C可行性报告

知识水坝（豆丁网 pologoogle）倾心为您整理（双击删除） C 可行性报告 说明：此表中不得出现学院、导师及项目负责人信息。 项目名称 食品中微生物含量的快速检测 及分析 项目类别 自然科学类学术论文 研 究 目 的、意 义 与 预 期 效 益 “ 民以食为天” , 食品的质量安全是人们对食品的基本要求，其问题自然受到人们比较多的关注 ,如何对食品的质量安全进行快速、经济、准确的检测对于食品工业的发展具有重要意义。为了要研究食品中微生物的含量，食品的安全检测应运而生。 面对一些已经存放了几天价格较昂贵的食品，你是为了安全起见扔掉它呢？还是提心吊胆的将它烹饪呢？我们进行本 次研究的主要目的是对一些水产品和平常较普遍吃的东西进行检测，然后对他们从新鲜到放置几天中内含微生物的数量检测，然后将结果进行总结公布为人们提供一个样本，使人们更加放心，安心的吃东西。 这样为大家做一个基本的说明，使人们知道哪种选择方式是最好的。不要为了不损失昂贵的食品，或是在路边随便吃一些成色味道都不是很好的东西而损失自己的健康。或是明明安全的情况下却将大量的食物浪费掉，造成粮食的损失。 多年以来 , 对食品微生物的检测 , 通常采用琼脂平板培养法，旋转平板技术，多聚酶链式反应 PCR技术等。这些方法既费时费力， 又繁杂。随着社会的进步和科学技术的快速发展以及人们对检测速度越来越高的要求，传统的检测手段已渐渐无法满足人们的需要 , 不能快速、有效的测出食品中细菌、真菌等微生物的数量。 而微生物快速检测法能克服这一弊端，此检验法不需用培养基 , 只需将 ATP 检验仪与计算机连接后 , 就能处理数据 , 即时显示检验结果。其原理是 : 所有的生物知识水坝（豆丁网 pologoogle）倾心为您整理（双击删除） 体中都含有能够传达能量的 ATP, 检验 ATP 就可知道细菌数量及活性。而在微生物中 , 所含 ATP 量很少。如在萤光酶、萤光物质与氧及镁离子存在的条件下 , 其光量与样品中 ATP 量成正比 , 凭此光量 , 来检验食品中的微生物量。 以此原理而进行 食品细菌快速检测 ，大大缩短了检测细菌数目的时间，提高了工作效率，节约了人力物力。能在海关，农业部门，卫生检疫部门派上用场。可以进一步研究微生物数量与食品保质期的关系，微生物含量与食品安全的关系。将这种简单方便的测试结果运用到日常生活当中来， 在如今这个资源紧张的时代，这种更为有效的食品测试或许可以为将来节省大量的资源。 国 内 外 研 究 现状 国内外应用举例 电阻电导测定法 这种检验法的原理是 : 当细菌生长繁殖时 , 将蛋白质、糖类等大分子物质分解成氨 基酸、有机酸等带电荷的小分子物质 , 改变培养液的导电度。这样 , 测量电阻和导电度的变化 , 就可推算出样品原来的含菌数。已开发出来的电阻电导检测器有 : 美国 Vitek 公司生产的 Bactometer。可适用于检测牛乳、乳制品、肉品等含菌量 ; 英国推出的 Mathus 系统 , 可用来检测牛乳、酿造液、鱼及海产品的含菌量 。 多聚酶链式反应 PCR PCR 技术是由 Kleppe 等人在 1971 年首先提出的。该方法通过对人工难以培养的微生物相应 DNA 片段的扩增 ,检测扩增产物含量 , 从而快速地对食品中致病菌含量进行检 测。检测时 , 首先在高温下 ( 95 ) 使得蛋白质变性 , DNA双链变成单链 ; 再迅速降温 ( 55 ) , 每条 DNA 单链退火 , 这就是所谓的热循环。之后温度重新上升到 95 , 开始新的循环。经一套扩增循环 ( 21 到 31 次 ) 将 1 个单分子 DNA 扩增到 107 分子。整个过程可以在 1h 内通过自动热量循环器完 成。理论上 , 只要样品中含有一分子沙门氏菌的 DNA, 通过 PCR 技术完全可以在短时间内检测到。这种测定方法的优点是测定结果迅速、灵敏度和特异性高、检测成本低 ; 但其存在的最大问题在于 PCR 产 品的污染 。 酶联免疫法 ELISA 抗原 抗体反应法是测定特异性致病菌及其产生毒素最常用的方法。 