医科大学大三药理学实验内容.doc

大三 第一学期药理学实验第一次地塞米松抗炎作用【目的】采用“大鼠足跖浮肿法”观察地塞米松抗炎作用【动物】大白鼠 【药品】地塞米松注射液、右旋糖苷【器材】足跖容积测量仪、烧杯、注射器、蒸馏水、线手套【方法】 1、选用健康大鼠2只，分别标记为甲、乙鼠。即生理盐水对照组与地塞米松组。 2、甲鼠ip 生理盐水 1ml/体重，乙鼠注射地塞米松1mg/。 3、给药30min后分别注射致炎剂：将大鼠放入固定筒内，后肢拉直。于每鼠后足外踝处用记号笔化一道横线标志。用4或5号针头，0.25 ml注射器自足跖中部皮下向上注入一部分致炎剂，然后掉转针头向下注完药液（0.1ml/只）。 4、采用容积测量法于给予致炎剂前及后10、30、60、90min测量鼠足跖肿胀程度。将鼠后肢拉直放入测量仪玻璃筒内，观察足趾容积数值（ml）。 5、观察指标为各测量时间点，甲、乙两鼠足肿胀程度，以测量仪测试的容积数值表示。 足肿抑制率=（对照足跖肿胀容积药物足跖肿胀容积）/ 对照足跖肿胀容积*100%【注意】 1.每次测量足的部位要固定，要求所做记号线必须与玻璃筒内液面线保持一致重叠，然后记录，避免误差。 2.防止硬物撞击玻璃测量筒，爱护仪器。 氯丙嗪的镇静和降温作用【目的】观察氯丙嗪的镇静作用和降温作用，掌握降温作用特点。 【动物】小白鼠4只【药品】0.08%盐酸氯丙嗪溶液、生理盐水、液体石蜡（或凡士林）【器材】电子秤、电子体温表、大烧杯、1ml注射器、冰箱【方法】取小鼠4只，称重标记，观察正常活动。左手固定小白鼠，右手将涂有液体石蜡的肛表插入小白鼠肛门内约1.52厘米，3分钟后取出读数。每隔2分钟一次共2次，平均数为正常体温。然后在甲、乙两鼠腹腔注射0.08%盐酸氯丙嗪溶液0.1ml/10g，丙、丁两鼠腹腔注射生理盐水0.1ml/10g，用药后，将乙、丙两鼠放入冰箱。按表中时间各测一次体温，并观察活动情况。【结果】鼠号药物条件活动情况体温（摄氏度）用药前用药后用药前用药后（min）153045甲氯丙嗪室温乙氯丙嗪冰箱丙生理盐水冰箱丁生理盐水室温第二次药物对家兔瞳孔的影响【目的】 观察拟胆碱药、抗胆碱药对瞳孔的影响。【动物】 家兔【药品】 1%硫酸阿托品溶液、1%硫酸匹鲁卡品溶液【器材】 兔固定箱、瞳孔尺、手电筒。【方法】 取兔1只，于适当强度的光线下，用测瞳尺测出两侧瞳孔的大小（以mm表示）。另用手电筒的光照照射眼睛，测出瞳孔对光反射存在与否。然后两眼分别滴入阿托品、匹鲁卡品各2滴。滴眼时，将下眼睑拉开，使其呈杯状，并用手指按住鼻泪管，滴入药物后，不要松手，使药物在眼睑内保留一分钟，然后将手放开，任其溢出。滴药15分钟后，在同样强度的光照下，再测两侧瞳孔大小和对光反射。【结果】家 兔药 物给药前给药15分钟后瞳孔大小对光反射瞳孔大小对光反射左 眼阿 托 品右 眼匹鲁卡品药物对在体肠平滑肌和肠系膜血管的作用【目的】观察药物对在体肠平滑肌和肠系膜血管的作用。【动物】家兔【药品】25%乌拉坦，0.05%甲基硫酸新斯的明溶液，1%硫酸阿托品溶液，1%酒石酸去甲肾上腺素溶液，【器材】剪刀、手术刀、止血钳、兔解剖台【方法】取家兔1只，称其体重，以25乌拉坦耳缘静脉注射麻醉(1gkg)待家兔麻醉后，将其仰卧于兔解剖台上，剪去上腹部的毛，沿腹壁中线作56cm的切口，轻轻拉出一段小肠，观察肌肌及四肢骨骼肌活动情况，然后依次给下列药物，观察其对肠平滑肌，骨骼肌的影响，并记录实验结果.1、取0.05甲基硫酸新斯的明溶液，按0.4mlKg作耳缘静脉注射，结果如何?2、当新斯的明作用显著时，再由耳缘静脉注入0.1硫酸阿托品溶液0.2mlKg，结果如何?3、在肠系膜血管上先滴数滴生理盐水，以保持湿润，肉眼观察肠系膜血管的粗细，色泽，然后将0.1%酒石酸去甲肾上腺素溶液1-2滴滴于肠系膜上，约3分钟后再观察血管的粗细，色泽有何变化？