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专题二细胞工程 克隆技术 考纲要求 1 植物的组织培养 2 动物的细胞培养与体细胞克隆 3 细胞融合与单克隆抗体 一 细胞工程的概念理解1 原理和方法 细胞生物学和 2 操作水平 3 工程目的 按照人的意愿来改变 或获得细胞产品 4 根据操作对象的不同分类 植物细胞工程和 考点1植物细胞工程 分子生物学 细胞水平或细胞器水平 细胞内的遗传物质 动物细胞工程 二 植物细胞工程1 植物组织培养 1 理论基础 2 组织培养的条件 无菌 环境条件适宜 如营养物质 如 维生素等 激素 如 和 适宜的 和 等 植物细胞的全能性 离体 水 无机盐 蔗糖 生长素 细胞分裂素 温度 光照 图中 a表示 b表示 3 填写操作过程图 脱分化 再分化 愈伤组织 胚状体或丛芽 2 植物体细胞杂交技术 1 过程 为去除 获得具有活力的原生质体 常用方法是酶解法 所用到的酶是 2 过程 是原生质体的融合 人工诱导的物理方法包括 等 化学方法一般用 作诱导剂 3 过程 是原生质体融合后再生出 这是原生质体融合成功的标志 4 植物体细胞杂交的意义 细胞壁 纤维素酶和果胶酶 离心 振动 电刺激 聚乙二醇 细胞壁 克服了远缘杂交不亲和的障碍 3 植物细胞工程的实际应用 1 植物繁殖的新途径 微型繁殖 用于 的植物组织培养技术 快速繁殖优良品种 优良品种 大量繁殖 作物脱毒 选取作物 进行组织培养 获得脱毒苗的技术 无毒组织 如茎尖 人工种子 以植物组织培养得到的 等为材料 经过人工薄膜包装得到的种子 胚状体 不定芽 顶芽 腋芽 人工种皮 胚状体或不定芽 顶芽 腋芽 人工胚乳或子叶 2 作物新品种的培育 单倍体育种和突变体的利用突变体aa中a为突变新基因 并控制着优良性状 利用单倍体育种 方法步骤如下 优点 3 细胞产物有蛋白质 脂肪 糖类 药物 香料 生物碱等 稳定遗传 缩短育种年限 细胞产物的工厂化生产 1 正误判断 1 棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性 2 植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性 3 在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中 不会发生细胞的增殖和分化 4 愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的 5 利用物理法或化学法 可以直接将两个植物细胞进行诱导融合 6 用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性 7 再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志 2 下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程 据图分析错误的是 a 过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理b 过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变c 过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能d 过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理 解析植物细胞壁主要是由纤维素和果胶组成的 常选用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 获得具有活力的原生质体 紫外线照射诱变育种所依据的原理是基因突变 这种突变是不定向的 过程是脱分化 指已经分化的植物器官 组织或细胞 当受到创伤或进行离体 也受到创伤 培养时 已停止分裂的细胞 又重新恢复分裂 细胞改变原有的分化状态 失去原有结构和功能 成为具有未分化特性的细胞 是再分化 需用适宜配比的生长素和细胞分裂素诱导 答案b 1 植物组织培养与植物体细胞杂交的区别与联系 细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性 愈伤组织 根 芽或胚状体 不同种的植物体细胞融合后形成杂种细胞 脱分化 再分化等 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交 2 单倍体育种和突变体的利用的不同点 染色体变异 明显缩短育种年限 基因突变 产生新基因 大幅度改良某些性状 3 植物激素在组织培养中的作用在配制好的ms培养基中 常常需要添加植物激素 其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 植物激素的浓度 使用的先后顺序以及用量的比例等 都会影响实验结果 1 按照不同的顺序使用这两类激素 会得到不同的实验结果 2 当同时使用这两类激素时 两者用量的比例影响植物细胞的发育方向 易错易混 植物细胞工程中的9个易错点 1 幼嫩的组织脱分化较为容易 如茎尖 根尖 形成层细胞易脱分化 而植物的茎 叶和成熟的组织则较难 2 对外植体要进行消毒处理 而对各种器械要彻底灭菌 3 植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖 用葡萄糖也可以 但后者的成本高 4 不同细胞的全能性不同 具体表现为 受精卵 生殖细胞 体细胞 离体细胞的全能性表达与分化程度呈负相关 但生殖细胞特殊 5 脱分化形成愈伤组织的过程不需要光 再分化过程需要光 因为愈伤组织利用有机营养成分 