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粪便检验 淮安二院检验科 重点内容 2 简述粪便标本颜色 性状的临床意义 4 单克隆抗体免疫胶体金法粪便隐血试验的原理 5 比较化学法与单克隆抗体免疫胶体金法粪便隐血试验优缺点 7 粪便隐血试验的临床意义 9 粪便出现红细胞 白细胞主要有何临床意义 粪便的组成和来源 粪便固体成份的组成 粪便的形成过程 大肠对已被吸收营养素的废物再次吸取水分后形成粪便 食物经牙齿咀嚼和唾液混合在酶的作用下进行分解淀粉 经胃的混合并使胃液分解蛋白质 食物在小肠 其他汁液 分解蛋白质 脂肪 碳水化合物 了解消化道有无炎症 出血 寄生虫感染 判断胃肠 胰腺 肝胆系统的功能状况 了解肠道菌群分布是否合理 有无致病菌 协助诊断肠道传染病 粪便隐血 消化道恶性肿瘤的诊断筛选试验 粪便检验的意义 第一节标本采集和处理 一 标本采集粪便标本的采集注意事项 通常采用自然排出粪便 也可经肛门指检或棉拭子在直肠采取 不宜采用灌肠或服用油类泻剂后的粪便 尽量挑选有黏液 脓血等异常成分的部分送验 一般检查留取花生米大小 集卵检查至少留取30g 寻找寄生虫虫体 孵化血吸虫毛蚴则应留取全部粪便 标本应盛于清洁干燥 不漏水的有盖容器中 无尿液污染 用于细菌学检查的须置于消毒容器内 标本要新鲜 要及时送检 化学法检测粪便隐血前3天即应开始禁食肉类 血和肝 并停服铁剂 维生素C等药物 二 标本处理是指粪便检验后的处理检验后应将粪便和纸盒和塑料等容器进行焚烧 搪瓷容器 载玻片等应浸泡于消毒液中24H以上 弃消毒液后再煮沸 冲洗 烘干备用 第二节粪便一般检查 一 理学检查粪便量与食物种类 食量及消化器官的功能状态有关 进食高纤维含量食物者粪便量较多 正常成人排便次数为每两天1次到每天2次 每次排便约100 250g 颜色正常成人为黄褐色 小儿为黄绿色或金黄色糊状食物影响蔬菜 绿色西红柿 西瓜 红色咖啡 巧克力 果酱色 性状正常成人为成形便 条带状 寄生虫肉眼可见的较大虫体有蛔虫 蛲虫 绦虫或其片段 钩虫须筛洗后才能见 二 化学检查1 粪便隐血试验 OBT 是最有临床意义的粪便化学检查项目隐血上消化道出血但血量少于5ml 粪便中无可见血液 镜检出也无红细胞 需用化学法或免疫法才能证实的出血 深浅反映了Hb的多少 检测原理1 化学法 邻甲苯胺法等 影响因素 假阳性 1 外源性动物食品如含有Hb 肌红蛋白 其他血红素2 服用铁剂3 大量生食蔬菜 假阴性 1 血液在肠道内停留过久 2 病人服用大量VitC及其它还原作用的药物 2 免疫学方法目前主要采用单克隆免疫胶体金法 胶体金是氯化金与枸橼酸钠合成的紫红色胶体物质 乙酸纤维素膜 金标羊抗人Hb单抗金标鼠IgG 羊抗人Hb多抗 悬液移动方向 羊抗鼠IgG 优点灵敏度高 不受食物干扰 无须禁食 具有高度特异性 不受动物血红蛋白和辣根过氧化酶干扰 干扰因素假阴性主要见于消化道大出血 Hb浓度过高 抗原过剩 即后带现象 抗原 血红蛋白 过剩 外观明显呈柏油样 隐血试验却为阴性反应 上消化出血时 如Hb被肠道消化变性时 检测低温保存标本时 假阳性原因可能为服用刺激胃肠药物 质量控制1 化学法禁食2 免疫学胶体金法防止出现后带现象 必要时再稀释粪便50 lO0倍后试验 特别要防止假阳性 3 及时送检 lh内 4 保证试剂质量5 应做阴性和阳性对照试验参考值 阴性 