丙环唑对玉米幼苗生长的调控及其相关机制

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2017 43 11 1603 1610 http zwxb chinacrops org ISSN 0496 3490 CODEN TSHPA9 E mail xbzw 本研究由引进国际先进农业科学技术计划 948 计划 项目 2011 G19 资助 This study was supported by the Introduction of International Advanced Agricultural Science and Technology Program 948 Program 2011 G19 通讯作者 Corresponding author 张明才 E mail zmc1214 Tel 010 62733049 第一作者联系方式 E mail hao ling2011 Received 收稿日期 2017 03 07 Accepted 接受日期 2017 05 10 Published online 网络出版日期 2017 06 09 URL DOI 10 3724 SP J 1006 2017 01603 丙环唑对玉米幼苗生长的调控及其相关机制 郝 岭 邢嘉鹏 段留生 张明才 李召虎 植物生长调节剂教育部工程研究中心 中国农业大学农学与生物技术学院农学系 北京 100193 摘 要 丙环唑 propiconazole 简称 Pcz 作为一种杀菌剂被广泛应用于作物生产 它同时具有调节作物生长发育的作 用 但关于丙环唑在玉米上的应用研究较少 本研究以玉米品种郑单 958 为材料 研究丙环唑 Pcz 对玉米苗期植株生 长 细胞形态和激素信号的影响 结果表明 Pcz 处理显著抑制玉米中胚轴与胚芽鞘的生长 降低株高 缩短叶片和叶 鞘长度 减小叶夹角 同时显著抑制叶片和叶鞘细胞的纵向伸长 促使叶枕细胞排列由疏松变为紧密 Pcz 处理显著降 低玉米中赤霉素 GA1和GA3 的含量 下调GA合成酶基因GA3ox1基因的表达 上调GA钝化酶基因GA2ox5和GA2ox8 表达 而 GA 合成酶基因 GA20ox1 的表达呈现先上调后下调模式 Pcz 处理显著降低油菜素内酯 BR 含量 但 BR 合成 基因 CPD 和 DWF4 的表达上调 可能是由于反馈调节 此外 Pcz 处理下调扩张蛋白基因 EXPA4 EXPA5 和木葡聚糖 内糖基转移酶 水解酶基因 XTH1 XET1 的表达 综上所述 Pcz 处理调节 GA 和 BR 信号转导途径 抑制 GA 和 BR 在 植株内积累 调控扩张蛋白 木葡聚糖内糖基转移酶 水解酶基因表达 操纵细胞生长 有效调控株型 关键词 玉米 丙环唑 油菜素内酯 株型 细胞形态 Growth Regulation and the Mechanism of Propiconazole in Maize Seedlings HAO Ling XING Jia Peng DUAN Liu Sheng ZHANG Ming Cai and LI Zhao Hu Engineering Research Center of Plant Growth Regulator Ministry of Education Department of Agronomy College of Agronomy and Biotechnology China Agricultural University Beijing 100193 China Abstract Propiconazole Pcz has been widely used as fungistat in crop production Meanwhile Pcz can be used as plant growth regulator to influence plant growth There is less study on the application of Pcz in maize The present experiment using maize variety Zhengdan 958 was conducted to study the effect of Pcz on maize seedling growth cell morphology and hormone signal Pcz treatment inhibited the growth of mesocotyl and coleoptile reduced plant height shortened the length of sheath and leaf and decreased leaf angle significantly At the same time longitudinal growth of sheath and leaf was inhibited and the shape of pulvinus cells changed from