而试管苗需要进行光合作用以自养 6 植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素不同 因为培养的目的不同 生根或生芽 7 植物体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞 不管是染色体数 基因型还是染色体组都采用直接相加的方法 有性生殖过程中符合孟德尔遗传规律 而植物体细胞杂交不符合孟德尔遗传规律 8 人工种皮中可以加入适量的养分 无机盐 有机碳源以及农药 抗生素 有益菌等 以利于胚状体生长发育成幼苗 发育初期需要的营养物质由人工胚乳提供 9 植物体细胞杂交获得的杂种细胞的类型有三种 如aa型 bb型 ab型 符合要求的只有ab型 需要进行筛选 10 杂种植株遗传物质的变化 杂种植株的变异类型属于染色体变异 杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和 杂种植株属于异源多倍体 1 2015 淮北联考 育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验 请据图回答问题 1 图 过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗a的过程需要经过 两个关键步骤 该过程依据的原理是 2 植物组织培养除了需要提供一定的营养 温度和光照外 还必须在 的条件下进行 3 已知番茄的红果 y 对黄果 y 为显性 少室 m 对多室 m 为显性 控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上 用红果多室 yymm 番茄植株的花粉进行 有关实验 则 过程中 从花粉形成幼苗b所进行的细胞分裂方式是 过程中植物体c的基因型为 细胞a为两两融合细胞 4 图 过程中需要去除细胞壁 获得具有活力的 5 在图中 过程中 经过鉴别和筛选后 通常植物体d能表现出两个亲本的遗传性状 根本原因是 解析 1 图 中植物组织培养过程 需要经过脱分化和再分化两个关键步骤 其原理是植物细胞的全能性 2 植物组织培养除了需要提供一定的营养 植物激素 生长素 细胞分裂素 温度和光照外 还必须在无菌的条件下进行 3 过程中 从花粉形成幼苗b所进行的细胞分裂方式是有丝分裂 红果多室 yymm 番茄植株产生的花粉基因型为ym ym 故 过程中植物体c的基因型为yymm yymm或yymm 4 植物体细胞杂交时 要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁 获得原生质体 5 图 中经植物体细胞杂交获得的植株具有两个亲本的遗传物质 能表现出两个亲本的遗传性状 答案 1 脱分化和再分化植物细胞全能性 2 植物激素 生长素 细胞分裂素 无菌 3 有丝分裂yymm或yymm或yymm 4 原生质体 5 具有两个亲本的遗传物质 2 下面为 番茄 马铃薯 的培育过程示意图 请据图回答下列问题 1 若运用传统有性杂交 即用番茄 马铃薯杂交 能否得到可育的杂种植株 为什么 2 在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中 运用的技术手段是 依据的原理是 其中过程 称为 技术 与过程 密切相关的具有单层膜结构的细胞器为 过程 相当于 过程 涉及的细胞分裂方式为 3 已知番茄 马铃薯分别为四倍体 二倍体 则 番茄 马铃薯 属于 倍体植株 4 柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物 可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产 若利用此技术 将柴油树细胞培养进行到 填字母编号 阶段即可 解析 1 番茄和马铃薯属于两种植物 存在生殖隔离 不能通过有性杂交产生后代 2 过程 是把a b两个原生质体融合在一起 所以称为原生质体融合 过程 是在融合的原生质体外再生一层细胞壁 而细胞壁的形成与高尔基体有关 过程 的结果是形成了愈伤组织 所以 为脱分化 3 番茄 马铃薯 属于异源多倍体中的异源六倍体 4 柴油是植物细胞的代谢产物 要实现其工业化生产需将柴油树细胞培养到愈伤组织 然后进行提取 答案 1 不能 不同种的植物存在生殖隔离 2 植物组织培养植物细胞的全能性原生质体融合高尔基体脱分化有丝分裂 3 六 4 e 技法提炼 植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法 1 诱导产物 假设用于杂交的两种植物细胞分别为a b 未融合的细胞 a和b 两两融合的细胞 aa bb和ab 多细胞融合体 2 检测方法 对诱导产物中的细胞进行植物组织培养 然后根据得到的植物性状进行判断 若只表现出一种植物的性状 说明是未融合细胞 若得到的是具有两种亲本性状的植物 说明是杂种植株 若得到的是两种亲本性状的植物 且一种植物的性状得到加强 则是多细胞融合体 若得到的是一种植物的性状 但是效果得到加强 则是同种细胞融合的结果 3 人工种子是人们模仿天然种子的结构制造出来的生命有机体 它能像天然种子一样萌发生长 人工种子的核心部分是胚状体 其培育过程如图所示 请回答下列有关问题 1 制作人工种子依据的原理是 制作过程的关键是确保无菌操作 其原因是 2 表示脱分化的过程 其实质是 表示再分化的过程 其实质是 培养基中生长素和细胞分裂素的浓度 影响 过程的进行 3 从保证人工种子正常的生命力以及生态系统的物质循环上来看 人造种皮应具有半透性 透水 透气性 和 的特点 4 某二倍体植物的基因型为ddtt 利用花药离体培养的方法 可培育成 花粉胚 也可制成人工种子 这种种子萌发形成的个体称为 