再由腹腔拉出一副肠系膜作比较，记录结果。不同给药途径对药物作用的影响【目的】1、观察药物的不同给药途径对药物的作用也不同；2、练习小白鼠的捉拿法和灌胃、肌注法。【动物】小白鼠【药品】10%硫酸镁溶液【器材】大烧杯、托盘天平、1ml注射器、小白鼠灌胃器【方法】取小白鼠2只，称其体重并编号，分别放于大烧杯中，观察正常活动后以10%硫酸镁溶液0.2ml/10g，分别给药：甲鼠灌胃；乙鼠肌注。观察两鼠的反应有何不同。【结果】鼠号体重给药前情况药物和药量给药途径用药后反应甲乙第三次烟的毒性实验【目的】观察烟对小鼠的毒性，说明吸烟对人体的危害。【动物】小白鼠【药品】香烟【器材】水烟斗、1ml注射器、10ml量筒【方法】选出吸烟同学1人。吸烟前先取蒸馏水10 ml置于水烟斗内，振摇后，用注射器抽取0.5 ml作对照实验。然后将香烟插入水烟斗上，点燃香烟吸入。此时，烟内的毒物如烟碱等即溶于水中。实验时，取小白鼠2只，观察其正常活动后，一鼠由腹腔注射吸烟者水烟斗内的液体03m110g，另一鼠腹腔注射吸烟前水烟斗内液体05ml做对照，注射后观察二鼠有何不同反应。链霉素的毒性反应与解救【目的】观察硫酸链霉素对豚鼠的毒性反应及氯化钙对其毒性反应的对抗作用。【动物】豚鼠【药品】25%硫酸链霉素溶液，5%氯化钙溶液【器材】1ml注射器材1个，2ml注射器1个，针头2个，棉花适量。【方法】取豚鼠2只，称体重，将1只鼠四肢外侧的毛剪去，然后腿部肌肉注射硫酸链霉素600 mg /Kg(即25之硫酸链霉素0.24mllOOg)，观察有何反应出现?待症状明显后，立即腹腔注射氯化钙溶液5-0.32 m1/100g，观察上述症状是否消失。2号鼠按上述剂量同样腿部肌肉注射硫酸链霉素，出现症状后，腹腔注射等容量生理盐水，观察症状是否改变?【注意事项】肌肉注射链霉素后毒性反应发生较慢，一般在10分钟左右出现反应，并逐渐加重。药物相互作用【目的】通过实验，认识药物相互作用的协同和拮抗作用。【原理】两个或两个以上药物合用时，往往在药效学或药动学上发生相互作用，导致药物作用发生变化。【材料】小鼠5只，体重18-22g，雌雄不限。0.1%地西泮、0.2%戊巴比妥钠、0.04%回苏灵。【方法与步骤】取性别相同，体重相近的小鼠5只，称重编号后，按下法用药：甲鼠腹腔注射0.1%地西泮0.1mg/10g（即0.1ml/10g）。乙鼠皮下注射0.2%戊巴比妥钠0.4mg/10g（即0.2ml/10g）。丙鼠先腹腔注射0.1%地西泮0.1mg/10g（即0.1ml/10g），10分钟后再皮下注射0.2%戊巴比妥钠0.4mg/10g（即0.2ml/10g）。丁鼠腹腔注射0.04%回苏灵0.08mg/10g（即0.2ml/10g）。戊鼠腹腔先腹腔注射0.1%地西泮0.1mg/10g（即0.1ml/10g），10分钟后再腹腔注射0.04%回苏灵0.08mg/10g（即0.2ml/10g）。将5只鼠分置铁丝笼中，比较各动物反应及最终结果。【结果处理】将上述观察结果填入下表，并对结果进行分析。鼠号性别体重g 第一次给药 药名 用药后反应 第二次给药 药名 用药后反应相互作用结果12345【方法评价】药物间的相互作用往往影响药物作用、疗效。