维生素B6对电刺激蟾蜍腓肠肌疲劳的影响.doc

维生素B6对电刺激蟾蜍腓肠肌疲劳的影响摘要：目的探讨维生素B6对电刺激离体蟾蜍腓肠肌疲劳的影响。方法制备离体蟾蜍腓肠肌标本2块,将同一蟾蜍的2块腓肠肌标本随机分为对照组(任氏液组)和观察组(B6溶液组)。采用脉冲式电流直接刺激离体蟾蜍腓肠肌作为疲劳模型,观察用药前后,最后一次刺激的肌肉收缩幅度变化率以及肌肉收缩持续时间变化率。结果维生素B6可增大疲劳肌肉的收缩幅度,增加疲劳肌肉的单收缩时程。结论维生素B6能直接作用于骨骼肌,具有抗疲劳作用。关键词: 维生素B6；任氏液；蟾蜍腓肠肌；肌肉疲劳维生素B6又称吡哆素,一种含吡哆醇或吡哆醛或吡哆胺的B族维生素,易溶于水,是脂肪和糖代谢的必需物质1。研究显示,维生素B6能抗肌肉疲劳2,减轻各种神经、皮肤的疾病、夜间肌肉痉挛、抽筋麻痹以及各种手足神经炎的症状3。但其抗疲劳成分及作用机制不详,而且大部分抗疲劳实验锁定在小鼠30天连续运动试验作为判断小鼠运动耐力的客观指标,由于整体机制复杂,很难确定其作用机制所在。本实验利用体外电刺激离体蟾蜍腓肠肌作为肌肉收缩的疲劳模型,观察维生素B6对蟾蜍腓肠肌收缩的影响,以期对维生素B6药物开发提供更详细的理论和实验数据。1 材料与方法1.1药物 任氏液 、维生素B6药片,实验时以任氏液(Ringers solution)配成浓度为2.5mg/L维生素B6溶液（称取125 mg的维生素B6药片溶于50mL的任氏液中）1.2动物 大小相近的蟾蜍（2只,其中1只备用）1.3仪器 RM6240B生理信号记录仪包括放大器、示波器,神经屏蔽盒,常用手术器械,蛙板,烧杯,滴管,纱布,粗棉线,张力传感器1.4 方法选用蟾蜍1只,制备离体蟾蜍腓肠肌标本2块,用任氏液冲洗,去血污,将同一蟾蜍的2块腓肠肌标本随机分入对照组和观察组。促使肌肉疲劳：进入实验模块点击实验肌肉神经刺激强度与反应的关系,在零负荷时,调节好张力换能器的零点；将腓肠肌标本放入烧杯中,并加入25mL 任氏液,静置10min后,将肌肉近坐骨神经端用细线固定于肌槽上,另一端经细线连于张力换能器上,大头针电极插入肌肉内,调节肌肉使处于恒定的张力状态（23g）,作为基线描记；刺激参数的设定,DC 10V,波宽0.3ms,频率1Hz,刺激时间30s；给予连续方波刺激,在生理记录仪上描记肌肉收缩曲线；得到肌肉疲劳的单收缩曲线。停止刺激后,将观察组的腓肠肌浸入25 mL浓度为2.5mg/L维生素B6溶液中,对照组加入等体积的任氏液中,浸泡15min,重复给予相同刺激,描记肌肉疲劳的单收缩曲线。观察项目: 疲劳肌肉的最大收缩幅度,单收缩时程,对照组和实验组两次刺激收缩幅度和时程的变化率；T0.5：收缩幅度下降到最大收缩幅度50%时的时间,T0.1：收缩幅度下降到最大收缩幅度10%时的时间。2 实验结果（实验结果图见后） 对照组第一次刺激 对照组第二次刺激 实验组用药前 实验组用药后表1-1对照组和实验组两次刺激收缩幅度和时程的变化率对照组I1 =28g1=75%I2 =7gB1 =205ms2=41.5%B2 =120ms实验组I1, =43.5g1,=32.2%I2, =29.5gB1, =345ms2,=13.0%B2, =300 ms注: I：最大收缩幅度B：单收缩时程 =(X1-X2)/X1 (X=I,B)从表1-1中可得：（1） 维生素B6对肌肉收缩幅度的影响对照组的最大收缩幅度变化率1 实验组的最大收缩幅度变化率1,。说明相对于对照组第二次刺激,实验组用药后能增大疲劳肌肉的收缩幅度。（2） 维生素B6对肌肉收缩时程的影响对照组的最大收缩时程变化率2 实验组的最大收缩时程变化率2,。