从生殖方式看属于 生殖 解析理解种子的结构 植物组织培养 生物的生殖以及单倍体育种等知识是解题的关键 培育人工种子的原理是细胞的全能性 脱分化的实质是使不分裂的细胞恢复分裂能力 再分化的实质是使分裂的细胞在形态 结构和功能上再次发生变化 这种变化是基因选择性表达的结果 培养基中生长素和细胞分裂素的浓度 比例和使用顺序将影响脱分化和再分化过程 种子萌发的过程中 需要从外界吸收大量的水分和氧气进行有氧呼吸 因此 人工种皮应该具有透水 透气性 从物质循环的角度来看 人工种皮应该能被微生物降解 通过花药离体培养获得的植株属于单倍体 基因型为ddtt的植物能产生基因组成为dt dt dt和dt的四种花粉 这种通过有性生殖细胞产生后代的生殖方式 属于有性生殖 答案 1 细胞全能性细菌等微生物代谢旺盛 在消耗营养物质的同时 产生大量有害产物 毒害组织细胞 2 使不分裂的细胞恢复分裂能力基因的选择性表达比例使用顺序 3 易被微生物降解 4 单倍体有性 一 动物细胞培养1 动物细胞的培养过程 考点2动物细胞培养与体细胞克隆 胰蛋白酶 原代培养 胰蛋白酶 2 动物细胞培养的条件 1 的环境 2 营养 除糖 氨基酸 促生长因子 无机盐 微量元素之外 还通常需加入 等天然成分 3 适宜的温度和ph 温度为36 5 0 5 ph为7 2 7 4 4 气体环境 co2和o2 o2是细胞代谢所必需的 co2的主要作用是 无菌 无毒 血清 维持培养液的ph 二 体细胞核移植技术1 动物体细胞核移植技术的过程 细胞培养 去核 2 原理 3 结果 4 应用 1 加速家畜 进程 促进优良畜群繁育 2 保护 3 生产医用蛋白 4 作为异种移植的 5 用于组织器官的 动物体细胞核具有全能性 产生新个体 遗传改良 濒危物种 供体 移植 正误判断 1 连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型 2014 浙江 2 制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织 再用胃蛋白酶处理 3 肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5 的co2刺激细胞呼吸 4 与 多利 羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植 细胞培养和核移植 5 植物原生质体融合和动物细胞融合原理是相同的 6 动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用相同 探究动物细胞培养与动物体细胞核移植的不同点 细胞增殖 动物细胞核的全能性 原代 胰蛋白酶 传代 去核卵母细胞 重组细胞 早期胚胎 细胞群 克隆动物 易错警示 有关动物细胞培养及克隆动物的5个易失分点 1 区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养 贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理 然后再分瓶培养 原代培养结束 开始了传代培养 动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶 第一次的目的是处理剪碎的组织使之分散成单个细胞 第二次的目的是使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来 2 核移植过程中供体理论上是提供细胞核 但操作过程中可以把整个体细胞注入去核的卵母细胞中去 原因是体细胞体积相对较小 取核难度较大 另外细胞膜对核融合的障碍性较小 3 细胞贴壁和接触抑制 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上 称为细胞贴壁 细胞数目不断增多 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时 细胞就会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的接触抑制 4 植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程 但植物细胞可以先分裂再分化 而动物细胞不分化只分裂 5 克隆动物的起点是经过核移植后形成的重组细胞 其遗传物质主要来自供体 因此形成的个体性状主要同供体 但也有部分性状同受体 1 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛 如果要加速转基因奶牛的繁育 可以对此转基因奶牛进行克隆 如图所示 请结合图示回答下列问题 1 在进行细胞培养时 要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理 形成单个细胞 这个过程中需要利用 酶处理 2 用于核移植的供体细胞 一般都选用传代10代以内的细胞 原因是 3 在进行原代培养时 细胞增殖的方式是 此外 细胞增殖还表现出 和接触抑制等特点 4 将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中 去除卵母细胞细胞核的目的是 5 将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后 该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛 但也不是100 的复制 原因最可能是 6 上述动物细胞工程中涉及的技术有 转基因奶牛的克隆成功 说明了动物 具有全能性 解析 1 实践中常用胰蛋白酶处理动物组织细胞使其分离开来 2 传代10代以内的细胞代谢旺盛 