常常表现：1.药物作用加强；2.作用减弱；3.毒副作用加强；4.毒副作用减弱；5.无关。1和4是我们需要的，2和3在临床用药中应该避免。在新药研究时也应考虑药物的相互作用问题，尤其是复方制剂研究。【思考题】地西泮与回苏灵、地西泮与戊巴比妥钠之间通过何种方式发生相互作用？第四次硫喷妥钠的静脉麻醉作用【目的】观察硫喷妥钠的静脉麻醉作用，掌握静脉麻醉作用的特点及应用时应该注意的事项【动物】家兔【药品】2硫喷妥钠溶液【器材】手电、剪刀、测瞳尺、婴儿磅秤、5ml注射器【方法】取家兔一只，称体重后剪去睫毛，观察其一般活动情况，纪录呼吸快慢深浅及呼吸形式，测量瞳孔大小，对光反射，角膜反射，对痛觉刺激的反应，然后由耳静脉缓慢注射硫喷妥钠15-20mg /kg，直至眼睑反射消失，观察上述各项指标的变化及苏醒时间。【结果】结果记入下表呼吸频率（次/分）对光反射角膜反射瞳孔直径（cm）痛觉反射肌张力麻醉维持时间左右给药前给药后【注意事项】1、以角膜反射消失为麻醉指标，药物剂量可能因个体差异而有所变化。2、静脉注射时速度宜缓慢，并密切观察动物呼吸变化，以防呼吸抑制而死亡。【操作方法】1、对光反射测量方法：先打开手电筒，自眼之一侧突然向眼球掠过去，观察瞳孔是否缩小，按反应情况可记录为“灵敏”、“迟钝”、“消失”等。2、角膜反射测量法：可剪取粗硬之兔须一根，将硬端呈垂直方向以相同强度刺激角膜不同部位，连续数次，记录法同下。3、痛觉反射测量法：以大头针扎家兔之四肢足等部位，观察是否有反应。4、瞳孔测量法：以测瞳尺之缺口，对准家兔眼，并使测量者的目光与测瞳尺和兔瞳孔三者处于同一水平上，被测动物头部应正面对光，给药前后头部位置一致，否则因头部位置变动造成光线强弱不一，可造成误差。药物的镇痛作用【药品与器材】热板仪，小动物电子天平，注射器，秒表；2%阿司匹林（2mg/10g）溶液，1%曲马多（1mg/10g）溶液， 0.05%酒石酸锑钾水溶液0.15ml/10 g或1%冰醋酸（acetic glacial）溶液（0.1ml/10 g），生理盐水。一、热板法镇痛实验【实验目的】掌握作用于中枢神经系统镇痛药物的筛选方法，利用热板法筛选镇痛药并比较药物的镇痛效价。【实验原理】一定强度的温热刺激动物躯体某一部位可产生疼痛反应。研究表明热刺激强度应控制在45-55之间，低于此范围不会产生明显的疼痛反应，高于55则有可能灼伤动物。本实验选用小鼠热板法制备疼痛模型。小鼠的足底无毛，皮肤裸露，在金属板上可因热刺激足部产生疼痛反应，表现为舔后足，踢后腿或跳跃等现象，常以舔后足出现的时间作为痛阈值。【实验对象】小鼠，雌性，【方法与步骤】1、动物筛选：将热板仪调至550.5，将小鼠置于热板上，密切观察小鼠反应，以舔后足为痛觉敏感指标。秒表记录从置于热板上到舔后足的时间，共两次，每次间隔5min,取其为该鼠的痛阈值，用此法筛选痛阈值在30s以内的小鼠供实验用。2、药物实验 （1）取筛选出的小鼠3只，称重，随机分成三组，并编号标记。（2）甲组小鼠腹腔注射2%阿司匹林（0.2g/kg）溶液0.1ml/10 g，乙组腹腔注射1%曲马多（1mg/10g）溶液0.1ml/10 g, 丙组小鼠腹腔注射同等剂量的生理盐水0.1ml/10g。（3）给药后15min、30min、45min、60min依次测定各鼠痛阈值，如小鼠在60s内仍无产生疼痛反应，应立即取出不再刺激，按60 s计算。