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第二章 克隆技术章末检测(时间:90分钟满分:100分)一、选择题(本题包括20个小题,每小题2.5分,共50分)1植物组织培养的理论基础是()a培养基中营养物质全面 b细胞的全能性c细胞的分裂 d细胞的分化2我国科学工作者曾将分别属于两个科的植物烟草和菠菜成功杂交,从而获得一种新型的烟草品种。在此过程中,下列过程不是必需的是()a杂交前要除去两种细胞的细胞壁b原生质体融合后,要选出烟草菠菜融合细胞加以培养c要诱导愈伤组织进行再分化d原生质体融合前要先脱分化 3下列实例与所利用的技术或原理等不相符合的是()a植物原生质体融合和动物细胞融合都利用了细胞膜的选择透过性b植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性c转基因抗虫棉的培育需要利用植物组织培养技术d植物愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都与细胞分裂有关4植物体细胞杂交是利用不同物种的两个体细胞融合成一个杂种细胞的过程。该过程是指()a不同植物的精子和卵细胞的融合 b不同植物的原生质体的融合c完整的两个体细胞的融合 d植物花粉细胞的两两融合5下列关于细胞工程的叙述,不正确的是()a电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合b去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理c小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的b淋巴细胞融合可制备单克隆抗体d动植物细胞培养都需要经过脱分化处理6下列关于动物细胞、组织培养的叙述,错误的是()a动物细胞培养中,首先要将取得的动物组织用机械消化或胰蛋白酶消化成单个细胞,然后在培养液中培养b培养的动物细胞在体外会出现接触抑制现象,但经过传代培养与给充足的营养和空间即可无限传代c动物组织在体外及人工调节下维持生活状态和生长特性d动物组织经过长期的培养只能使单一类型的细胞保存下来,最终成为简单的细胞培养7用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可形成愈伤组织,下列叙述错误的是()a该愈伤组织具有分裂能力 b该愈伤组织的细胞没有全能性c植物激素影响该愈伤组织的再分化 d该愈伤组织形成时要避光处理8下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中,不正确的是()ab淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合,一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导b融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生单克隆抗体c体外培养时,一个效应b细胞可以产生抗体,但不能无限增殖d单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性明显9由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”。下列对此叙述不正确的是()a“瞄准装置”是指识别肿瘤的单克隆抗体 b“弹头”是由化学药物构成的c“弹头”具有特异性 d“瞄准装置”具有特异性10以下不能说明细胞全能性的实验是()a胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 b紫色糯性玉米种子培育出植株c转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 d番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株11近几年神舟飞船频频成功发射和着陆。在飞船上,科学家进行了无人搭载的空间动物细胞融合实验。该实验所依据的原理和促进细胞融合的方法分别是()a细胞的全能性、灭活病毒诱导融合 b细胞的全能性、电刺激融合c生物膜的流动性、灭活病毒诱导融合 d生物膜的流动性、电刺激融合12经诱导融合得到的融合细胞还需经过下列哪项措施才能得到杂种植株()a分离杂种细胞,直接接种b筛选鉴定杂种细胞后,再经植物组织培养才能获得植株c让杂种细胞自交获纯系植株d杂种细胞经传代培养成植株13下列有关细胞工程的说法,正确的是()a植物体细胞融合实际上是不同植物体细胞的细胞核的融合过程b胡萝卜的愈伤组织继续培养,重新分化成根和芽等器官的过程叫脱分化c在动物细胞的原代培养过程中,要定期使用胰蛋白酶d动物细胞融合的原理与植物细胞融合的原理是不同的14利用生物工程改造生物特性,从而生产人类所需的产品。下列有关措施的叙述中,不正确的是()a利用基因突变原理培育成青霉素高产菌株b利用基因突变原理培育成生产人干扰素的酵母菌c利用基因工程手段培育成生产人胰岛素的大肠杆菌d利用细胞工程技术培育成生产单克隆抗体的细胞系15如图为白菜甘蓝杂种植株的培育过程。下列说法正确的是()a图示白菜甘蓝植株不能结籽b愈伤组织的代谢类型是自养需氧型c上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂d白菜甘蓝杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果16下列现代生物科技的应用中,不需要进行检测与筛选的是()a对植物的茎尖进行组织培养获得脱毒苗b将鼠的骨髓瘤细胞与b淋巴细胞融合,制备单克隆抗体c利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”d将抗虫基因导入植物细胞,培育具有抗虫特性的新植株17以下四种细胞工程技术中,培育出的新个体不能同时具有两个亲本遗传性状的是()a细胞融合 b植物细胞或组织培养 c细胞核移植 d动物胚胎移植18下列关于动物细胞培养的叙述中,正确的是()a动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵细胞b动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等c动物细胞培养过程中要用胰蛋白酶处理使细胞分散d“海拉细胞系”在实验室中被广泛传代使用是因为其遗传物质保持了长时间的稳定19为获得纯合高蔓抗病番茄植株,采用了右图所示的方法:图中两对相对性状独立遗传。