分裂能力强 遗传物质没有发生改变 适于作核移植的供体细胞 3 在进行原代培养时 细胞以有丝分裂的方式进行增殖 同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象 4 去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞 5 生物的性状是细胞核基因和细胞质基因共同作用的结果 同时 生物的性状还受环境因素的影响 因此 克隆动物不可能是供体奶牛100 的复制品 6 该克隆动物的培育过程中涉及核移植 动物细胞培养和胚胎移植等技术 说明了高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性 答案 1 胰蛋白 2 该种细胞代谢旺盛 分裂能力强 且遗传物质没有发生改变 3 有丝分裂贴壁生长 4 使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞 5 生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制 生物的性状还受环境因素的影响 6 核移植 动物细胞培养 胚胎移植技术体细胞的细胞核 2 某研究小组进行药物试验时 以动物肝细胞为材料 测定药物对体外培养细胞的毒性 供培养的细胞有甲 乙两种 甲细胞为肝肿瘤细胞 乙细胞为正常肝细胞 请回答下列有关动物细胞培养的问题 1 将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养 培养液及其他培养条件均相同 一段时间后 观察到甲细胞数量比乙细胞数量 2 在动物细胞培养时 通常在合成培养基中加入适量血清 其原因是 细胞培养应在含5 的co2的恒温培养箱中进行 co2的作用是 3 在两种细胞生长过程中 当乙细胞铺满瓶壁时 其生长 药物试验需要大量细胞 两种细胞频繁传代 甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液 需用 处理 4 为了防止细胞培养过程中细菌的污染 可向培养液中加入适量的 5 已知癌基因x过量表达与肝肿瘤的发生密切相关 要试验一种抗肿瘤药物y对甲细胞生长的影响 可将甲细胞分为a b两组 a组细胞培养液中加入 b组细胞培养液中加入等量的无菌生理盐水 经培养后 从a b两组收集等量细胞 通过分别检测x基因在a b两组细胞中的 或 合成水平的差异 确定y的药效 解析 1 甲细胞为肝肿瘤细胞 乙细胞为正常肝细胞 肿瘤细胞为无限增殖的细胞 细胞周期短 在相同条件下 培养相同的时间 甲细胞的数量多于乙细胞 2 动物细胞培养液中必须加入动物血清 血清中含有血清蛋白 生长因子 促进细胞贴壁的因子 激素等合成培养基中缺乏的物质 细胞培养应在含5 co2的恒温培养箱中进行 co2的作用是调节培养液的ph 3 甲为肿瘤细胞 能无限增殖 传代的次数要比乙细胞多 乙细胞 正常肝细胞 在培养瓶中贴壁生长 当铺满瓶壁时 生长停止 为得到更多的肝细胞 需要定期地用胰蛋白酶使细胞脱离瓶壁 进行传代培养 4 培养液中加入抗生素来抑制和杀灭细菌 抗生素对动物细胞没有影响 5 设计一组加入抗癌药物的实验组 一组不加药物的对照组 通过检测药物影响x基因的表达过程 即转录形成mrna 翻译形成蛋白质的量来检验药效 答案 1 多 2 血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液的ph 3 停止多胰蛋白酶 4 抗生素 5 ymrna蛋白质 3 2015 天津理综 2015年2月3日 英国议会下院通过一项历史性法案 允许以医学手段培育 三亲婴儿 三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线 据图分析 下列叙述错误的是a 该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代b 捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿c 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核d 三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术 解析分析图示可知 母亲只提供细胞核 因而可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 a正确 红绿色盲基因属于核基因 而捐献者提供的是去核卵母细胞 其红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 b正确 三亲婴儿的染色体一半来自母亲提供的细胞核 一半来自精子 c错误 体外受精形成的受精卵需培养形成早期胚胎 而后经胚胎移植进人受体子宫内 d正确 答案c 1 动物细胞融合 1 原理 2 融合方法 聚乙二醇 peg 电激等 3 意义 突破了 的局限 使 成为可能 也为制造 开辟了新途径 考点3动物细胞融合与单克隆抗体的制备 细胞膜的流动性 灭活的病毒 有性杂交方法 远缘杂交 单克隆抗体 2 单克隆抗体 1 制备过程 杂交瘤细胞 能产生所需抗体 2 优点 特异性强 可大量制备 3 用途 作为 用于治疗疾病和 灵敏度高 诊断试剂 运载药物 正误判断 1 可以用灭活的病毒促进动物细胞融合 而不能促进植物细胞融合 2 小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40 b淋巴细胞的染色体数为46 融合后形成的杂交瘤细胞dna分子数为86 3 杂交瘤细胞进行体内培养 