燕山大学 1中草药复方解酒药物饮料的研制及其功效研究武重阳韩增胜刘晓清张瑞景王丽娜《食品研究与开发》（中文核心）（已投审稿中） 2 专利情况 申请专利 项（专利名称.doc

燕 山 大 学大学生创新性实验计划项目结题验收表 项目名称中草药复方解酒药物饮料的研究项目来源国家、学校项目编号101021631项目负责人武重阳学 号080110020052所在院（系）环境与化学工程学院年级、专业08级应用化学联系电子信箱1577720911项目起止时间 2010 年 9 月至 2011 年 10 月指导教师韩增胜联系电表日期 2011 年 10 月 31 日燕山大学教务处制表填 表 说 明一、燕山大学“大学生创新性实验计划”项目结题验收表（以下简称验收表）由立项负责人根据项目实施情况实事求是填写，并用A4纸打印，于左侧装订成册。 二、项目负责人填写完验收表和项目原创性声明（见附表一）后，必须请指导教师审核，并填写意见和签名。三、验收表一式一份，由所在学院签署意见后统一送至学校教务处教学质量与建设科。四、各项目组要将与本项目相关已发表的论文、专利申请录用通知的复印件以及项目结题总结报告或其它支撑材料与验收表一并上交，这些将作为项目评优的主要材料。 五、立项负责人要整合和凝炼项目创新点，特色和应用等，认真撰燕山大学“大学生创新性实验计划”项目研究成果综述（见附表二）10001500字，不附图表。六、项目结题时，项目组可以将有关研究成果及项目进行过程中的记录本一并上交学校教务处教学质量与建设科，这些将作为项目评优的支撑材料。七、填写本表内容统一使用宋体，小四号字，单倍行距。 项目名称中草药复方解酒药物饮料的研究立项经费10000经费结余2770合同中的结题时间2011 年 9 月实际结题时间2011年 9 月项 目负责人姓 名学 号联系电话项目中分工签 字武重阳08011002005218931905993负责人参与成员刘晓清09011002000715227251360进行试验张瑞景09011005003815232335699进行试验指导教师姓 名职 称所 在 学 院联 系 电 话韩增胜副教授环化学究成果成果形式论文 研究（调研）报告 产品研制 软件开发 专利申请其他 发表论文情况共 1 篇（论文题目，作者，期刊名称，发表日期，期刊等级及类别等）1中草药复方解酒药物饮料的研制及其功效研究,武重阳,韩增胜,刘晓清,张瑞景,王丽娜.食品研究与开发（中文核心）（已投审稿中)2专利情况申请专利 项（专利名称，专利申请类型、专利申请日，专利号等）鉴定情况产品研制和软件开发鉴定机构，鉴定时间和应用范围等一、项目研究内容简介（300字以内）、执行过程（原进度安排与实施情况对照）和完成情况项目研究内容简介： 本实验项目针对目前解酒药物主要在加速酒精在体内的代谢方面发挥作用，而加强首过效应的药物较少这一问题，创造性的将代谢增强剂以及发挥加强首过效应的药物结合起来，从两方面发挥解酒作用。因此我们项目组在前人研究的基础之上选取了发挥加强首过效应的刺五加、远志以及发挥代谢增强剂作用的葛根、枳椇子作为主要原料辅以VB、蜂蜜等材料，经有效成分提取浓缩后，按比例进行搭配，研制出复合型解酒保健药物，并对其效果通过实验进行研究。在进行动物实验过程中我们首先进行小鼠的醉酒实验以确定比较合适的酒精灌胃量，其次我们进行了小鼠的防醉实验和解酒实验，通过观察小鼠的耐受时间和醉酒时间来研究解酒药物的防醉效果和解酒效果。接着我们将小鼠连续灌胃一周后取其肝组织制成组织切片观察解酒药物对小鼠肝脏的保护情况。同时取小鼠的血液和肝组织利用试剂盒对其中某些酶的活性或含量进行测定，了解解酒药物的解酒机理。 