据图分析,不正确的是()a过程的自交代数越多,纯合高蔓抗病植株的比例越高b过程可以取任一植株的适宜花药作培养材料c过程包括脱分化和再分化两个过程d图中筛选过程不改变抗病基因频率20下表为动物细胞工程的有关内容比较,你认为错误的是()项目植物细胞工程动物细胞工程特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理制细胞悬浮液融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种植物单克隆抗体的制备培养基区别麦芽糖是离体组织赖以生长的成分动物血清不可缺少a.0处 b1处 c2处 d3处二、简答题(本题共5个小题,共50分)21(8分)下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径,请据图回答有关问题:(1)该过程利用的技术称为_,其原理是_。(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中_。(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则,是一种高度_的薄壁细胞,胚状体与_发育形成的胚有类似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根。 (4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素,请说明下列各项需要消毒,还是需要灭菌。培养基,培养皿,接种环,花蕾,实验操作者的双手,三角锥形瓶。_(填编号)需要灭菌,_(填编号)需要消毒。 22(10分)“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长期短、耐热性强和耐储藏等优点。如图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图。请回答下列问题:(1)在上述过程中,过程常用的方法是_。(2)已知白菜细胞中含2x条染色体,甘蓝细胞中含有2y条染色体,则杂种植株叶肉中染色体数为_。通常情况下,白菜和甘蓝杂交是不能成功的,原因是_。(3)过程常用的化学试剂是_;若用于杂交的白菜和甘蓝的基因型分别为aabb、ccdd,在过程中可获得哪几种类型的融合细胞?_(写出基因型)。(4)该项技术的意义是_。23(12分)如图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。(1)该方案能达到预期效果吗?_。原因是_。(2)图中为_过程,常用_作为诱导剂。该细胞继承了_,因此,不仅能_,还有_的本领。(3)图中进行细胞培养的目的是_。(4)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的不同,是通过筛选获得_,是通过筛选获得_。(5)图中的培养能获得_细胞,便于大规模培养。(6)破伤风杆菌的抗体最终可从_和_中提取。(7)该方案的目的是_。24(8分)世界上第一只克隆绵羊“多莉”和我国第一头转基因牛“滔滔”的培育过程如图甲和乙所示,请认真读图回答下列问题。(1)写出图甲中、所指的生物工程技术名称_、_。(2)写出图乙中、所指的生物工程技术名称_、_。(3)图乙中所示生物技术路线的关键环节是()a b c d(4)图甲中d的性状与母绵羊_(填“a”或“b”)一样,因为_。(5)图乙中d与亲本a、b牛的最根本区别是_。(6)继植物组织培养之后,克隆绵羊的培育成功,证明动物细胞核具有_。(7)给图甲和乙中e起一个最恰当的生物学名称,填入图中。25(12分)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图,请回答下列问题:(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞_。(2)气室中充入5%co2,气体的主要作用是_。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 _,以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物x有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物x是否具有解毒作用。材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物x溶液等。实验过程:在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。步骤一:加入肝脏培养液步骤二:加入有机物x溶液步骤三:放置肝脏小块甲乙 丙丁上表中还需进行的操作是_。培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明_。第二章克隆技术答案1b组织培养利用的植物体的器官或组织都是高度分化了的植物细胞。这些细胞只有保持全能性,才能培育出完整的植株,即才能进行组织培养,因此,组织培养的理论根据是细胞的全能性。2da、b、c三项均是植物体细胞杂交技术所必需的。而d项的脱分化过程发生在杂种细胞经组织培养形成杂种幼苗的过程中,而不是在原生质体融合之前。3a植物原生质体融合和动物细胞融合都利用了细胞膜的流动性。4b植物体细胞杂交的对象是体细胞。a和d是生殖细胞,故排除。在进行植物体细胞杂交时,由于细胞壁会阻碍体细胞融合,因此,首先采用酶解法去除细胞壁,分离出有活力的原生质体,然后再进行融合。所以,植物体细胞杂交实际上是两个不同植物的原生质体的融合。5d植物细胞培养脱分化处理得到愈伤组织,然后再分化成胚状体,最后得到植物幼苗。动物细胞培养不需要脱分化处理。6b培养的动物细胞会出现接触抑制现象,经传代培养,有些能无限传代,有些不能无限传代,最后死亡。