loosened rectangle type or oval type to closely spaced spindle cell Furthermore the GA GA1 and GA3 content was reduced significantly and the expression of GA biosynthesis gene GA3ox1 was down regulated the expression of GA2ox5 and GA2ox8 genes involved in GA inactivation was up regulated and the expression of GA biosynthesis gene GA20ox1 was up regulated at the beginning and down regulated later the BR content was reduced significantly and the expres sion of BR biosynthesis genes CPD and DWF4 was up regulated which might be feedback regulated by endogenous BR levels In addition the expression of expansin genes EXPA4 EXPA5 and xyloglucan endotransglucosylase hydrolase genes XTH1 and XET1 was down regulated In conclusion Pcz treatment can adjust the signal transduction of GA and BR inhibit the accumulation of GA and BR regulate the expression of EXPs and XTHs control the cell growth and adjust plant type of maize effectively Keywords Maize Propiconazole Brassinosteroids Phenotype Cellular morphology 玉米 Zea mays L 作为我国主要的粮食作物 对 确保我国的粮食安全有着至关重要的作用 目前 提 高玉米产量主要是通过培育良种和改进栽培措施 1 大量研究表明 群体密度的增加有利于提高玉米产 量 然而密度增大会降低玉米抗倒伏的能力 2 3 化 控技术是栽培措施中很重要的一项 有利于改善株 1604 作 物 学 报 第 43 卷 型和构建理想群体 为玉米的高产稳产提供保障 4 如冠菌素作为一种玉米延缓剂 既能延缓节间伸长 生长 又能增加产量 5 氮肥和己 乙水剂的配合使 用 可改善株型和群体结构 提高春玉米的产量 6 乙烯利可塑造凹形冠层结构 提高群体的光合利用 率 从而提高玉米产量 7 乙烯利使玉米基部节间 缩短增粗 有助于提高玉米的抗倒伏能力等 8 在农业上 三唑类化合物不仅可被用作杀菌剂 和除草剂 而且可以用作植物生长调节剂 调节植 物的生长 如多效唑有利于提高油菜田块的抗倒伏 与抗裂角能力 从而提高产量 9 在小麦上 多效 唑提高了茎秆木质素合成相关酶的活性和木质素 含量 进而增强了茎秆抗倒伏能力 10 烯效唑可以 缩短水稻基部节间长度 增加节间粗度 增强水稻 抗倒伏能力 11 烯效唑拌种能改善茎秆质量 提高 茎秆的抗倒性 增加产量 12 丙环唑 propiconazole 简称 Pcz 是一种三唑类复合物 化学名称为 1 2 2 4 二氯苯基 4 丙基 1 3 二氧戊环 2 甲基 1 氢 1 2 4 三唑 在生产中 丙环唑被广泛用作杀菌剂 13 另外 丙环唑可以用作植物生长调节剂 调控植物 的生长 作用位点是钝叶醇 14R 脱甲基酶 14 但 是 关于丙环唑调节玉米生长的研究比较少 本研 究对丙环唑调控玉米幼苗形态的机制做了初步的 探讨 旨在为丙环唑在玉米栽培上的合理使用提 供参考 1 材料与方法 1 1 试验材料 供试玉米品种为郑单958 RNA 提取试剂购买 于华越洋生物科技有限公司 M MLV 反转录试剂盒 购买于北京天根生化科技有限公司 荧光定量试剂 购买于宝生物工程大连有限公司 TaKaRa 丙环唑和 石蜡购买于西格玛奥德里奇 上海 贸易有限公司 Sigma Aldrich 试验中所用其他试剂均为进口或国 产分析纯试剂 1 2 试验设计 于恒温培养箱中进行沙培试验 设4个Pcz浓度 0 1 0 5 0 和 10 0 mol L 1 其中 0 mol L 1为对 照 每个处理 3 个重复 完全随机排列 每个重复选 饱满一致种子 40 粒 用 10 NaClO 消毒 在相应浓 度 Pcz 溶液中室温浸种 12 h 之后 播于含 300 mL 相应浓度 Pcz 溶液的蛭石中 保持相对含水量约为 80 25 黑暗培养 7 d 测定幼苗中胚轴和胚芽 鞘的长度 于中国农业大学人工气候室中进行水培试验 