高一实验二还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定.doc

高一生物 实验二 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验点拨1、生物学中物质的鉴定与化学中物质的鉴定,其原理是一致的。化学中被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀, 在生物学中物质鉴定的理念是:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应.可溶性还原糖+ 斐林试剂砖红色沉淀.(水浴加热)脂肪小颗粒 + 苏丹染液橘黄色小颗粒.(要显微镜观察)蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应.(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液)2、可溶性还原糖的鉴定实验中：应选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织。以苹果,梨为最好。且先要制备组织样液。研磨时，可加石英砂和水一起研磨。3、斐林试剂要两液混合均匀且现配现用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。斐林试剂的配制过程示意:斐林试剂甲液( 0.1 g/ml的 NaOH 溶液)斐林试剂乙液( 0.05 g/ml的 CuSO4 溶液)4.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。5.做鉴定还原糖的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比，这样可以增强说服力。6、脂肪的鉴定实验中：实验材料应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。实验前浸泡3h4h（浸泡时间太短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下来的薄片不易成形），最适宜切片。7、实验中学生应分工合作。在“还原糖的鉴定”实验中，当每组两个学生中的一个制备生物组织样液时，另一个学生可以用酒精灯将水煮开，以便缩短实验的等待时间。在“脂肪的鉴定”实验中，一个学生制作临时装片时，另一个学生则可以调试显微镜。另外，在完成前两个实验时，一个学生洗刷试管、清洗玻片和整理显微镜，另一个学生则可以进行后一个实验的操作。8、蛋白质的鉴定实验：可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白稀释液).9、双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).10、还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起.实验报告提出问题1、 怎样鉴定生物组织中的还原糖？斐林试剂怎样配制和使用？选材；制备组织样液；取组织样液；加斐林试剂 (由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入)；水浴加热；观察溶液颜色变化：浅蓝色棕色砖红色.结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀2、 脂肪的鉴定实验中，如何观察？若有脂肪，可观察到什么现象？取材；切片；滴苏丹染液染色、去浮色、制成临时装片；观察：先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察.结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色.3、 蛋白质的鉴定使用什么试剂？与斐林试剂相比有哪些相同点和不同点？双缩脲试剂；斐林试剂和双缩脲试剂的比较相同点:都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mL NaOH溶液.不同点:CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为 0.05 g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂 B为 0.01g/mLCuSO4溶液.配制比例不一样.使用方法不一样:斐林试剂是甲,乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B.鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质.反应本质及颜色反应不一样.用品准备1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果,梨为最好.2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h).3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白).4.仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜.5、试剂：斐林试剂(0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液);苏丹染液;双缩脲试剂; 体积分数为50%的酒精溶液;蒸馏水.探究过程可溶性还原糖脂肪蛋白质原理与斐林试剂反应生成砖红的沉淀被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染成红色）与双缩脲试剂反应产生紫色物质探究步骤样液制备选材含糖较高、颜色白色或近于白色的植物组织，苹果、梨最好富含脂肪的种子，以花生最好浸泡1-2d的黄豆种子（或用豆浆）或用鸡蛋蛋白方法苹果切块研磨过滤滤液制作花生种子的切片黄豆浸泡切片研磨过滤滤液鉴定步骤样液加斐林试剂振荡水浴加热煮沸切片染色漂洗镜检组织样液加双缩脲试剂A再加双缩脲试剂B观察颜色变化探究记录1、蓝色2、脂肪被染液染成（或被苏丹染成红色）3、加无明显变化，加后溶液变成探究思考4、选材要用含较高、颜色色或近于色的植物组织。斐林试剂不稳定，一般配成A液（）和B液（）来保存，用时必须将A、B两液后使用，切勿加入组织样液中进行检测5、 切片要尽可能的 染色后一定要用溶液洗去浮色为什么观察处最好只有1-2层细胞？