7b愈伤组织是植物细胞脱分化和分裂形成的,它是一团无定形的薄壁细胞,愈伤组织的形成过程中要进行避光处理,否则就不利于产生大量的愈伤组织,生长素和细胞分裂素的配比影响着愈伤组织的再分化,而愈伤组织的细胞也具有该植物全部的遗传信息,因此该细胞也具有全能性。8a诱导细胞融合的因素常有:病毒诱导融合,如仙台病毒;聚乙二醇诱导融合;电场诱导融合。9c单克隆抗体具有特异性识别肿瘤细胞等的作用,可以作为确定目标的“瞄准装置”。而“弹头”是由具有杀伤力的药物构成的,但它不具有特异性识别肿瘤细胞的功能。10b细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。能体现细胞全能性的最好实例是植物组织培养,即离体的植物的器官、组织或细胞经过脱分化和再分化最终能形成一个完整的植株。a、c、d三项都要用到植物组织培养技术,故b项符合题意。11c不管是动物细胞融合,还是原生质体融合,都是利用了生物膜具有流动性这一原理。动物细胞融合时最常用的诱导手段就是利用灭活的病毒诱导。12b用a、b分别表示所选的两类细胞,则得到的融合细胞可能有aa、bb、ab三种类型,其中只有ab型才是所需要的杂种细胞,经组织培养后才能长成杂种植株。所以必须从三种融合细胞中筛选鉴定出ab型的杂种细胞。13ca错,植物体细胞融合实际上为原生质体的融合;b错,脱分化指已分化的植物细胞重新具备分化能力的过程;d错,两者原理相同,操作过程的具体技术不同。14b利用基因工程手段使酵母菌生产人干扰素,利用的是基因重组原理而不是基因突变原理。15d植物体细胞杂交培育的“白菜甘蓝”杂种植株中有2个染色体组来自白菜,2个染色体组来自甘蓝,是可育的。愈伤组织是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞,不能进行光合作用,代谢类型为异养需氧型。“白菜甘蓝”的培育过程中有有丝分裂和细胞的分化,但是没有减数分裂。任何生物的性状都是基因选择性表达的结果。16a在制备单克隆抗体过程中,要筛选出能产生相应抗体的杂交瘤细胞。植物体细胞杂交过程中,要筛选出相应的杂种细胞进行植物组织培养,才能获得相应的杂种植株。转基因植物培育过程也要进行相应的检测与筛选,才能制备出所期望的新品种。17b植物细胞或组织培养只利用了一个细胞就可以培养成新的植物个体,因此,只含有一个亲本的遗传性状。其他不同程度的具有双亲的遗传物质。18c动物细胞培养选用材料多为早期胚胎组织或幼龄动物的组织、器官;动物细胞培养液的成分为:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等,不存在生长素;动物细胞培养时要用胰蛋白酶处理,使细胞分散开;“海拉细胞系”是已经发生癌变的细胞,可以无限增殖。19d自交的遗传效应是纯合子所占的比例越来越大;图中的杂交育种、单倍体育种和转基因育种过程中都参与了人工选择,所以基因频率会发生改变,因此选d。20d植物细胞工程常采用的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交,其理论基础是植物细胞的全能性。动物细胞工程技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单克隆抗体的制备,还有胚胎移植、核移植等,其中动物细胞培养是基础。动、植物细胞工程中都需要对所取材料进行特殊处理,植物细胞工程要利用酶解法去除细胞壁,得到有生活力的原生质体,动物细胞工程则需要用胰蛋白酶处理单个细胞。动、植物细胞工程所用的培养基是不同的,植物细胞工程中利用固体或半固体培养基,含有蔗糖、植物必需的矿质元素、植物激素等,动物细胞工程中利用液体培养基,含有动物所需要的营养物质、无机盐、维生素、动物血清等,但是由于血清中含有许多未知成分,会对研究结果有所影响,因此有时会采用无血清培养。21. (1)植物组织培养技术植物细胞的全能性(2)激素的种类及其浓度配比 (3)液泡化正常受精卵(或受精卵)(4)解析(1)花药离体培养技术属于植物组织培养技术,其根本原理是植物细胞具有全能性。(2)花药经脱分化形成胚状体还是愈伤组织取决于培养基中植物激素的配比情况。(3)愈伤组织是一种高度液泡化的薄壁细胞,具有较高的全能性,而胚状体和自然状态下的受精卵的结构类似,具有胚芽、胚根和胚轴。(4)植物组织培养要在无菌和人工控制的条件下进行,器材要灭菌,药品要消毒。22(1)酶解法(或用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁)(2)2x2y存在生殖隔离(3)聚乙二醇(peg)aaaabbbb、ccccdddd、aabbccdd(4)克服远缘杂交不亲和的障碍解析(1)获得原生质体常用酶解法,即用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)杂种植株中细胞核融合,故染色体数为两种生物之和即2x2y。(3)化学诱导法常用peg(聚乙二醇)作为诱导剂,融合后细胞可能的基因型为:aaaabbbb、ccccdddd、aabbccdd三种类型。(4)杂种植株来源于不同种的体细胞杂交过程,正常情况下存在生殖隔离,故其意义为克服了远缘杂交不亲和的障碍。23(1)不能没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生单一抗体的b淋巴细胞(2)细胞融合和筛选灭活的病毒双亲细胞的遗传物质大量繁殖产生特异性抗体(3)在体外条件下使杂交瘤细胞大量增殖(4)杂交瘤细胞产生特定抗体的杂交瘤细胞(5)足够量杂交瘤(6)细胞培养液小鼠腹水(7)制备单克隆抗体解析(1)b淋巴细胞有以下特点:在体外不能无限增殖;只有受到抗原刺激后才能产生相应抗体;与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞后既可无限增殖,又能产生大量所需抗体。所以单克隆抗体制备过程首先需要注射与生产单克隆抗体发生特异性免疫反应的抗原,否则小鼠体内不会发生特异性免疫反应,产生合成所需抗体的b淋巴细胞。(2)获得b淋巴细胞后,因为b淋巴细胞不能大量

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