临床意义主要用于消化道出血 肿瘤筛检和鉴别OBT阳性见于消化道出血 如胃溃疡 胃炎 肠结核 结肠息肉 钩虫病 消化道肿瘤等 消化性溃疡与肿瘤出血的鉴别消化性溃疡间断阳性恶性肿瘤阳性率逐渐升高 并持续阳性大肠癌 早期诊断大肠癌唯一可查出的异常指标 胃癌 早期诊断符合率20 晚期符合率达95 对消化道肿瘤进行筛查 2 脂肪检测粪便脂肪可以了解消化功能和胃肠道吸收功能因脂肪消化吸收功能减退时 粪总脂量大量增加 若24小时粪中脂量达到6g 则称为脂肪泻 方法称量法滴定法脂肪吸收率 临床意义胰腺疾病胰腺炎 胰腺癌肝胆疾病胆汁淤积性黄疸 胆汁不足 肝炎肝硬化肠道病变乳糜泻 消化性溃疡等 三 显微镜检查主要检查各种细胞 寄生虫卵 异常细菌 真菌和原虫等 1 细胞常见的为白细胞 红细胞 检查时应取粘液脓血部分或多处取材 用生理盐水混悬于玻片上镜检 于显微镜下根据细胞形态报告 红细胞呈草绿色 略有折光性的圆盘状 有时呈皱缩状 正常粪便无红细胞 上消化道出血时 因被消化 也难见到 下消化道出血或炎症时可出现红细胞 如痢疾 肠炎 肿瘤 息肉 痔疮 血吸虫等 阿米巴痢疾红细胞多于白细胞 成堆存在并有残碎现象细菌性痢疾红细胞少于白细胞 多分散存在 形态正常 白细胞 脓细胞 粪便中最常见中性粒细胞 形态完整者与血液细胞相似 病理情况下 呈灰白色 肿胀坏死破碎结构不完整胞质内充满细小颗粒核不清楚 即脓细胞 正常粪便无或偶见白细胞 肠炎时少量增加 分散存在 菌痢 溃疡性结肠炎时 可大量出现或成堆出现脓细胞 寄生虫病时 可出现较多嗜酸性粒细胞 可伴有夏科 雷登结晶 巨噬细胞来自于单核细胞 胞体大 约为中性粒细胞3倍以上 常含有吞噬的颗粒 细胞碎屑等异物 正常粪便无巨噬细胞 阳性见于急性菌痢 急性出血性肠炎等 上皮细胞粪便中上皮细胞为肠粘膜上皮细胞 很少见到柱状上皮细胞 如其增多 见于结肠炎症 假膜性肠炎 2 食物残渣和结晶粪便中 食物残渣都为充分消化后的无定形细小颗粒 常见未充分消化的食物残渣有 脂肪 淀粉颗粒 肌纤维 植物细胞和纤维等 正常粪便少见食物残渣 当消化道病变时 消化功能减退 会造成残渣增多 常见于各种原因造成的脂肪泻 腹泻等 脂肪球 淀粉颗粒 肌纤维 植物细胞 植物纤维 纤维导管 3 病原学检查寄生虫卵和原虫粪便检验是诊断肠道寄生虫感染最直接可靠的方法 检查方法有直接涂片法 厚涂片法 加藤法 浓集法 浮聚法等 甲醛 乙酸乙酯沉淀法和厚涂片法为WHO推荐方法 直接盐水涂片法 细胞 蛔虫 鞭虫 滴一滴生理盐水于洁净的载玻片 用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块 在生理盐水中涂抹均匀碘液染色检查法 阿米巴原虫 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 以一滴碘液代替生理盐水 取少许粪便在碘液中涂匀 再盖上盖片 涂片染色的一半查包囊 未染色的一半查活滋养体 沉淀法 主要检查华支睾吸虫卵 布氏姜片吸虫卵 血吸虫卵 原虫包囊和蠕虫卵的比重大 可沉集于水底 有助于提高检出率 但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差 浮聚法 主要检查钩虫卵和蛲虫卵 利用比重较大的液体 使原虫包囊或蠕虫卵上浮 集中于液体表面 常用的方法有两种 饱和盐水浮聚法硫酸锌离心浮聚法 加藤氏法 