6、用鸡蛋蛋白时，为什么一定要加以稀释？ 使用时双缩脲试剂时，为什么应先加A液再加B液？讨论与交流1、鉴定实验设计的理念是什么？请与同学讨论一下具体原理。2、在探究过程中，哪一步实验使用了显微镜？哪一步实验需要水浴加热？3、本实验使用的试剂是不是唯一的试剂？还可用什么代替？实验拓展1、在鉴定尿液中是否含有葡萄糖时还能用其他那些鉴定方法？2、据药理研究，一种茅草的根内含有降血糖的因子及多种益于健康的成分，某公司将它开发为一种保健饮料。该产品是否适用于糖尿病患者，生物兴趣小组的同学依次作为研究课题，请你完成下面的实验鉴定报告。实验目的：鉴定一种茅草的根是否含有还原性糖和淀粉。实验原理：还原性糖可用 试剂鉴定，淀粉可用 试剂来鉴定。实验器材：一种茅草的根、所需试剂、刀片、载玻片、酒精灯、试管夹、火柴、滴管。实验步骤：）鉴定还原性糖： ）鉴定淀粉： 实验现象： 结果分析： 。在鉴定还原性糖的实验操作中应注意： 。3、下列物质中,能被苏丹IV染液染成红色的是( )A.马铃薯块茎 B.浸软的蓖麻种子C.蛋清液 D.苹果4、用斐林试剂可以鉴定生物组织中还原糖的的存在,用双缩脲试剂可以鉴定蛋白质的存在,医学上,用上述两种试剂能够诊断的疾病是( )A.糖尿病,肠炎 B.糖尿病,胃炎 C.糖尿病,肾炎 D. 肾炎,胃炎5、将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是( )A.碘液,苏丹溶液 B.双缩脲试剂,碘液C.亚甲基蓝溶液,苏丹 D.碘液,斐林试剂实验练习1.用于还原糖鉴定的实验材料中经比较,颜色反应的明显程度依次是( )A.苹果白萝卜白色甘蓝叶梨 B. 梨苹果白萝卜白色甘蓝叶C. 苹果梨白萝卜白色甘蓝叶 D. 苹果梨白色甘蓝叶白萝卜2. 下列哪组试剂在使用过程中,必须经过加热( ) A.斐林试剂鉴定还原糖的过程中B.苏丹和苏丹染液在鉴定动物组织中的脂肪时C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时D.碘化钾溶液鉴定淀粉时3. 用苏丹染液对脂肪组织进行染色时,可用来冲洗浮色的药品是( ) A.吸水纸 B.H2O C.50%的酒精 D.无水酒精4. 下列哪个实验用到显微镜( )A.还原糖的鉴定 B.蛋白质的鉴定C.脂肪的鉴定 D.淀粉的鉴定5,与硫酸铜溶液在碱性环境中反应,生成紫色物质的是( )A.淀粉 B.脂肪 C.蛋白质 D.核酸6.用斐林试剂鉴定还原糖时,必须注意以下几点:(1)被鉴定材料应选择含 较高,颜色为 的植物组织,以 为最好.(2)斐林试剂很不。 必须 时再配制并立即使用.配制的方法是将4- 5滴 滴入2m1 中.(3)鉴定反应必须在 中进行.7.在鉴定花生种子细胞内含脂肪的实验过程中,应先将花生子叶薄片用 染色,然后用 洗去 ,再制成 最后，镜检结果是 .8.鉴定豆浆中的蛋白质时,应先加入2m1 ,摇荡均匀后,再加入3-4滴 ,再摇荡均匀后,颜色变化是 .9.鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品,需用的化学试剂是( )A.斐林试剂 B. 苏丹染液 C. 双缩脲试剂 D.红墨水10.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方,叙述不正确的是( )A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液B.斐林试剂的配制是将4-5滴0.05g/ml的CuSO4溶液滴入2ml 0.1g/ml的 NaOH溶液中即成C.双缩脲试剂是将3-4滴0.01g/ml的CuSO4溶液滴入2ml0.1g/ml的 NaOH溶液中混合而成的D.双缩脲试剂含有两种试剂:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为0.O1g/ml的CuSO4溶液11.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是( )先加A液,混合后再加B液摇匀观察 先加B液,混合后再加A液摇匀观察C.A,B液混合后加入,摇匀后观察D.A,B液同时加入样液,摇匀后观察参考答案实验一实验报告： 提出问题1、选材；制备组织样液；取组织样液；加斐林试剂 (由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入)；水浴加热；观察溶液颜色变化：浅蓝色棕色砖红色。结论：还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀2、取材；切片；滴苏丹染液染色、去浮色、制成临时装片；观察：先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察.结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色.3、双缩脲试剂；斐林试剂和双缩脲试剂的比较：相同点:都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mL NaOH溶液.不同点:CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为 0.05 g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂 B为 0.01g/mLCuSO4溶液.配制比例不一样.使用方法不一样:斐林试剂是甲,乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B.鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质.反应本质及颜色反应不一样.探究过程1、 棕色砖红色沉淀； 2、苏丹；橘黄色（或被苏丹染成红色）；3、双缩脲试剂A；双缩脲试剂B；紫色；4、含糖、白、白2、（NaOH：0.1g/ml）（CuSO4：0.05g/ml），混和均匀、分别。5、薄；用50%的酒精； 6、用鸡蛋蛋白时，一定要加以稀释，如果稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗干净 ，双缩脲使用时，应先加A造成碱环境，再加B实验拓展2、斐林试剂 革兰氏碘液 ；）将一种茅草的根切成薄片（或压碎），放于载玻片上，滴加12滴刚混合的斐林试剂，将载玻片放在酒精灯上加热，观察颜色变化。）将一种茅草的根切成薄片（或压碎），放于载玻片上，滴加12滴革兰氏碘液，观察颜色变化）中看是否有砖红的沉淀）中看是否有蓝色或蓝紫色