是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎 4 体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 5 b淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型 若仅考虑两两融合的情况 1 植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同点 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶和果胶酶 杂种植株 杂交细胞 克服了远缘杂交的不亲和性 获得杂种植株 2 单克隆抗体制备过程中的两次筛选第一次筛选 利用 筛选 获得杂交瘤细胞 即ab型细胞 a为b淋巴细胞 b为骨髓瘤细胞 不需要a b aa bb型细胞 第二次筛选 利用 筛选 获得产生特定抗体的杂交瘤细胞 特定选择培养基 多孔板法和抗原 抗体杂交法 易错警示 植物体细胞杂交与动物细胞融合需注意5个易错点 1 植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同 纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁 而胰蛋白酶等作用于细胞间的蛋白质 2 植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性 但动物杂交细胞的全能性不能表达 3 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力 但是并不破坏这些病原体的抗原结构 灭活的病毒保持了其抗原性 但毒性消失 4 除了受到注射的抗原的刺激 小鼠在生活过程中还可能受到其他抗原的刺激 因此从小鼠体内取出的多个b淋巴细胞可能产生多种不同抗体 所以进行第二次筛选是非常必要的 5 单克隆抗体制备过程中 进行了多次动物细胞培养的操作 说明动物细胞培养是动物细胞工程的基础 1 如图为利用人成纤维细胞 具分裂能力 能在hat培养基上存活 和小鼠骨髓瘤细胞 具分裂能力 不能在hat培养基上存活 进行人类基因定位的操作示意图 请回答 1 图示技术名称为 该技术的基础是 技术 2 操作所用的成纤维细胞应在 代以内 诱导融合运用了 原理 该过程中区别于原生质体融合的方法是用 处理 3 hat培养基属于 培养基 其中需要加入 等天然物质 4 培养时ph一般为 操作中加入乌本苷的目的是 5 如表所示为杂交细胞a b c中存在的人类染色体及人类特有的4种酶 表示存在 表示不存在 这4种酶均为单基因编码产生 据表判断 编码 酶的基因位于染色体2上 答案 1 动物细胞融合动物细胞培养 2 10细胞膜的流动性灭活病毒 3 选择血浆 血清 4 7 2 7 4除去成纤维细胞 5 m和p 2 下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图 据图回答下列问题 1 图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后 所获得的免疫抗血清实际上是含有 填写抗体的名称 的混合物 这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低 而且纯度低 与多克隆抗体相比 单克隆抗体突出的优点在于它的 并能大量制备 2 图中选用b细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞 说明细胞膜具有 如果仅考虑细胞的两两融合 其融合细胞有 种类型 3 图中两次筛选的目的不同 其中筛选 的目的是筛选出 筛选 的目的是筛选出 筛选时所用的培养基是特定的 培养基 4 科学工作者正在研究的用于治疗癌症的 生物导弹 就是 用 生物导弹 治疗癌症的方法优于化疗的原因是 5 由图中可看出 单克隆抗体的制备过程中 运用了动物细胞工程中的 和 两大技术 解析 1 结合题图可看出 向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后 获得的免疫抗血清实际上是含有abl ab2 ab3 ab4多种抗体的混合物 2 动物细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性 仅考虑两个细胞的融合 可得到b细胞 b细胞 骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞及b细胞 骨髓瘤细胞3种类型的融合细胞 3 在单克隆抗体的制备过程中 第1次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞 第2次筛选的目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 筛选时所用的培养基是特定的选择性培养基 4 把单克隆抗体跟抗癌药物相结合制成 生物导弹 注入体内 借助单克隆抗体的导向作用 能将药物定向带到癌细胞所在位置 在原位杀死癌细胞 这样既不损伤正常细胞 又减少了用药剂量 5 单克隆抗体的制备运用了动物细胞融合与动物细胞培养两大技术 答案 1 ab1 ab2 ab3 ab4特异性强 灵敏度高 2 流动性3 3 杂交瘤细胞能产生所需抗体的杂交瘤细胞选择性 4 单克隆抗体上连接抗癌药物不损伤正常细胞 且用药剂量少 毒副作用小 5 动物细胞融合动物细胞培养 3 2014 全国课标 某研究者用抗原 a 分别免疫3只同种小鼠 x y和z 每只小鼠免疫5次 每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价 