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文档简介

目的基因的获取课后练习(1)1 PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶?请回答有关问题:(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用_?(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的?为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢_TaqDNA聚合酶的功能是_?TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用_法和_法进行分离?(3)从土壤中分离分解尿素的细菌时,应采取的措施是_,原因是_?(4)相对于细菌分离,而DNA分子的分离和提取操作要复杂的多?在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:_?_?实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料为什么_ , _?(5)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在_中才能进行,并且要严格控制_条件?(6)PCR中加入的引物有_种,加入引物的作用是_?2 在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是()A用mRNA为模板逆转录合成DNA B以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选 D由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3 从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因的方法有()从供体细胞的DNA中直接分离基因从受体细胞的DNA中直接分离基因人工合成基因复制A BC D4 下列关于真核细胞基因结构的叙述中,正确的是()A编码区也含有不能编码蛋白质的序列B通常情况下,外显子和内含子的数量相同C内含子是不能转录、不能编码蛋白质的序列D控制某一性状的基因特指编码区中的碱基序列5 下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中,不正确的是()AcDNA文库中的DNA来源于mRNA的反转录过程B如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同,则这两个基因的结构也完全相同CcDNA文库中的基因都没有启动子D一种生物的cDNA文库可以有许多种,但基因组文库只有一种6 下列关于基因文库的叙述不正确的是( )A构建基因组文库时可使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶B水稻基因组文库中的每个重组DNA都含有完整的水稻基因C利用cDNA文库可研究某个基因在不同组织中的表达情况D可以从小鼠肝脏细胞的cDNA文库中获取过氧化氢酶基因7 回答下列与基因工程有关的问题:来源于豇豆的胰蛋白酶抑制剂基因(CPTI基因)具有广谱的抗虫特性。但直接把该基因转入农作物后,发现转基因植株中合成的CPTI蛋白质的积累量并没有达到能够强烈抑制害虫的浓度。于是科研工作者在体外对CPTI基因进行了修饰,在其两端分别融合了“信号肽”序列和“内质网滞留信号”序列,在它们的共同作用下,CPTI蛋白质在转基因植株中的积累量明显提高。(1)在此项基因工程中,供体细胞是;CPTI基因是人们所需要的特定基因,称为。(2)在体外对CPTI基因进行修饰时,首先要用处理,形成黏性末端。(3)“信号肽”序列及“内质网滞留信号”序列的化学本质是 。8 在基因工程中,作为基因运输工具的运载体,下列特征除哪项外,都是运载体必须具备的条件A能够在宿主细胞中复制,并稳定地保存B具有1多个限制酶切点C必须是细菌的质粒或噬菌体D具有某些标记基因9 20世纪70年代创立了一种新兴的生物技术-基因工程,实施该工程的最终目的是( )A定向提取生物的DNA分子B定向地对DNA分子进行人工剪切C在生物体外对DNA分子进行改造D定向地改造生物的遗传性状10 下列有关生物工程的叙述,正确的是()A应用基因诊断技术,可检测受体细胞中目的基因是否表达B筛选产生抗体的杂交瘤细胞需要使用特定的选择培养基C茎尖细胞具有很强的分裂能力,离体培养时不需要脱分化即可培养成完整植株D早期胚胎细胞分化程度低、全能性高,囊胚期和原肠胚期是胚胎移植的最佳时期参考答案:1 答案: (1)高温使DNA分子热变性(2)热泉7080的高温条件淘汰了绝大多数微生物催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键凝胶色谱 电泳(3)将细菌在培养基中培养,其中惟一的氮源是尿素只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖(4)使血细胞破裂,释放出DNA分子 稀释NaCl溶液,使DNA分子析出不能,哺乳动物成熟的红细胞中无核DNA分子(5)一定的缓冲溶液 温度(6)2 作为DNA复制的起点解析: (1)PCR技术中用高温使DNA分子中的氢键打开,从而解旋?(2)利用细菌特有的特性而与其他细菌区分开来,Taq细菌具有耐高温的特性,放在高温环境下,其他绝大多数细菌死亡,而Taq细菌得以保留?在DNA分子复制中,TaqDNA聚合酶将两个脱氧核苷酸的脱氧核糖和另一脱氧核苷酸的磷酸连结形成磷酸二酯键?蛋白质的分离可以根据其分子大小和带电的性质和多少使之分离,即凝胶色谱法和电泳法?(3)在分离分解尿素的细菌时,应在培养基上加入尿素这一种氮源而使不能利用尿素的细菌不能生存?(4)在使用蒸馏水时,第一次使血细胞破裂,第二次使NaCl溶液浓度降低至0.14 mol/L?(5)PCR反应是在一定的缓冲溶液中进行的,并需严格控制好温度条件?(6)PCR中与体内DNA复制过程中的原料是完全相同的,并加入小段单链DNA或RNA作为引物,引导DNA复制,可以使游离的脱氧核苷酸与之结合形成磷酸二酯键,成为DNA复制的起点?2 答案: B解析: 在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是以4种脱氧核苷酸为原料,人工合成目的基因;以mRNA为模板逆转录合成DNA是在提取到mRNA的情况下使用。 3 答案: B解析: 基因工程获取目的基因的方法有二种,一是从供体细胞的DNA中直接分离目的基因,二是通过人工合成目的基因。4 答案: A解析: 5 答案: B解析: 由于基因转录时只有编码区段才能转录,所以以mRNA反转录成的DNA就只有外显子区段,而缺少内含子和启动子等非编码区段,和原来的基因结构不相同。6 答案: B解析: 基因文库指一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后,将酶切片段插入到载体DNA分子中,所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体,将包含这个生物体的整个基因组,也就是构成了这个生物体的基因文库,根据定义构建基因组文库时需要使用工具酶,限制性核酸内切酶和DNA连接酶,A正确;由于将酶切片段插入到载体DNA分子中,所以水稻基因组文库中的每个重组DNA不一定都含有完整的水稻基因,B错误;cDNA文库是以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库,由此可知C、D正确7 答案: (1)豇豆细胞目的基因(2)限制酶 (3)DNA解析: (1)CPTI基因来源于豇豆,因此供体细胞是豇豆细胞,该基因属于目的基因。(2)用限制酶处理CPTI基因,可以在其两端形成黏性末端。(3) “信号肽”序列及“内质网滞留信号”序列都能与CPTI基因连接在一起,其本质都是DNA8 答案: C解析: 试题分析:作为运载体必须具有四个条件:在宿主细胞中能保存下来并能大量复制;有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,有一定的标记基因,便于进行筛选。对受体细胞无害。一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建。现今实际所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。一类是细菌细胞质的质粒另一类运载体是噬菌体或某些病毒等。考点:本题考查了作为支载体的必要条件。意在意在考查学生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。9 答案: D解析: 试题分析:基因工程可以通过限制酶定向地提取生物的DNA分子,但不是基因工程的最终目的,A错误。基因工程可以通过限制酶定向地对DNA分子进行人工剪切,但也不是基因工程的最终目的,B错误。基因工程可以通过限制酶和DNA连接酶在生物体外对DNA分子进行剪切和连接,也就是改造,C错误。基因工程的最终目的是通过对DNA分子进行剪切和连接之后

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