说明相对于对照组第二次刺激,实验组用药后能增大疲劳肌肉的单收缩时程。表12 维生素B6对肌肉收缩持续时间的影响组别第一次疲劳刺激第二次疲劳刺激T0.5（ms）T0.1（ms）T0.5（ms）T0.1（ms）对照组30602550实验组43853565从表1-2中可得：对照组T0.5=30-25= 5 ms；T0.1=60-50=10 ms实验组T0.5=43-35=8 ms；T0.1=85-65=20 ms说明对照组前后两次刺激肌肉收缩幅度下降到最大幅度50%时间t0. 5的差值和下降到10%时间t0. 1的差值，均与实验组的差异不大；因此，这些数据不能反应实验组用药后增大疲劳肌肉收缩的舒张期持续时间。从对照组和实验组前后两次刺激的收缩幅度变化率、时程变化率及肌肉收缩持续时间的比较，我们分析得出维生素B6对肌肉收缩具有抗疲劳作用。3、讨论持久或过度劳累后造成的身体不适及工作效率减退的现象称为疲劳4。疲劳分为体力疲劳和精神疲劳,本文所指的疲劳为体力疲劳。体力疲劳即运动性疲劳,指由运动所引起的机体生理机能不能保持在正常水平上或不能维持其原有的运动强度, 而表现出机体运动能力下降的现象。运动时,因肌肉能量代谢变化而引起外周细胞内外液改变,从而导致肌肉工作能力下降,能量“耗竭”、代谢产物堆积。运动疲劳与细胞内自由基生成增加、ATP大量消耗、代谢产物乳酸等的堆积及自由基代谢产物丙二醛、磷酸激酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶的升高等多因素导致脂质过氧化反应增强损伤组织细胞膜、能量代谢紊乱、Ca2 +稳态失调等有关5。维生素B6包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，体内活性型为磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺。B6与蛋白质代谢的关系密切，B6能促进蛋白质转变为碳水化合物和脂肪 6。吡哆醇具有生物生长因子的活性，在生物体内容易变成作为辅酶的吡哆醛-5-磷酸（pyridoxal-5-phosphate,PLP）,其中，PLP是氨基酸代谢中的转氨酶及脱羧酶的辅酶，也是-氨基-酮戊酸（ALA）合成酶的辅酶7；并且，PLP参与催化涉及氨基酸的各种反应，包括转氨基作用，a-和b-脱羧作用，b-和-消除作用、消旋作用和羟醛反应，这些反应包括断裂氨基酸a-碳的任一键以及侧链的几种键，PLP多方面的作用是由于能够同氨基酸的a-氨基形成稳定的schiff碱加合物，并起一种有效电子减弱稳定种种反应中间物的作用。schiff碱的质子化对PLP有关键作用。另外重要的中间物通过PLP的醛碳质子化形成的产生一种新的底物PLP Schiff碱，它在转氨基中起重要作用，产生一种新的氨基酸，这种氨基酸参与三羧酸循环途径，生成大量ATP，补充消耗的ATP,使收缩期延长。 本研究提示,维生素B6抗疲劳作用有其主要成分吡哆醛的作用,维生素B6不仅能增大疲劳肌肉的收缩幅度、单收缩时程，且能增强蟾蜍腓肠肌的耐疲劳能力。其主要作用机制有可能通过吡哆醛对能量代谢的影响而发挥作用。参考文献1/view/145647.htm 2 richardson等 维生素B6对肌肉疲劳的影响 国际运动医学杂志,1981年,第三期.3/v/24/4 徐峰,陈星,韩璐璐,等. 对红景天抗疲劳作用机制的探讨 J . 食品科学, 2004, 25 (10) : 3662370.5 黄丽荣,许善初,陶明飞. 川芎嗪对电刺