能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数 结果如下图所示 若要制备杂交瘤细胞 需取免疫后小鼠的b淋巴细胞 染色体数目40条 并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞 染色体数目60条 按一定比例加入试管中 再加入聚乙二醇诱导细胞融合 经筛选培养及抗体检测 得到不断分泌抗a抗体的杂交瘤细胞 回答下列问题 1 制备融合所需的b淋巴细胞时 所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上 则小鼠最少需要经过 次免疫后才能有符合要求的 达到要求后的x y z这3只免疫小鼠中 最适合用于制备b淋巴细胞的是 小鼠 理由是 2 细胞融合实验完成后 融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外 可能还有 体系中出现多种类型细胞的原因是 3 杂交瘤细胞中有 个细胞核 染色体数目最多是 条 4 未融合的b淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活 原因是 解析 1 据图分析 第4次免疫后x y z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上 小鼠y的b淋巴细胞产生抗体效价最高 最适合用于制备单克隆抗体 2 融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外 还有骨髓瘤细胞和b淋巴细胞的自身融合产物 由于细胞膜具有流动性 且诱导之后的细胞融合不具有特异性 故体系中会出现多种类型的细胞 3 杂交瘤细胞形成后 小鼠的b淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个细胞核 小鼠的b淋巴细胞 染色体数目40条 和骨髓瘤细胞 染色体数目60条 融合后 染色体可达100条 4 未融合的b淋巴细胞经多次传代培养后 仍然不是能无限增殖的细胞 同时正常细胞的分裂次数是有限的 答案 1 4yy小鼠的血清抗体效价最高 2 b淋巴细胞相互融合形成的细胞 骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的 且融合率达不到100 3 1100 4 不能无限增殖 1 2015 安徽理综 科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊 以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子ix医用蛋白 其技术路线如图 真题集训 1 由过程 获得的a为 2 在核移植之前 必须先去掉受体卵母细胞的核 目的是 受体应选用 期卵母细胞 3 进行胚胎移植时 代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生 这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能 4 采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆 理论上可获得无限个转基因绵羊 这是因为 解析 1 在基因工程中 构建基因表达载体后才能将目的基因导入受体细胞 2 核移植技术选用的成熟卵母细胞处于减数第二次分裂中期 m 中期 需去掉细胞核以保证得到的克隆动物的核遗传物质来自于含目的基因的成纤维细胞 3 胚胎移植时受体动物对移人的胚胎基本不发生免疫排斥反应 这为胚胎的存活提供了可能 4 由于整合有目的基因的胎儿成纤维细胞具有增殖能力 可进行传代培养 所以理论上可利用动物细胞培养技术和核移植技术 获得无限个转基因绵羊 答案 1 含目的基因的表达载体 2 保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞m 3 免疫排斥反应 4 整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养 2 2013 全国课标 甲 乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物 甲含有效成分a 乙含有效成分b 某研究小组拟培育同时含有a和b的新型药用植物 回答下列问题 1 为了培育该新型药用植物 可取甲和乙的叶片 先用 酶和 酶去除细胞壁 获得具有活力的 再用化学诱导剂诱导二者融合 形成的融合细胞进一步培养形成 组织 然后经过 形成完整的杂种植株 这种培育技术称为 2 上述杂种植株属于多倍体 多倍体是指 假设甲与乙有性杂交的后代是不育的 而上述杂种植株是可育的 造成这种差异的原因是 3 这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖 经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子 解析 1 该新型药用植物是通过植物体细胞杂交技术获得的 要获得有活力的原生质体才能进行体细胞杂交 因此首先用纤维素酶和果胶酶去掉植物的细胞壁 然后用peg化学诱导剂 物理方法 离心 振动等 诱导二者的原生质体融合 然后采用植物组织培养技术获得杂种植株 植物组织培养的主要过程是 先脱分化形成愈伤组织 然后再分化形成植物体 利用了植物细胞的全能性 2 如果植物甲 乙是两个物种 二者不能通过有性杂交产生可育后代 原因是甲 乙有性杂交所产生的后代在

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