀死上次划线后接种环上残留的菌种 使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端 使每次划线菌种数目减少 杀死接种环上原有的微生物 目的 划线结束 每次划线之前 第一次操作 微生物的筛选与计数 考点二 利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征 然后筛选目的微生物 鉴定培养法 利用选择培养基对微生物进行选择培养 直接获得目的微生物 选择培养法 利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面 直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物 单菌落挑取法 如利用刚果红染色法 根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物 染色鉴别法 如培养基中加入酚红指示剂 培养某种微生物后 培养基变红说明该种微生物能够分解尿素
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