执行过程：原进度安排：2010.072010.10查阅资料、设计项目研究方案；2010.102010.12对市场上现存的几种解酒药进行研究，分析其主要成分及其作用，根据分析结果以及拟采用的几种药物，找出可行性搭配；2010.122011.03就可行性搭配进行动物实验；2011.032011.05对实验数据进行统计、处理与分析，根据结果找出最优搭配； 2011.052011.07以最优搭配为基础研制开发饮料成品；2011.072011.09填写结题表、撰写研究论文和总结报告、参加结题答辩和成果推广实施情况：随着我们对项目研究的不断深入以及实验条件的限制，我们项目组对项目的安排进行了调整，实施情况具体如下：2010.102010.12查阅资料、设计项目研究方案；2010.122011.03对市场上现存的几种解酒药进行研究，分析其主要成分及其作用，根据分析结果以及拟采用的几种药物，找出可行性搭配；2011.032011.04 药材的采购、粉碎、有效成分提取、浓缩；实验小鼠的采购饲养；2011.052011.06 第一次动物实验，根据实验结果调整搭配；2011.072011.08 第二次动物实验，得到效果理想搭配，进行肝脏切片和机理实验；2011.092011.10 实验数据的处理、填写结题表、撰写研究论文和总结报告、参加结题答辩。完成情况： 在老师的细心指导以及小组成员的不断努力下，最终基本上完成实验项目。研制出效果比较良好的解酒药物，并对其解酒防醉效果以及对肝脏的保护作用进行了研究。最后我们利用各种试剂盒初步研究了解酒药物的解酒机理。二、项目研究创新点与特色当前的解酒药物主要从两方面发挥作用:其一,用胃肠吸收抑制剂抑制酒精的胃肠吸收,加强酒精在肠胃道的首过效应,降低血液中的酒精浓度;其二,用代谢增强剂使药物直接作用于肝代谢酶系,提高肝内P-450酶、ADH和ALDH等酒精降解酶的活力,加速酒精及其代谢产物的消除速率,减轻其对组织和细胞的损害。但现实中的解酒药物的解酒功效主要集中于加强酒精在人体内的代谢方面，对两种解酒机理的综合解酒效果研究较少。该项目研究创新点与特色在于通过将发挥代谢增强剂作用与加强首过效应的两类解酒药物进行搭配组合，使两类药物在功能上实现互补，多管齐下，使解酒效果更迅速高效。三、项目研究取得成果（成效）的实践应用情况及效果成果：1.研制出两种效果较好的解酒药物，配方如下：表1 A和B两种饮料中药材的用量Table 1 The amount of various herbs in A and B beverages配方葛根提取物 粒/10g枳椇子 g生药/10g远志g生药/10g刺五加g生药/10 g丹参g生药/10 g蜂蜜mL/10 gVB1、VB2、VC片/10 gA药0.00970.03850.09890.01150.11900.05560.0069B药0.06250.07720.13260.00960.07940.05560.00692.我们小组在完成试验之后，总结实验数据撰写了论文中草药复方解酒药物饮料的研制及其功效研究一篇。现已投到核心期刊食品研究与开发杂志社，目前正在审阅过程中。效果：1.小鼠防醉解酒药效试验：在动物实验中我们所研制的解酒药物取得了比较理想的效果：解酒饮料A药组和B药组小鼠酒精耐受时间分别为（183）min和（254）min明显长于未加药组（132）min（P0.01）；同时，A药组和B药组处理小鼠后醉酒时间分别为（19514）min和（1689）min明显短于对照组未加药组（25413）min（P0.01）。 表2 两种解酒药物防醉实验药效对照表组别A药组B药组对照组耐受时间/min183254132醉酒时间/min19913168925011表3 两种解酒药物解酒实验药效对照表组别A药组B药组对照组耐受时间/min132132132醉酒时间/min195141651025413 从图1可以清楚地看出两种药物均具有明显的解酒和防醉效果，并且B药物比A药物效果明显。2.肝组织损伤实验：为了评价本复合药物对酒精所致的肝组织的损伤情况，将小鼠连续灌胃1周后第7 d处死小鼠，迅速取其肝脏制作小鼠肝脏组织石蜡切片，并将小鼠肝脏组织石蜡切片于普通光学显微镜下进行镜检分析。结果发现，经灌酒处理后的未加药对照组小鼠肝小叶界限不清，肝细胞索紊乱，肝窦变窄甚至消失，肝细胞片状气球样变，细胞体积增大。肝细胞广泛浊肿，胞浆、胞核淡染，胞核模糊不清（图2）。而正常小鼠肝小叶结构清晰，肝细胞索排列整齐，肝窦正常，胞核结构清晰，无明显病变情况（图3）。连续灌胃给药1周后，各组肝细胞明显恢复，肝小叶结构清晰，肝细胞索排列整齐，肝窦基本恢复正常。肝细胞浊肿和炎细胞浸润明显减轻。