设置 4 个 Pcz 浓度 0 0 2 1 0 和 5 0 mol L 1 其中 0 mol L 1为对照 每处理 4 个重复 利用石英育苗 至一叶一心 挑选生长一致的幼苗移至霍格兰营养 液中 2 d 后 移入含有不同浓度 Pcz 的霍格兰营养 液中培养 所有处理和重复完全随机排列 培养条 件为光 24 暗 18 各 12 h 室内相对湿度 50 60 光照强度 400 mol m 2 s 1 3 d 后取样 观察 照相记录表型 测定株高 根长 叶鞘长和 生物量等指标 1 3 RNA 的提取和 Real time PCR 分析 Pcz 处理 3 h 12 h 24 h 和 72 h 取样 选取玉 米第 2 叶鞘下部 长度约为 3 cm 将样品立即置于 液氮中冷冻 并保存于 80 冰箱 采用华越洋生物 公司的植物总 RNA 提取试剂盒提取玉米的总 RNA 反转录成 cDNA 使用 TaKaRa 的 Real time PCR SYBR 试剂盒 荧光定量 PCR 仪 ABI7500 进行 Real time PCR 以 ZmACTIN 为内参 测定相关基因 的表达 表 1 15 L 反应体系含 2 SYBR Premix Ex Taq 7 5 L 50 ROX Reference Dye II 0 3 L 正向 引物和反向引物 10 mol L 1 各 0 3 L cDNA 模板 40 ng L 1 1 5 L ddH2O 5 1 L 采用两步法反应 程序 95 5 min 95 10 s 60 34 s 40 个循环 根据各样品特定的荧光阈值下的 Ct 值 采用 2 Ct 法计算基因在不同样品中的相对表达量 1 4 石蜡切片 Pcz 处理后 7 d 取第 2 叶的叶片 叶鞘和叶枕 中部 长度为 3 4 mm 制作石蜡切片 将上述样品 立即用含 70 酒精的 FAA 固定液固定 抽真空 10 20 min 固定 24 h 用酒精梯度脱水 浸蜡包埋 后 将修整好的蜡块置于石蜡切片机切片 轮转式 切片机型号为 Leica RM2235 厚度为 10 m 展片 后经梯度二甲苯和酒精脱蜡 用番红 固绿染色 加 拿大树胶封片 Olympus 彩色 CCD 光学显微镜观察 和照相 1 5 玉米样品中内源激素含量的测定 Pcz 处理 3 d 取样 称取每份样品 0 2 g 3 个重 复 用 3 mL 样品提取液研磨和提取 离心 取上清 液 用氮气吹干 用酶联免疫法测定 15 1 6 数据处理 采用 Microsoft Excel 2010 和 SPSS 18 0 软件处 理数据和统计分析 第11期 郝 岭等 丙环唑对玉米幼苗生长的调控及其相关机制 1605 表 1 qRT PCR 引物 Table 1 Primers used for qRT PCR 引物名称 Primer name 正向引物 Forward primer 5 3 反向引物 Reverse primer 5 3 ZmACTIN GATTCCTGGGATTGCCGAT TCTGCTGCTGAAAAGTGCTGAG ZmDWF4 TGGAGGACAGGCTTGAGAAG GCAAGAGGTCCAGGATCTGT ZmCPD GGTCTTCACTGCCGTTCATC TTAGCGAGCTCTGATCCTGG ZmGA20ox1 GCGCTACTGCTCTGAGATGA CACGGCGGGTAGTAGTTGAG ZmGA3ox1 GACTAGCCGATTGCAAAAGC TAGCTGCGGAACGGAATTAG ZmGA2ox5 GAGAGGTGTGGGTTCAGGTG CGAGCTTGCAATTACCCTGT ZmGA2ox8 GCGGGTGCACTAGACTACG GCATGGACCAGGGAGCAG ZmEXPA4 GTGCCGTGCCGCAAGTCC GCTGGCCGCCTTGACGCT ZmEXPA5 GCGCGTGATGATCGAGTG AACGTCTAGGCGGGTGCTA ZmXTH1 AAATTCAACACGGACGGCAC CTGCTCCTTGGAGTTGAAGC ZmXET1 GCTGAGAGACGAACTGAAGC GCCAGAATCAACGCCTTCAT 2 结果与分析 2 1 Pcz 对玉米幼苗植株生长的调控 从图 1 看出 黑暗条件下 用不同浓度的 Pcz 处 理玉米 7 d 与对照相比 玉米幼苗中胚轴的长度分 别减小了 12 23 和 29 胚芽鞘的长度分别减小 了 22 36 和 39 由此可知 Pcz 处理显著地抑 制了中胚轴和胚芽鞘的生长 且随着 Pcz 浓度的增 大抑制程度加强 图 1 Pcz 对玉米幼苗中胚轴和胚芽鞘生长的影响 Fig 1 Effects of Pcz on mesocotyl and coleoptile of maize seedlings 图中所示数据为 3 个独立重复的平均值和标准差 P 0 05 Bars show averages and standard deviations from three independent samples P 0 05 