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移液器的使用方法 彭佩钦2011 07 21 移液器介绍移液器的种类和原理移液器的使用方法错误的操作方法移液器的注意事项移液器的保养和维护 一 移液器介绍 微量加样器 移液器 最早出现于1956年 由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明 其后 在1958年德国Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器 成为世界上第一家生产微量加样器的公司 微量加样器的物理学原理有下面两种 使用空气垫 又称活塞冲程 加样 使用无空气垫的活塞正移动 外置活塞 加样 上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围 二 移液器的种类和原理 1 空气垫加样器 活塞冲程 空气垫 加样器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液 在活塞推动下 排出部分空气 利用大气压吸入液体 再由活塞推动空气排出液体 这种加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样 加样体积的范围在小于1ul至l0ml之间 空气垫加样器最大的不足之处就是容易受温度 气压和空气湿度的影响 使加样的准确度降低 2 外置活塞加样器这种移液器是采用外置式活塞 活塞设计在吸头内部 直接与液体接触 适用于粘度比较大或者产生气泡的液体的操作 活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同 其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞 这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产 不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头 3 多通道加样器 电子加样器和分配器多通道加样器 电子加样器和分配器的原理与上述相同 多通道加样器通常为8通道或12通道 与8X12 96孔微孔板一致 多通道加样器的使用不但可减少实验操作人员的加样操作次数 而且可提高加样的精密度 电子加样器和分配器为半自动加样系统 电子加样器最大的优点是其具有很高的加样重复性 应用范围广 三 移液器的使用方法 一个完整的移液循环 枪头安装容量设定预洗吸头吸液放液卸去吸头 1 枪头安装 正确的安装方法叫旋转安装法 具体方法是 把移液器顶端插入枪头 无论是散装枪头还是盒装枪头都一样 在轻轻用力下压的同时 左右微微转动 上紧即可 切记用力不能过猛 更不能采取剁枪头的方法来进行安装 因为这样会导致移液枪的内部配件 如弹簧 因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散 甚至会导致刻度调节旋钮卡住 严重情况下会将白套筒折断 多道移液器装配枪头时 将移液器的第一道对准第一个吸头 倾斜插入 前后稍许摇动上紧 吸头插入后略超过O型环即可 2 移液体积设定 正确的体积设定分为两个步骤 粗调 通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值 细调 当体积值接近自己的预想值之后 应将移液器横置 水平放至自己的眼前 通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值 从而避免视觉误差所造成的影响 从大体积调节至小体积时 为正常调节法 调节到刚好就行 从小体积调节至大体积时 就需要先调节超过设定体积的刻度 再回调至设定体积 可保证最佳的精确度 这是由于计数器里面有一定的空隙 需要弥补 3 预洗枪头 在我们安装了新的枪头或增加了容量值以后 应该把需要转移的液体吸取 排放两到三次 这样做是为了让枪头内壁形成一道同质液膜 确保移液工作的精度和准度 使整个移液过程具有极高的重现性 在吸取有机溶剂或高挥发液体时 挥发性气体会在白套筒室内形成负压 从来产生漏液的情况 这时需要我们预洗四到六次 让白套筒室内的气体达到饱和 负压就会自动消失 粘稠液体可以通过枪头预润湿的方式来达到精确移液 先吸入样液 打出 枪头内壁会吸附一层液体 使表面吸附达到饱和 然后再吸入样液 最后打出液体的体积会很精确 4 吸液 先将移液器排放按钮按至第一停点 再将枪头垂直浸入液面 浸入的深度为 P2 P10小于或等于1毫米 P20 P100 P200小于或等于2毫米 P1000小于或等于3毫米 P5ML P10ML小于或等于4毫米 侵入过深的话 液压会对洗液的精确度产生一定的影响 当然 具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握 5 放液 放液时 枪头紧贴容器壁 先将排放按钮按至第一停点 略停顿后 再按至第二停点 这样做可以保证枪头内无残留液体 如果这样操作后还有残留液体存在的话 就应该更换枪头了 正向吸液 操作时吸液可将按钮按到第一档吸液 释放按钮 放液时先按下第一档 打出大部分液体 再按下第二档 将余液排出 反向吸液 吸液时将按钮直接按到第二档再释放 这样会多吸入一些液体 打出液体时只要按到第一档即可 多吸入的液体可以补偿枪头内部的表面吸附 反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用 适用于粘稠液体和易挥发液体 6 卸掉枪头 卸掉的枪头一定不能和新吸头混放 以免产生交叉污染 四 错误的操作方式 用大量程的移液器移取小体积的液体 吸液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求 吸液速度和放液速度过快 慢吸慢放 五 移液器注意事项 移液器是否漏气 1 自行检测 目视法检测 将吸取液体后的移液器垂直静置15秒 观察是否有液滴缓慢的流出 若有流出 说明有漏气现象 如果是P2 P10 P20 P100 P200的移液器 请将枪头浸入液面1 2毫米 静置20秒钟 观察枪头内部液面是否下降 如果下降了 就说明您手中的移液器出现漏液现象 2 可能原因 吸液速度太快 是否会导致移液体积不准确 吸液速度太快会产生反冲和气泡 导致移液体积不准确 六 移液器的维护保养 定期清洁我们手中的移液器 用酒精棉即可 主