中央静脉周围部分肝细胞已恢复正常，周边部分肝细胞仍处于浊肿状态，个别肝细胞处于气球样变（图4和图5）。图2图3图4图53、酶活性实验：ADH是乙醇的氧化还原酶，在乙醇代谢中起着重要的作用 ，酶活性标志着机体新陈代谢过程中代谢乙醇功能的改变。我们利用试剂盒测定小鼠肝匀浆中ADH酶活性，来解释解酒药物的醒酒机理。结果表明乙醇可以降低ADH酶活力，而解酒药物对ADH的活性具有保护和提高的作用。谷丙转氨酶是广泛存在于动物体内的重要的酶，酶活性高低可以反映肝脏功能。通过谷丙转氨酶活性的测定，结果表明经灌胃白酒的对照组GPT活性明显高于空白组，说明酒精处理可诱导这两种酶活性提高。而同时灌胃解酒药物饮料的两组小鼠肝脏内GPT的活性与对照组相比均有所降低，说明在解酒药物可以降低酒精对于肝脏的诱导作用，减轻酒精对肝脏的损伤。血清XOD测定对肝细胞具有特异性诊断意义，这一点优于肝功能检测的其他酶类如GPT。血清XOD主要来自肝脏胞浆中，当肝细胞受损时，血清中的XOD活性呈不同程度的升高，而肝外疾病的XOD活性多为正常，因此XOD的检测可作为反应肝脏代谢状态的一个敏感指标，甚至优于GPT的测定。有实验结果可知，给药组小鼠血清中XOD含量均低于对照组，由此可知解酒药物对于肝组织有一定的保护功能。表4 两种解酒药物酶活性实验结果对照表组别肝组织GPT活性U/L肝组织ADH活性U/mg血清XOD活性U/L空白组1285.3138.23A药组1953.5745.52B药组1302.4646.87对照组2002.4252.64四、项目经费使用情况 明细用途具体内容单价（元）数量总金额（元）用 途材料费（器件注明名称型号，可另附页）试验用小白鼠92101890动物实验组织、血清测试试剂盒169011690制作组织切片小鼠饲料2952590饲养小鼠实验耗材7001700动物实验枳椇子364144搭配药物葛根素762142搭配药物刺五加603180搭配药物丹参522104搭配药物远志1472294搭配药物蜂蜜46292搭配药物葛根49298搭配药物番茄红素72172搭配药物衡水老白干32264动物实验高效切片石蜡265130制作切片比色皿721型453135酶活性含量实验资料费（图书注明书名、出版社）打印论文1001100打印资料调研费（车票注明往返地）秦皇岛各大药房50150调研论文发表费（注明期刊及论文名称）审批加急3001300论文审批专利申请注册费其他费用材料打印1001100打印材料查阅资料1501150查阅资料通信1501150会议交流U盘55155存储数据合计 7230 元五、项目组成员参加项目的总结、体会、存在问题和建议（每个成员写一份） 项目负责人：这是我第一次作为一个项目负责人亲手来做一个项目。在老师的耐心指导、学长学姐的热情帮助以及小组成员的不懈努力下项目终于完成了。在这一年中我明白了脚踏实地、坚持不懈对于一个科研人员的重要意义。由于我们自身能力的限制在项目试验进行的过程中从最初实验的设计到进行动物实验再到得出实验结论，每一步进行的都很艰辛，每一步都凝聚着大家的汗水与泪水，每一个过程都是我们一步一步在摸索中前进的。但也正是这艰辛的历程给了我们更多学习与提高的机会，给了我们更多的经验与教训。1、凡事预则立不预则废在实验的整个过程中整体计划以及每阶段的具体计划是很重要的，它可以让我们清楚的确定我们在整个实验过程中所处的位置，更好的为下一阶段的工作做好准备。我们进行的动物实验工作量很大，尤其在利用试剂盒测酶的活性及含量实验中，由于实验用的药品都需在低温下保存，实验试剂现用现配，各种酶必须在尽量短的时间内处理好与药物混合并在水浴条件下反应一定时间后进行吸光度的测量。步骤多任务大，因此实验前必须安排好合理的分工，每一个细节的失误都可能导致整个实验的混乱。2、 遇到问题要理智解决在实验过程中遇到各种各样的问题是在所难免的，但我们遇到问题的时要根据掌握的知识理智的解决要有充足的依据而不能想当然的认为该怎么样。例如在配制溶液的过程中发现用注射器、量筒以及微量进样器所量取的1mL生理盐水的体积竟然不一样。微量进样器由于某些原因量取的量远少于注射器和量筒量取的量，我们不能因为微量进样器设备先进而不存在错误。