从图 2 和表 2可见 水培条件下 用不同浓度的 Pcz 处理 3 d 与对照相比 玉米幼苗的生长受到了 显著的影响 地上部生物量减少 株高降低 叶片 和叶鞘的长度变短 叶片卷曲 叶夹角变小 根的生 长也受到了一定程度的抑制 其中 5 mol L 1 Pcz 对 根的抑制达到了显著水平 2 2 Pcz 对玉米幼苗 GA 和 BR 的含量及其相关 基因表达的调控 从图 3 可看出 Pcz 处理玉米幼苗叶鞘中 GA 和 BR含量与对照相比分别下降 30 和 80 差异达到 显著水平 从图 4 可看出 Pcz 处理下 GA 合成酶基 因 GA20ox1 和 GA3ox1 的表达模式不同 GA20ox1 在 处理 24 h 表达上调 72 h 表达下调 而 GA3ox1 在处 图 2 Pcz 对玉米幼苗生长的影响 Fig 2 Effects of Pcz on growth of maize seedlings 1606 作 物 学 报 第 43 卷 表 2 Pcz 对玉米幼苗株高 根长和干物质积累的影响 Table 2 Effects of Pcz on plant height root length and dry matter accumulation of maize seedlings 处理 Treatment mol L 1 株高 Plant height cm 根长 Root length cm 叶鞘 Sheath cm 地上部干重 Dry weight of shoot g 根干重 Dry weight of root g 0 36 1 0 8 30 2 2 2 8 9 0 6 0 29 0 04 0 11 0 02 0 2 33 1 0 8 32 4 2 3 7 1 0 6 0 25 0 04 0 10 0 02 1 0 30 6 1 6 31 5 1 9 6 5 0 2 0 25 0 04 0 10 0 02 5 0 25 4 1 1 25 9 1 5 6 2 0 4 0 19 0 03 0 08 0 02 表示在 0 05 水平下显著 Significant difference at the 0 05 probability level 图 3 Pcz 对玉米幼苗叶鞘中 GA 和 BR 含量的影响 Fig 3 Effects of Pcz on the content of GA and BR in sheath of maize seedlings 图中所示数据为 3 个独立重复的平均值和标准差 P 0 05 Bars show averages and standard deviations from three independent samples P 0 05 图 4 Pcz 对玉米幼苗叶鞘中 GA 和 BR 代谢相关基因表达的调控 Fig 4 Regulation of Pcz on the expression of GA and BR metabolism genes in sheath of maize seedlings 从玉米叶鞘中提取总 RNA 进行 RT qPCR 分析 图中所示数据为 3 个重复的平均值和标准差 P 0 05 Total RNA were extracted from the sheath of maize seedlings analyzed by RT qPCR Bars show averages and standard deviations from three independent samples P 0 05 第11期 郝 岭等 丙环唑对玉米幼苗生长的调控及其相关机制 1607 理过程中 表达水平一直显著低于对照 GA 钝化酶 基因 GA2ox5 和 GA2ox8 在处理 24 h 表达上调 加速 GA 的代谢 72 h 表达回调 然而 BR 合成酶基因 CPD 和 DWF4 的表达与对照相比 有上调的趋势 2 3 Pcz 处理对玉米叶片各组织细胞显微结构的 影响 从玉米幼苗叶片的纵切面看出 图 5 a 与对照 相比 Pcz 处理下叶片表皮细胞纵向伸长受阻 引起 叶片长度变短 从玉米幼苗叶鞘的纵切面看出 图 5 b 与对照相比 Pcz 处理细胞轴向生长受到了抑 制 引起叶鞘变短 从玉米幼苗叶枕的纵切面看出 图 5 c 对照叶枕细胞排列较为松散 但 Pcz 处理 叶枕细胞排列紧密 且细胞显著变小 这导致了叶 夹角变小 图 5 Pcz 对玉米幼苗叶片不同组织中细胞显微结构的影响 Fig 5 Effects of Pcz on cellular microstructures of leaf different tissues of maize seedlings a 叶片的纵切面 b 叶鞘的纵切面 c 叶枕的纵切面 Bar 100 m a Leaf blade longitudinal sections b Leaf sheath transverse sections c Pulvinus transverse sections Bar 100 m 2 4 Pcz 处理对叶鞘扩展蛋白与木葡聚糖内糖基 