【创新设计】（浙江专版）高三生物二轮冲刺盘查知识点 考纲对接演练 专题8 第1讲基因工程和克隆技术.doc

【创新设计】（浙江专版）2014届高三生物二轮冲刺盘查知识点 考纲对接演练 专题8 第1讲基因工程和克隆技术知识点1基因工程的诞生()、原理和技术()1(2013浙江名校联盟联考)图1为某种质粒简图，图2表示某外源dna上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶eocr、bamh、hind 的酶切位点。下列有关叙述错误的是()。a如果用ecor对外源dna和质粒进行酶切，将多个含有目的基因的dna片段与多个质粒的酶切和产物用dna连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有三种b如果将一个外源dna分子和一个质粒分别用ecor酶切后，再用dna连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组dna，此重组dna中ecor酶切点有1个c为了防止质粒和含目的基因的外源dna片段自身环化，酶切时应使用bamh和hind两种限制酶同时处理d如果要将重组dna导入大肠杆菌细胞，则用氯化钙处理大肠杆菌可以增加其细胞壁的通透性，利于重组dna的导入解析若将一个外源dna分子和一个质粒分别用ecor 酶切后再用dna连接酶连接，则形成的重组dna中，目的基因两端应各含1个ecor 酶切位点。答案b2(2013江苏卷，22)小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。下列相关叙述正确的是(多选)()。a设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列b用pcr方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列cpcr体系中一定要添加从受体细胞中提取的dna聚合酶d一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞解析扩增后的目的基因需要与表达载体连接，这将涉及相关限制酶识别的序列，故设计引物时应考虑相关的碱基序列，a错误；pcr过程中，通过引物与模板链配对连接后，按照碱基互补配对原则进行延伸，故不必知道目的基因的全部序列，b正确；pcr体系中添加的是耐高温的dna聚合酶，c错误；受体细胞的选择应适合目的基因的表达，如制备分泌蛋白的最佳受体是真核细胞，d正确。答案bd知识点2基因工程的应用()3(2013浙江温州啸秋一模)下图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程，下列有关描述正确的是()。a将野生绿草莓的叶片离体组织培养成四倍试管苗的过程中秋水仙素的作用是抑制有丝分裂间期纺锤体的形成b欲获得抗虫草莓可从蛋白酶抑制剂基因、生长素透导基因中选择蛋白酶抑制剂基因作为目的基因c要鉴定草莓的抗虫性，从分子水平上可采用抗虫接种实验d过程常规方法采用杂交育种，还可先用花药离体培养分别获得二倍体抗虫草莓和四倍体凤梨草莓，再用植物体细胞杂交技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓解析纺锤体形成于有丝分裂前期，要鉴定草莓的抗虫性从个体水平上可采用抗虫接种实验。抗虫草莓与凤梨草莓不是同一物种，故不能采用杂交育种。答案b4(2013西城区质检)我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答有关问题。(1)铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用_法获得此目的基因或用_扩增目的基因。(2)构建重组ti质粒时，通常要用_分别切割_。将重组ti质粒转入农杆菌时，可以用_处理农杆菌，使重组ti质粒易于导入。(3)将含有重组ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得_；培养基3与培养基2的区别是_。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻_。(4)为研究外源基因的遗传方式，将t0代植株上收获的种子种植成t1代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数t1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为31，此结果说明外源基因的遗传符合_。有少数t1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是_。解析对脱氧核苷酸序列已知的基因可以用化学合成法得到，或用pcr技术扩增。用来切割目的基因和质粒的是限制性核酸内切酶。将目的基因导入细菌时，需要用cacl2处理使细菌处于感受态，便于目的基因导入。将含有重组ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可获得含重组质粒的愈伤组织；培养基3的作用是诱导愈伤组织再分化，所以与培养基2的区别是生长素和细胞分裂素的比例不同。检测培育转基因水稻的目的基因(铁结合蛋白基因)是否表达，需要检测转基因水稻种子中铁的含量。潮霉素抗性植株的后代出现抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为31，说明其遗传符合孟德尔的基因分离定律。