取100毫克粪便标本 均匀的干涂在玻片上 将专用玻璃胶纸 含甘油 孔雀绿溶液 展平后压紧 使玻璃纸下的粪便铺成长椭圆形 经一段时间粪便透明后置镜下计数 中国常见肠道寄生虫感染状况 来源 2005年卫生部 全国人体重要寄生虫病现状调查报告 粪便镜检常见的虫卵和原虫线虫类蛔虫 钩虫 鞭虫 蛲虫吸虫类华支睾吸虫 血吸虫 姜片虫绦虫只能见到妊娠节片原虫阿米巴原虫及滋养体 包囊体 隐孢子虫及包囊体等 蛔虫长圆柱形 向两端渐细 乳白色 侧线明显 蛲虫 成虫细小 乳白色 呈线头样 雌虫大小约为8 13mm 0 3 0 5mm 虫体中部膨大 尾端长直而尖细 雄虫较小 大小约为2 5mm 0 1 0 2mm 尾端向腹面卷曲 钩虫 体长约1厘米左右 半透明 肉红色 死后呈灰白色 虫体前端较细 顶端有一发达的口囊 由坚韧的角质构成 鞭虫 虫体呈鞭状 雌虫体长35 50mm 雄虫30 45mm 虫体前3 5细如鞭状 虫体白色带状 全2 4m 宽7 8mm 虫体分头节 颈部和节片三部分 头节圆球形 直径1mm 猪肉绦虫 华枝睾吸虫卵 肠道阿米巴 滋养体大滋养体20 40 m大小 依靠伪足作一定方向移动 见于急性期患者的粪便或肠壁组织中 吞噬组织和红细胞 故又称组织型滋养体 小滋养体 肠腔型滋养体 6 20 m大小 伪足少包囊多见于隐性感染者及慢性患者粪便中 呈圆形 5 20 m大小 成熟包囊具有4个核 是溶组织阿米巴的感染型 具有传染性 阿米巴原虫 Amoeba 受精蛔虫卵 未受精蛔虫卵 未受精蛔虫卵多呈长椭圆形 卵壳内含许多大小不等的折光性颗粒 若蛔虫卵的蛋白质膜脱落 卵壳则呈无色透明 蛲虫卵 雌虫夜间在肛周皮肤上产卵 引起肛门皮肤及会阴部奇痒 用手搔抓后 虫卵附着在手上 如果不洗手 虫卵可被吞入肚子里 重新感染 钩虫卵 虫卵椭圆形 壳薄 无色透明 大小约为60 40 m 卵内细胞多为2 4个 卵壳与细胞间有明显的空隙 鞭虫卵 鞭虫卵呈纺锤形 大小约为50 22 m 黄褐色 卵壳较厚 两端各具一个透明的盖塞 血吸虫卵 成熟虫卵大小平均89 67 m 椭圆形 淡黄色 卵壳厚薄均匀 无卵盖 卵壳一侧有一小刺 姜片虫卵 带绦虫卵 微生物 1 细菌 一些细菌如葡萄球菌 结核分枝杆菌 霍乱弧菌 艰难梭菌和空肠弯曲菌等可通过粪便涂片染色镜检而得到鉴定 正常粪便球菌 G 和杆菌 G 比例大致1 10 肠道菌群失调症 dysbacteriosis 长期使用广谱抗生素免疫抑制剂慢性消耗性疾病 2 真菌 观察到真菌菌丝或孢子 有助诊断 但难确定菌种 3 病毒 取急性期病毒性肠炎患者的新鲜粪便标本 可在透射电镜下观察轮状病毒 诺沃克病毒 肠道腺病毒 副轮状病毒等病毒颗粒 第二节粪便分析工作站 DIASYSFE 2分析程序 1 Parasep粪便离心管的混合室内加入2 甲醛盐水2 7ml 有形成分固定 再加入乙酸乙酯0 8ml 乳化作用 使虫卵溢出 可抑制臭味 2 加入新鲜粪便一匙 约1g 于混合室中 封闭混合室 接上10ml的离心管 尖端朝上 旋转或摇晃使其乳化3 拧紧粪便离心管的盖子 以RCF1000g速度离心1min 去掉混合室和过滤环4 除去脂肪物质并倒掉沉渣上面的液体 余下的粪沉渣形态放大镜检 粪便处理流程图 粪沉渣 3 5ml混合 加入试剂 分层 吸样 Parasep粪便离心管 特点 1 提高检出率在实际工作中 除粪便中常见的有形成分外 虫卵的阳性率较以往方法确有提高 检出虫卵主要以蛔