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文档简介

改良BROWN和BRENN染色法GRAM 细菌染色固定：10%缓冲中性福尔马林 切片：石蜡切片5m。液体：1. 改良Hucker-Conn液结晶紫C.I.425550.8g纯乙醇8ml草酸铵4g蒸馏水392ml用乙醇溶解结晶紫，用蒸馏水溶解草酸铵。然后将两种液体混合。过滤后使用。2. 改良Grams碘液碘2g碘化钾4g蒸馏水400ml用少量蒸馏水溶解碘化钾（5ml左右）用少量碘化钾液溶解碘。再加入剩余蒸馏水。3. 纯乙醇-丙酮液纯乙醇50ml丙酮50ml4. 0.5%碱性复红储存液碱性复红或副品红Pararosanilin（C.I.42500）0.5g蒸馏水100ml加热和磁力搅拌帮助溶解。5. 碱性复红工作液碱性复红储存液5ml蒸馏水35ml6. 苦味酸-丙酮液苦味酸0.05g丙酮100ml7. 丙酮-二甲苯液丙酮50ml二甲苯50ml染色步骤 必要时设阳性和阴性对照片染色步骤文字说明必要时设阳性和阴性对照片1. 切片脱蜡至蒸馏水。2. Hucker-Conn液2mins。3. 快速蒸馏水洗2次。4. 改良Grams碘液1min.5. 快速蒸馏水洗2次， 印片而不是组织切片（blot the slide but not the tissue section）。6. 用乙醇-丙酮液蘸浸脱色直到不往下掉蓝颜色为止。7. 蒸馏水冲洗2次，每次浸蘸几回（several dips in each）8. 碱性复红工作液30秒。9. 蒸馏水冲洗2次，每次浸蘸3回，印片而不是组织切片。10. 放入丙酮中5秒。11. 用苦味酸-丙酮液分化和脱色10秒。12. 用二甲苯-丙酮液浸蘸几次。13. 二甲苯透明更换4次（four changes）14. 合成树胶封固。结果革兰氏
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