3、加强与指导老师和组员之间的交流合作在做课题的过程中与指导教师的交流也是非常重要的，每当我们懒散时，老师总能给我们最耐心的督促；每当我们遇到困难时，老师总能给我们以最及时的帮助，我们从老师身上我们真的学会了很多东西。从开始的申请到开题、中期审查、结题老师的一丝不苟令我们受益匪浅。实验的顺利进行需要每个成员的交流与合作，在遇到问题时充分发表自己的看法，各抒己见有利于及时发现实验过程中的错误有利于发觉各种试验方法并进行比较从而选择最合理的方法进行试验。金无足赤，我们的实验虽已接近闻声，但还存在着一些问题：第一、由于小鼠醉酒醒酒状态的界定比较困难，小鼠之间存在个体差异实验结果误差较大。因此希望以后进行类似研究的人员可以尝试将实验动物改为两腿动物进行实验。第二、进行小鼠体内酶的活性和含量实验时由于未曾意料的因素导致部分实验结果没有测出。经历了就是人生财富。在收集财富同时为以后的项目更好的展开我们提出以下建议：首先，立项初期学校对有兴趣参加创新性实验的学生对实验的流程、注意事项做次比较详细的介绍，以使成员对实验有整体的认识。其次，学校定期组织全校项目组成员开展经验交流会。最后，希望学校可以适当报销某些没有开发票的收据。 签名: 年 月 日续上表团队成员1：在整个研究过程中，我们首先查阅资料，在查阅资料时，初步了解了进入数据库搜索资料的基本方法，能够迅速、准确并且大量地查到自己所需的资料。掌握了一定量的相关知识后，我们开始着手设计实验，从实验所需药品和仪器到实验的操作方法及步骤，我们都进行了详细计划。写实验计划的关键在于大家的彼此讨论，互相交流，在使实验计划不断得到改进的同时，我们各自所拥有的知识量也都快速增长。整个实验最重要的部分当然是实验的实施。实验操作之前，我们进行了明确的分工合作，有的负责购买药品，有的负责购买基本的实验器材，有的则负责实验室的清理准备工作。一切准备就绪，我们开始在一起讨论解酒药的配方，经过一系列的计算及统计，我们得到了两种配方。接着是熬药和提纯的过程，在这个过程当中我们遇到了一些困难，比如葛根的煎煮和药物提纯量的控制，但每当遇到问题时，我们便继续查阅资料、补充知识，共同商讨研究，解决难题。接着是小鼠的购进和饲养，饲养小鼠一段时间后，我们便开始了小鼠的药物实验。灌胃小鼠（分先酒后药、先药后酒和空白组）、观察小鼠醉酒和醒酒时间，在这个过程中，我不仅学会了灌胃的基本操作技能，还培养了认真观察并记录的细心和耐心。灌胃一周后，对小白鼠进行眼球取血和解剖。第一次解剖小白鼠对我来说是一个很大的挑战，但由于之前已经掌握了一些基本的实验操作技能和方法，因而能够顺利的完成这个任务。此后，我们共同使用试剂盒和分光光度计完成了酶活性的测定和组织切片的制作。做组织切片所需时间较长、步骤繁琐，而且每一步都很关键，所以整个过程都必须严格按照实验计划进行。这是实验的最后一步也是至关重要的一步。在经过一系列的观察和实验数据的统计后，我们终于圆满地完成了实验。 虽然实验最终得以圆满结束，但是其间遇到的一些问题不容忽视，如果我们在实验操作之前能够详尽的查阅多种资料就能避免许多中草药的不必要的浪费，在今后的实验当中我一定吸取教训，先提高自己的知识水平再着手实验。签名: 年 月 日续上表团队成员2：国家大学生创新性实验计划项目是本科学生个人或创新团队，在导师的指导下，自主选题设计、独立组织实施并进行信息分析处理和撰写总结报告等工作，以培养学生提出问题、分析和解决问题的兴趣和能力的项目。之所以想参加解酒实验饮料的研究是因为我觉得创新实验以项目为载体，能够调动学生学习的主动性、积极性和创造性，激发学生的创新思维和创新意识，掌握思考问题，解决问题的方法，提高创新能力和实践能力。 我个人比较喜欢生物制药这个专业而且参加创新实验的课题可以与课程学习有机结合。从申报成功到实验结束历经一年，我们项目组一直不断的努力，这一年为实验哭过、笑过，但经历之后我们感到的更多的是充实。我们项目小组已经做出了动物实验效果比较好的解酒保健药物的有效成分，但与预期的成果还有一定差距，这主要是由我们的知识水平和科研能力有限造成的。只凭对项目的热衷与肯干是不够的，做好一个课题还需要以丰富的专业知识作后盾。