转移酶基因表达的调控 从图 6 可看出 与对照相比 Pcz 处理扩张蛋白 基因EXPA4的表达3 h下调40 左右 24 h表达回调 EXPA5 的表达在 12 h 和 24 h 下调 50 左右 72 h 表 达回调 与对照相比 Pcz 处理后 木葡聚糖内糖基转 移酶 XTHs 家族的 XTH1 和 XET1 基因的表达一直处 于被抑制的状态 特别是XET1基因下降了5倍左右 3 讨论 利用丙环唑处理玉米不仅可以降低株高 而且 使叶夹角变小 玉米株型更加紧凑 图 2 石蜡切片 结果表明 丙环唑处理抑制了叶片和叶鞘细胞的纵 向伸长 缩短了叶片和叶鞘长度 而叶枕细胞变小且 排列紧密 引起了叶夹角变小 图 5 这与 BR 合成和 信号途径关键基因缺失的突变体表型类似 16 17 定量 分析发现 丙环唑处理显著降低了玉米中 BR 的含 量 但 BR 合成的关键酶基因 CPD 和 DWF4 的表达 上调 图 3 和图 4 这可能是由于 BR 合成限速酶的 表达受到了反馈调节 18 前人研究发现 丙环唑处 理抑制十字花科植物和玉米幼苗的生长 且抑制效 果可以被 BR 特异性恢复 19 20 通过本研究 也说明丙 环唑通过影响 BR 合成进而实现对玉米株型的调控 细胞伸长的过程受到细胞壁松弛因子的调节 扩张蛋白和木葡聚糖内糖基转移酶 水解酶是两大 类重要的细胞壁松弛因子 在调控细胞生长方面发 挥了重要的作用 21 22 众多研究表明 GA 诱导扩张 蛋白和木葡聚糖内糖基转移酶 水解酶基因的表达 活性 调控细胞壁的延伸 如在高羊茅草中 GA 调 控扩张蛋白基因 EXPA4 EXPA5 EXPA6 EXPA8 和 XTHs 家族的 XET1 XET3 基因的表达 促进叶片 细胞的生长 23 在棉花中 GA 调控扩张蛋白和木葡 聚糖内糖基转移酶 水解酶基因的表达 促进棉花纤 维的生长 24 在水稻的生长发育过程中 GA 调控扩 1608 作 物 学 报 第 43 卷 图 6 Pcz 对玉米叶鞘中 EXPA4 EXPA5 XTH1 和 XET1 基因表达的调控 Fig 6 Regulation of Pcz on expression levels of EXPA4 EXPA5 XTH1 and XET1 in sheath of maize seedlings 从玉米叶鞘中提取总 RNA 进行 RT qPCR 分析 图中所示数据为 3 个重复的平均值和标准差 P 0 05 Total RNA were extracted from the sheath of maize seedlings analyzed by RT qPCR Bars show averages and standard deviations from three independent samples P 15 000 kg hm 2 及其产量构成因子 的影响 中国农业科学 2012 45 3437 3445 Wang K Wang K R Wang Y H Zhao J Zhao R L Wang X M Li J Liang M X Li S K Effects of density on maize yield and 第11期 郝 岭等 丙环唑对玉米幼苗生长的调控及其相关机制 1609 yield components Sci Agric Sin 2012 45 3437 3445 in Chi nese with English abstract 4 李宁 李建民 翟志席 李召虎 段留生 化控技术对玉米植 株抗倒伏性状 农艺性状及产量的影响 玉米科学 2010 18 6 38 42 Li N Li J M Zhai Z X Li Z H Duan L S Effects of chemical regulator on the lodging resistance traits agricultural characters and yield of maize J Maize Sci 2010 40 6 38 42 in Chinese with English abstract 5 卫晓轶 张明才 李召虎 段留生 冠菌素对玉米节间伸长和 产量性状的影响 科技导报 2011 29 20 63 67 Wei X Y Zhang M C Li Z H Duan L S Effect of coronatine on internode elongation and yield characters of maize Sci Technol Rev 2011 29 20 63 67 in Chinese with English abstract 6 张倩 张明才 刘明 谭伟明 肖佳雷 来永才 李召虎 段留 生 氮肥 生长调节剂对寒地春玉米植株形态及产量的互作效 应研究 中国农业大学学报 2014 19 5 29 37 Zhang Q Zhang M C Liu M Tan W M Xiao J L Lai Y C Li Z H Duan L S Interaction of nitrogen fertilizer and