GC法测定不同产地藏木香药材中异土木香内酯含量.doc

GC法测定不同产地藏木香药材中异土木香内酯含量作者：陈晓红单位：青海大学医学院药学系【摘要】目的 探讨青海不同产地藏木香药材中异土木香内酯含量的测定方法。方法 采用气相色谱法对藏木香的有效成分异土木香内酯进行含量测定，并进行了方法学研究。结果 异土木香内酯在0.21.0mg•mL-1范围内呈良好线性关系，r=0.9999，平均回收率为98.89%，RSD为0.97%（n=6）。结论 青海互助产藏木香中的异土木香内酯含量较高，互助产野生品略高于该地区的栽培品。 陈晓红（1968），女，土族,甘肃籍,高级实验师 【关键词】 藏木香 产地 异土木香内酯DETERMINATION OF ISOALANTOLACTONE IN INULAHELENIUM DERIVED FROM DIFFERENT AREA OF QINGHAI BY GC Chen Xiaohong (Department of pharmacy , QingHail University Medicine College ) Abstract Objective To determine the contents of isoalantolactone in different area Inula helenium I. Methods To determine the contents of Inula helenium derived from different area of Qinghai by GC .Results Isoalantolactone has a lineal relation in the concentration of 0.21.0mg•mL-1,the average recoveries were 98.89%,with RSD 1.05% (n=6).Conclusion The highest content of Inula helenium I grown in Huzhu county, Qinghai province,and the content of wild is higher than that of Artificial planted. key words Inula helenium I Isoalantolactone GC 藏木香原植物为菊科植物土木香Inula helenium L.。生于田边、河谷、沼泽等潮湿处，因环境等因素，生长在青藏高原的土木香植物也称它为藏木香。藏医称它为玛努巴扎(Manupatra)记载于藏医著名典籍四部医典。异土木香内酯是评价藏木香药材质量的主要指标之一，为了评价青海不同产地藏木香药材的质量，本实验采用GC法对青海不同产地藏木香中的异土木香内酯含量进行了测定和比较。 1 仪器、试剂与材料 Thermo Finnigan Trace 型气相色谱仪、FID检测器、GCD-500G高纯氢气发生器（北京佳维科创科技有限公司），SUPELCOWAXTM10色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）；Xcalibur色谱工作站（美国Finnigan）。异土木香内酯对照品（中国药品生物制品检定所，批号110761-200203）。试剂为乙酸乙酯（分析纯）。 实验用药材采集于青海不同产地，经青海大学医学院魏全嘉教授鉴定为菊科植物土木香Inula helenium L.的根。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 SUPELCOWAXTM10色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）；采用程序升温法：初始温度50,以20每分钟升至250，停留6 min，再以5每分钟升至260，停留5 min；进样口温度250，分流进样，分流比为10:1；检测器温度260；载气为氦气，流速为1.0 ml•min -1；Xcalibur色谱工作站。对照品及供试品色谱图见图1。 2.2 对照品溶液制备 精密称取异土木香内酯对照品25.0 mg，置25 ml容量瓶中，以乙酸乙酯稀释至刻度，配成1.0mg•mL-1的储备液。分别吸取1.0 mg•mL-1的土木香内酯对照品储备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，置5支1 ml的容量瓶中，以乙酸乙酯稀释至刻度，得到异土木香内酯系列对照品溶液。 2.3 供试品溶液制备 取藏木香药材粉末（过三号筛）约1.0 g，精密称定，精密加入乙酸乙酯30 mL，称定重量，超声处理30 min，取出，放冷至室温后，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 2.4 线性关系考察 从上述配置的异土木香内酯系列对照品溶液中，分别吸取1.0 μL进样，按上述色谱条件进行测定，结果显示，异土木香内酯在0.21.0 mg•mL-1浓度范围内呈良好线性关系，以对照品浓度为横坐标X，以峰面积为纵坐标Y作回归曲线，Y=6.0×107X+6.0×106， r=0.9999，最低检测限10μg•mL-1(S/N=3)。 2.5精密度试验 取0.60 mg•mL-1的异土木香内酯对照品溶液，重复测定6次。计算得RSD为1.22%(n=6）。 2.6 重现性试验 取样品粉末（青海尖扎）照2.3项下分别制成供试品溶液6份，依法测定，结果测得异土木香内酯的含量为29.22 mg•g-1，RSD为1.26%（n=6）。 2.7 稳定性试验 取同一供试品(青海尖扎)溶液，分别于制备后0、4、8、12、24 h内进样分析，结果测得RSD=1.13(n=5)，表明样品溶液放置24 h稳定。 2.8 加样回收率试验 分别取已知异土木香内酯含量的样品（青海尖扎）约1.0 g，精密称定，分别准确加入1.00 mg•mL-1对照品溶液2.00 mL，照2.3项下制备供试品溶液依法测定，结果见表1。表1异土木香内酯回收率试验结果 2.9 样品的测定 照“2.3”项下法制备、测定不同产地样品含量，结果见表2。表2不同产地藏木香中异土木香内酯的含量 3 讨论 中华人民共和国卫生部药品标准•藏药第1册和青海藏药标准都收载了藏木香药材，但藏木香中异土木香内酯的含量测定方法还未记载。本实验采用GC法测定青海不同产地藏木香药材中异土木香内酯的含量。本实验的定量方法重现性好，简便，可操作性强。 3.1 本实验以乙酸乙酯为溶剂，比较了加热回流提取法(30min,50min)、超声提取法(30min,50min)提取效果， 结果认为超声提取30 min法提取完全、操作时间短，故选择超声30 min为提取条件。 3.2 本实验测定结果表明，生于青海互助高海拔地区的野生