我会努力学习增长自己的知识水平同时我会更加积极的参与此类实验研究活动提高自己的实验能力。总的来说，我觉得能做出这样的结果我们都已经尽力了。虽然我们的实验留有些遗憾，但这次试验给我们学习的机会以及学到的知识是受益终身的。如果有机会我希望我可以继续参加科研创新这方面的实验。签名: 年 月 日续上表六、项目组对完成课题的自我评价 通过一年多的努力，我们完成了开题时的计划，做出了动物实验效果比较好的解酒保健药物的有效成分。并通过肝脏病理实验与酶活性和含量实验对解酒药物对肝脏的保护和解酒机理情况进行了研究。这次大学生创新性实验试验，使我们掌握了完成一个项目的具体过程，同时在项目实践过程中思考问题、解决问题的能力得到了提升，提高了我们的心理素质，懂得了团队合作的重要性，进一步提高了我们的综合素质。这些都将对我们以后的学习研究产生深远影响。不足之处：对解酒机理研究较少，通过实验我们认识到了自身理论与实践联系的能力还很差，在试验过程中没有形成良好的习惯。 项目负责人签名：年 月 日七、指导教师意见中草药复方解酒药物饮料的研究项目组全体成员踏实肯干，肯动脑筋，能按照预先设计顺利完成实验，数据来源真实可信。以小鼠为动物醉酒模型，筛选研制出解酒药物较优配方，并对其解酒防醉效果以及对肝脏的保护作用进行了分析，为解酒药物食品的开发提供了依据。完成食品研究与开发中文核心期刊论文中草药复方解酒药物饮料的研制及其功效研究1篇。准予结题。教师签名：年 月 日八、验收意见学院验收意见验收意见：（是否同意结题，结题者给出评定成绩：优秀、通过、不通过） 学院签章 年 月 日姓 名职称/职务学科领域验收小组职务专家签名组长成员成员成员成员学校验收意见验收意见：（是否同意结题，结题者给出评定成绩：优秀、通过、不通过）签章 年 月 日姓 名职称/职务学科领域验收小组职务专家签名组长成员成员成员成员附表一：项目原创性声明本人郑重声明：所呈交的项目结题申请书以及所完成的作品实物等相关成果，是本人和本团队队友独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本份结题材料中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，不侵犯任何第三方的知识产权或其他权利。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。项目成员签名： 日期： 年 月 日 项目指导教师审核签名：日期： 年 月 日附表二：燕山大学“大学生创新性实验计划”项目研究成果综述项目名称： 中草药复方解酒药物饮料的研究 项目负责人姓名： 武重阳 学院 环境与化学工程学院 年级 08级 专业 应用化学 项目参与成员姓名： 刘晓清 、 张瑞景 指导教师姓名： 韩增胜 职称 副教授 所在学院 环境与化学工程学院 成果形式：论文、设计、产品研制、软件开发、专利申请和调研报告等：论文、总结报告成果发表：1论文杂志名称 级别 时间 第几期 2专利申请类型 鉴定机构 授权时间 3产品研制和软件开发鉴定机构 鉴定时间 应用范围 撰写项目研究主要内容与创新成果综述1000-1500文字,附正式发表论文等成果复印件当前的解酒药物主要从两方面发挥作用:第一,用胃肠吸收抑制剂抑制酒精的胃肠吸收,加强酒精在肠胃道的首过效应,降低血液中的酒精浓度;第二,用代谢增强剂使药物直接作用于肝代谢酶系,提高肝内P-450酶、ADH和ALDH等酒精降解酶的活力,加速酒精及其代谢产物的消除速率,减轻其对组织和细胞的损害。但现实中的解酒药物的解酒功效主要集中于加强酒精在人体内的代谢方面，对两种解酒机理的综合解酒效果研究较少。本实验项目针对目前解酒药物主要在加速酒精在体内的代谢方面发挥作用，而对两种解酒机理的综合解酒效果研究较少这一问题，创造性的将代谢增强剂以及发挥加强首过效应的药物结合起来，从两方面发挥解酒作用。因此我们项目组在前人研究的基础之上选取了发挥加强首过效应的刺五加、远志以及发挥代谢增强剂作用的葛根、枳椇子作为主要原料辅以VB、蜂蜜等材料，经有效成分经提取浓缩后，按比例进行搭配，研制出复合型解酒保健药物，并对其效果通过实验进行研究。在进行动物实验过程中我们首先进行小鼠的