ELISA 是利用抗原和抗体之间的反应 , 在临床医学领域的许多方面都有应用。抗体在抗血清中可以是单克隆抗体 , 也可以是多克隆抗体。检测时首先将抗体吸附到固体载体上 , 然后再加富集培养物 , 使抗体将样品中所有目的抗原结合到固体载体上。实知识水坝（豆丁网 pologoogle）倾心为您整理（双击删除） 际中常使用一种夹心模式 ,在该模式中 , 先将第二个酶标抗体加入样品中 , 然后加入一种能与第二个酶标抗体发生阳性颜色反应的反应底物。如果样品中没有目的抗原 , 酶标抗体就无法结合 , 也就不 会发生颜色反应 ; 反之就可以认为该样品呈阳性。 研究的创新点 1.大大缩短了传统检测的时间，并能提高测量的准确度。 2利用检测结果观察分析细菌等微生物的活动和数量变化，从而解析 微 生物活动与食品保质期的关系，以及食品中微生物含量的标准。 研究的重点、难点及研究技术路线： 本实验的重点是对一些新鲜的水产品已及一些肉类，罐类食品或接近保质期的食品中的微生物数量变化进行研究，然后将其进行总结，概括，以方便人们能更安全的饮食。 本实验的难点是 ： 1.如何处理不同食品（固体，液体）等以获得含细菌的 标本用来检测。 2.检测食品中细菌等各类微生物的含量来评价食物的质量。 3.在保存新鲜样品时要考虑到周围温度，水分，空气中细菌含量以及在不同时间下的样品中微生物数量的变化，而这些变化又都是及其微量。这就要求我们怎么样才能抓住其本质的变化。 进行本实验我们在 多聚酶链式反应 PCR等技术的基础上找出更方便快捷的方式将微生物从样品上分离出来，以求在不影响原微生物的正常生长周期使其最接近与日常生活而非实验条件下的正在下将其测定。然后来保证大家的饮食质量。 技术路线 ： 新鲜食物（牛奶，面包等） 在不同的理化指标 下保存 取不同环境下的样品检测 判断食物在不同环境下保存的安全性 知识水坝（豆丁网 pologoogle）倾心为您整理（双击删除） 处理以获得可用来检测含微生物样品 分析微生物数量与周围环境的关系 检测研究其微生物含量的不同及变化 微生物的数量与食品安全期的关系 食品安全期与环境变化的关系 研究进度安排 : 2008-3-15至 2008-5-1 修正实验计划缺陷 ,确定实验方案 ,进行预 实验 . 2008-5-3至 2008-10-1在不同环境条件下保存的食品样本 ,并通过 食品标本检测微生物含量的及变化 . 2008-10-2至 2008-11-1 分析研究食品中微生物数量与周围环境变化的关系以及微生物数量与食品安全期的关系 ,最终得出食品安全期与环境变化关系 . 2008-11-2至 12-31 整理数据 ,总结实验 ,准备结题 . 完成 项目 条件 保证 负责人和主要成员曾参与或组织完成过哪些项目，成果水平的社会评价；完成本项目的研究能力、时间保证和基础条件；资料设备；科研手段。 本实验的指导老师苏秀榕教授，硕士生导师，从事食品科学与工程，生物化学与分子生物学等领域的研究。获省优秀青年科学工作者奖。浙江省水产学会副理事长、浙江省生物化学与分子生物学理事、宁波大学生物工程专业副主任。主要研究方向为功能食品与海洋药物、食品加工与贮藏、生物化学与分子生物学。主持或参加国家自然基金等研究项目 20 余 项，获各类进步奖 3 项，申报发明专利 4项，发表研究论文 90 余篇，参编专著 2 部。 参与此项目的组员及负责人有来自生工和食工的同学，都具有相当的知识背景，有生物化学，微生物学，分析化学等扎实的理论基础，能熟练应用微生物及相关的实验技巧，曾参与一些研究课题，辅助老师做好工作，部分成员还曾在挑战杯中获奖，有较好的动手能力与思维意识。 知识水坝（豆丁网 pologoogle）倾心为您整理（双击删除） 学院实验室设备齐全， 并拥有美国 HMBG 系列细菌快速检测仪 ,可为本课题提供强大支持 .，学院 文献资料丰富，对实验研究极为重视，都能为本课题的顺利进行提供有利条件。 项 目 经 费 预 算 序号 经 费 开 支 科 目 经费预算金额（