3、实验结果处理：将给药前后小鼠平均痛阈值及痛阈改变百分率填入表中。 表 热板法测定药物镇痛作用实验记录组别给药前平均痛阈值（s）给药后平均痛阈值（s)痛阈改变百分率（%）15min30min60min15min30min60min甲组乙组丙组痛阈改变百分率=(用药后平均痛阈值用药前平均痛阈值)/用药前平均痛阈值【注意事项】1、不同个体对热板刺激反应有不同表现，多数为舔足；有些动物反应为跳跃而不舔足。舔足反应为保护反应，而跳跃则为逃避反应，故实验中宜只选其一为指标。实验前动物应先筛选，正常痛域值30 s ，10 s 以及喜跳跃小鼠应弃用。2、 热板法应选用雌性小鼠，雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂，与热板接触影响实验结果。3、动物体重对结果有影响，小鼠的体重以20g左右为宜。4、 室温以18左右为宜，此温度小鼠对痛刺激的反应较稳定。5、 测痛阈时若60 s 无反应立即取出，以免烫伤足部，其痛阈值按60 s计。二、扭体法镇痛实验【实验目的】观察药物对炎症所引起疼痛的镇痛效应，掌握作用于外周神经系统镇痛药物的筛选方法。【实验原理】许多化学物质如强酸、强碱、钾离子、福尔马林等接触皮肤粘膜或注入体内，均能引起疼痛反应，可建立疼痛模型，研究疼痛生理及筛选镇痛药物。腹膜有广泛的感觉神经分布，将一定容积和浓度的化学刺激物质注入腹腔，可刺激腹膜引起深部大面积且持久的疼痛反应，表现为腹部两侧收缩内陷，躯干与后肢伸张，臀部抬高等，称为扭体反应（writhing response）。该反应在注射后15min内出现频率高，故以注射后15min内发生的扭体次数或发生反应的鼠数为疼痛定量指标。【实验对象】 小鼠；【实验方法】1、取小鼠3只，称重，随机分成三组，并编号标记。2、甲组小鼠腹腔注射2%阿司匹林（0.2g/kg）溶液0.1ml/10 g，乙组腹腔注射1%曲马多（1mg/10g）溶液0.1ml/10 g, 丙组小鼠腹腔注射同等剂量的生理盐水0.1ml/10g。3、给药后30min后，每鼠均由腹腔注射0.05%酒石酸锑钾水溶液0.15 ml/10g，记录10分钟内各组出现的扭体反应（腹部内凹，后退伸张，臀部高起）动物数。实验完毕后，综合全实验室结果计算药物镇痛百分率： 实验组无扭体反应数-对照组无扭体反应数药物镇痛百分率=- 对照组无扭体反应数化学刺激法测定药物镇痛作用实验记录扭体反应动物数无扭体反应动物数扭体次数镇痛百分率（%）抑制扭体反应百分率（%）对照组阿司匹林组曲马多组第五次鱼精蛋白和肝素的拮抗作用【目的】观察鱼精蛋白和肝素的拮抗作用【动物】家兔【药品】25u/ml肝素溶液、0.75%鱼精蛋白、生理盐水【器材】恒温水浴、试管（9支）【方法】取健康家兔3只，称体重，用25%的乌拉坦（4ml/kg）耳缘静脉麻醉。之后家兔由耳缘静脉注射生理盐水2ml/kg。乙、丙兔由耳缘静脉注射25u/ml肝素溶液2ml/kg；由丙兔耳缘静脉缓慢注射0.075%鱼精蛋白溶液1.5ml/kg。20分钟后取血测定凝血时间。取内径8mm的试管9只，按每组3只分为3组，作好标记，排列于试管架上。从各兔颈动脉或心脏取血4ml，立即取下针头，将血液注入本组试管内，每管1ml，放入37度恒温水浴，开始秒表记时。每隔30秒将试管取出轻轻倾斜，观察血液的流动性。当试管倾斜时血液开始不再开始不再流动即为血凝。计算各兔血凝时间值。【注意】每次取血时，从血液进入注射器到放入水浴的时间应力求一致。【思考题】鱼精