高考生物总复习 第三章第1节 酶的制备及活力测定课件 中图版选修1.ppt

第三章酶的制备及应用 第三章酶的制备及应用 第1节酶的制备及活力测定 学习导航1 研究酶的存在及提取方法 重点 2 尝试利用酶活力测定的一般原理和方法 难点 一 酶的存在及影响因素1 合成场所 在生物体活细胞中合成 2 反应部位 多数在 直接参与生物化学反应 少数在 发挥作用 3 影响因素 等多种环境条件都可能影响酶的 导致酶变性 直至丧失活力 细胞内 细胞外 温度 酸碱性 空间结构 判一判 1 人体内 参与物质分解的酶都可以在分泌物中提取 2 高温 低温 过酸和过碱等环境条件都能改变酶的空间结构 导致酶变性失活 3 新采摘的甜玉米放在沸水中浸泡后 可使甜味保持的时间长些 4 萨姆纳第一次证明了脲酶是蛋白质 二 酶的活力及测定方法1 酶的活力 以单位时间内 或者在单位时间内 来表示 2 酶活力的测定 1 方法 利用 进行比色 底物的消耗量 产物的生成量 分光光度法 2 实例 植物淀粉酶的制备及活力测定 使酶失活 钝化酶的活性使反应终止 3 5 二硝基水杨酸试剂 煮沸 黄褐色 520m 想一想进行酶活力测定时 出现了 恒温处理 沸水加热 钝化处理 是否矛盾 各有什么目的呢 提示 不矛盾 恒温处理是为酶促反应提供必要的温度条件 与之形成对照的是经沸水浴加热变性失活的酶液 而钝化处理是使反应后的酶失活 使反应终止 过氧化氢酶粗酶液的制备及活力测定a 制备过氧化氢酶粗酶液以新鲜动物肝脏 马铃薯块茎或萝卜块根为材料 经过切碎 研磨 取 即可得到过氧化氢酶粗酶液 离心 上清液 b 分光光度法测定过氧化氢酶的活力在过氧化氢酶存在时 过氧化氢将 氧化生成 色产物 待酶反应终止后 过滤 取滤液适当稀释 在波长 nm处测吸光值 计算出过氧化氢酶的活力 愈创木酚 茶褐 470 c 高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力过氧化氢酶可以催化h2o2分解为水和氧 如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液 经酶促反应后 在酸性条件下 用标准高锰酸钾溶液滴定多余的 反应如下 5h2o2 2kmno4 4h2so4 5o2 2khso4 8h2o 2mnso4 h2o2 h2o2的量 要点一粗酶液的制取1 胞内酶 绝大多数酶 如呼吸酶 淀粉酶 过氧化氢酶等 用破碎仪 研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎 然后过滤 离心 2 胞外酶 消化酶等 直接从动物分泌物或组织间隙中提取 h2o2酶粗酶液的制备过程中叙述错误的是 a 以新鲜动物肝脏 马铃薯块茎或萝卜块根为材料b 材料需要破碎 过滤和离心处理c 取上清液即可得到粗酶液d 粗酶液需要钝化处理保存 解析 h2o2酶分布于很多组织细胞中 可有效地去除h2o2的危害 它属于细胞内的酶 所以要进行破碎或研磨 然后过滤 离心 但钝化处理是使酶失去活性的方法 不是保存方法 答案 d 互动探究 1 如果换成胰蛋白酶的制备 具体方法又是怎样 2 从哪些方面考虑酶液的保存 提示 1 细胞外的酶可直接从分泌物中提取 2 酶液保存应考虑影响酶活性的因素 如低温 适宜ph等条件 要点二影响酶活力的因素1 温度酶活力随温度的变化而变化的趋势可用图示表示 1 温度从t1到t时 随着温度的升高 酶活力逐渐增强 2 温度从t到t2时 随着温度的升高 酶活力逐渐降低 3 温度高于t2时 酶活力全部丧失 4 t3 t4条件下 酶活力相同 5 t为最适温度 即在该温度时 酶的活力最强 2 ph每种酶都有一定的最适ph范围 例如 过氧化氢酶最适ph范围为6 8 7 3 过酸 过碱都会使酶发生不可逆失活 3 酶的激活剂有时加入酶的激活剂可以提高酶活力 4 酶的抑制剂加入酶的抑制剂后可以降低酶活力 甚至使酶失去活力 特别提醒酶活力的高低受温度 ph 激活剂等多种因素的影响 所以酶的提取一般选择在低温和适合的ph下进行 有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力 胰蛋白酶作用于一定量的某种物质 底物 温度保持在37 ph保持在最适值 生成物量与反应时间的关系如图所示 请回答下列问题 1 该酶作用的底物是 2 在140min后 曲线变成水平 这是因为 3 若增加胰蛋白酶浓度 其他条件不变 请在原来图上画出生成物量变化的示意曲线 4 若胰蛋白酶浓度和其他条件不变 反应液ph由2逐渐升高到10 则酶催化反应的速度将 原因是 5 如图中能正确表示胰蛋白酶对底物的分解速度和温度关系的是 解析 酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化合物反应 蛋白酶只能催化蛋白质水解 随着反应时间的推移 反应底物逐渐耗尽 生成物量不再增加 催化性是指酶只能改变反应速度 不改变反应结果 故画坐标曲线时 反应速度加快 时间缩短 最终生成物量不变 受ph影响 酶在强酸或强碱环境中会因结构改变而失活 所以反应速度不变 因为在ph为2时酶已变性失活 受温度影响 低温影响酶活性 但不使其变性失活 随温度升高 反应速度加快 超过最适温度 酶活性随温度升高而下降 本题侧重于考查胰蛋白酶的最适温度为37 答案 1 蛋白质 2 底物量一定 底物已被耗尽 3 如图 4 不变在ph 2时酶已失活 5 c a 在b点之前 淀粉酶的活性和温度成正比 之后 成反比b 当温度到达b 点时 淀粉酶的活性最高c a点时 淀粉酶的活性很低 但随着温度升高 淀粉酶的活性可以上升d c点时 淀粉酶的活性很低 当温度降低时 酶的活性也可以恢复上升 解析 选d 从题图中可以看出随着温度的不断升高 淀粉酶的活性上升 在b点时 酶的活性达到最