plant growth regular on plant morphology and yield in spring maize of cold region J Chin Agric Univ 2014 19 5 29 37 in Chinese with English abstract 7 蔡永旺 张英华 周顺利 鲁来清 王志敏 利用乙烯利塑造 夏玉米凹形冠层对产量及其相关性状的影响 玉米科学 2010 18 3 90 94 Cai Y W Zhang Y H Zhou S L Lu L Q Wang Z M Effects of concave canopy structure shaped with ethephon on yield and its correlated characters in summer maize J Maize Sci 2010 18 3 90 94 in Chinese with English abstract 8 叶德练 王庆燕 张钰石 李建民 段留生 张明才 李召虎 乙烯利和氮肥对玉米基部节间性状和抗折断力的调控研究 中国农业大学学报 2015 20 6 1 8 Ye D L Wang Q Y Zhang Y S Li J M Duan L S Zhang M C Li Z H Study of ethephon and nitrogen rate in regulating the basal internode characteristics and breaking resistance of maize J Chin Agric Univ 2015 20 6 1 8 in Chinese with English abstract 9 杨阳 蒯婕 吴莲蓉 刘婷婷 孙盈盈 左青松 周广生 吴江 生 多效唑处理对直播油菜机械收获相关性状及产量的影响 作物学报 2015 41 938 945 Yang Y Kuai J Wu L R Liu T T Sun Y Y Zuo Q S Zhou G S Wu J S Effects of paclobutrazol on yield and mechanical harvest characteristics of winter rapeseed with direct seeding treatment Acta Agron Sin 2015 41 938 945 in Chinese with English abstract 10 陈晓光 石玉华 王成雨 尹燕枰 宁堂原 史春余 李勇 王 振林 氮肥和多效唑对小麦茎秆木质素合成的影响及其与抗 倒伏性的关系 中国农业科学 2011 44 3529 3536 Chen X G Shi Y H Wang C Y Yin Y P Ning T Y Shi C Y Li Y Wang Z L Effects of nitrogen and PP333 application on the lignin synthesis of stem in relation to lodging resistance of wheat Sci Agric Sin 2011 44 3529 3536 in Chinese with English abstract 11 张倩 张海燕 谭伟明 段留生 30 矮壮素 烯效唑微乳剂对 水稻抗倒伏性状及产量的影响 农药学学报 2011 13 144 148 Zhang Q Zhang H Y Tan W M Duan L S Effects of 30 chlormequat uniconazole micro emulsion on lodging resistance and yield of rice Chin J Pest Sci 2011 13 144 148 in Chinese with English abstract 12 刘星贝 汪灿 胡丹 杨浩 佘恒志 阮仁武 吴东倩 易泽林 烯效唑干拌种对甜荞茎秆抗倒性能的影响 作物学报 2016 42 93 103 Liu X B Wang C Hu D Yang H She H Z Ruan R W Wu D Q Yi Z L Effects of seed dressing with uniconazole powder on lodging resistance of culm in common buckwheat Acta Agron Sin 2016 42 93 103 in Chinese with English abstract 13 Yoshida Y Aoyama Y Sterol 14 demethylase and its inhibition structural considerations on interaction of azole antifungal agents with lanosterol 14 demethylase P 45014DM of yeast Biochem Soc Trans 1991 19 