若转基因植株中检测到铁结合蛋白基因，却对潮霉素敏感，可能是潮霉素抗性其因没表达或丢失。答案(1)化学合成(从基因文库中获取)pcr(2)(同种)限制性核酸内切酶含目的基因的dna片段和质粒cacl2(3)含有重组质粒(有潮霉素抗性)的愈伤组织生长素和细胞分裂素的比例不同(成熟)种子中铁含量(4)基因分离定律潮霉素抗性基因没有表达(或“潮霉素抗性基因丢失”)知识点3植物的克隆()5(2013江苏，11)某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是()。a利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗b采用花粉粒组织培养获得单倍体苗c采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上d采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养解析本题采用直选法。通过花粉粒组织培养获得的是单倍体，不能保持原植株的优良特性，故b错误。答案b6(2013浙江省高考模拟冲刺卷)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。利用细胞工程技术生产辣椒素的途径如下图所示。下列判断中错误的是()。a.图中和分别需要用不同浓度配比的植物激素诱导，如生长素类、细胞分裂素类b细胞分化是因为细胞中遗传物质的改变c若要生产“脱毒苗”，则使用的外植体为离体的根尖或茎尖d此途径中形成单细胞进而培养成高产细胞系的过程属于植物细胞克隆解析细胞分化过程中遗传物质没有改变，只是进行基因的选择性表达。答案b7(2013全国课标卷，40)生物选修3现代生物科技专题甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分a，乙含有效成分b。某研究小组拟培育同时含有a和b的新型药用植物。回答下列问题。(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用_酶和_酶去除细胞壁，获得具有活力的_，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_组织，然后经过_形成完整的杂种植株。这种培育技术称为_。(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_。假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是_。(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。解析(1)该新型药用植物是通过植物体细胞杂交技术获得的。要获得有活力的原生质体才能进行体细胞杂交，因此首先用纤维素酶和果胶酶去掉植物的细胞壁，然后用化学诱导剂peg(物理方法：离心、振动等)诱导二者的原生质体融合。然后采用植物组织培养技术获得杂种植株，植物组织培养的主要过程是：先脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成植物体，利用了植物细胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是两个物种，二者不能通过有性杂交产生可育后代，原因是甲、乙有性杂交所产生的后代在减数分裂过程中同源染色体联会异常，也就是存在着生殖隔离。但植物甲、乙通过植物体细胞杂交技术产生的后代却是可育的，因为在减数分裂过程中同源染色体能完成正常的联会，产生正常的配子。由于甲、乙都是二倍体，因此，植物体细胞杂交得到的后代是异源多倍体(四倍体)。(3)人工种子生产不受气候、季节和地域等因素限制，而且可以避免后代发生性状分离等优点，因此，植物细胞工程重要的应用之一是制备人工种子，用到的核心技术是植物组织培养技术。将植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。答案(1)纤维素果胶原生质体愈伤再分化(分化)植物体细胞杂交技术(2)体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联会正常(3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽知识点4动物的克隆()8如图是制备乙肝病毒表面抗体的流程，该抗体是乙肝病毒免疫的保护性抗体。回答以下问题。(1)图中抗原特指_抗原，细胞是指_。培养基中含有的某种天然成分是_。(2)不考虑多细胞融合，那么第一次筛选淘汰的细胞有_，而第二次筛选得到的目的细胞是_。(3)从图中可知，培养目的细胞有两种途径，即_。与普通抗体比较，得到的单克隆抗体具有_等优点。(4)该技术制备的单克隆抗体可用于基因工程的第四步工作，而该步工作中使用单克隆抗体的目的是_。解析(1)该图是制备乙肝病毒表面抗体的实验流程图，所以给小鼠注射的应该是乙肝病毒表面抗原。细胞 是抗原刺激过的b淋巴细胞，细胞是骨髓瘤细胞。培养动物细胞所用的培养液要添加动物血清这种天然成分。(2)不考虑多细胞融合，则融合装置内还有5种细胞：未融合的b淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞间融合的细胞、b淋巴细胞间融合的细胞和杂交瘤细胞，经过第一次筛选，除杂交瘤细胞以外，其他均被淘汰，而第二次筛选的目的是得到能产生乙肝病毒表面抗体的杂交瘤细胞。(3)可产生乙肝病毒表面抗体的杂交瘤细胞可通过体外培养或体内培养，然后提取单克隆抗体。(4