778 782 14 Raymond S B David T C Geoffre A C Inhibitors of sterol bio synthesis and growth in plants and fungi Phytochemistry 1989 28 1791 1804 15 唐尚格 夏玉先 裴炎 间接酶联免疫法测定植物内源激素 西南农业大学学报 1991 13 183 186 Tang S G Xia Y X Pei Y Quantitative analysis of plant hor mones with indirect enzyme linked immunosorent assay ELISA J Southwest Agric Univ 1991 13 183 186 in Chinese with English abstract 16 Liu T Zhang J Wang M Y Wang Z Y Li G F Qu L Wang G Y Expression and functional analysis of ZmDWF4 an ortholog of Arabidopsis DWF4 from maize Zea mays L Plant Cell Rep 2007 26 2091 2099 17 Kir G Ye H Nelissen H Neelakandan A K Kusnandar A S Luo A D Inz D Sylvester A W Yin Y H Becraft P W RNA inter ference knockdown of BRASSINOSTEROID INSENSITIVE1 in maize reveals novel functions for brassinosteroid signaling in controlling plant architecture Plant Physiol 2015 169 826 839 18 Kim H B Kwon M Ryu H Fujioka S Takatsuto S Yoshida S An C S Lee I Hwang I Choe S The regulation of DWARF4 ex pression is likely a critical mechanism in maintaining the homeo stasis of bioactive brassinosteroids in Arabidopsis Plant Physiol 2006 140 548 557 19 Sekimata K Han S Y Yoneyama K Takeuchi Y Yoshida S Asami T A specific and potent inhibitor of brassinosteroid bio synthesis possessing a dioxolane ring J Agric Food Chem 2002 50 3486 3490 20 Hartwig T Corvalan C Best N B Budka J S Zhu J Y Choe S Schulz B Propiconazole is a specific and accessible brassinoster oid BR biosynthesis inhibitor for Arabidopsis and maize PLoS One 2012 7 5 e36625 21 Cosgrove D J Plant expansins diversity and interactions with plant cell walls Curr Opin Plant Biol 2015 25 162 172 22 Rose J K Braam J Fry S C Nishitani K The XTH family of en zymes involved in xyloglucan endotransglucosylation and endo hydrolysis current perspectives and a new unifying nomenclature Plant Cell Physiol 2002 43 1421 1435 23 Xu Q Burgess P Xu J Meyer W Huang B Osmotic stress and salt stress inhibition and gibberellin mitigation of leaf elongation associated with up regulation of genes controlling cell expansion Environ Exp Bot 2016 131 101 109 24 Li Y Tu L Ye Z X Wang M J Gao W H Zhang X L A cotton 1610 作 物 学 报 第 43 卷 fiber preferenti