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文档简介
课题2 用纸层析法分离铁离子和铜离子 色谱分析法 1 简介 基于混合物各组分在体系中两相的物理 化学性能差异 如吸附 分配差异等 而进行分离和分析的方法 国际公认俄国m c 茨维特为色谱法的创始人 常用于分离结构相近 物理性质和化学性质相似物质 纸层析法也是色谱分析法的一种 色谱分析法 色谱法体系中的两相作相对运动时 通常其中一个相是固定不动的 称为固定相 另一相是移动的 称为流动相 滤纸或其它载体作为惰性支撑物 菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 2 色谱法的应用展示 1 按流动相和固定相的不同 色谱法分为气相色谱法和液相色谱法 气相色谱法的流动相是气体 液相色谱法的流动相是液体 2 按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱 纸色谱和薄层色谱 3 按吸附力可分为吸附色谱 离子交换色谱 分配色谱 4 按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱 5 按进样方法可分为区带色谱 迎头色谱和顶替色谱 3 色谱法的分类 纸色谱 以滤纸为载体 是以滤纸纤维及其结合水作为固定相 以有机溶剂作为流动相的分配色谱分离 纸上色谱分离具有设备简单 操作方便 分离效率高 所需样品量少等优点 但分离量少 回收困难 分离速度慢等 柱色谱 具有进样量大 回收容易等优点 但其分辨率不如纸上色谱和薄层色谱高 由于吸附在滤纸上的样品的各组分在水 固定相 或有机溶剂 流动相 中的溶解能力各不相同 各组分会在两相之间产生不同的分配现象 滤纸 水 有机溶剂 一 纸层析法基本原理 惰性支持物固定相流动相 遵循相似相溶原理 样品中亲脂性强的成分在 相中分配得多一些 随流动相移动的速度就 一些 而亲水性强的成分在 相中分配得多一些 随相移动的速度就 一些 随着流动相的移动 性质不同的组分就分离在滤纸的不同位置上 实现了分离 阅读课本第三段填空 流动 快 固定 流动 慢 二 纸层析法分离fe3 和cu2 一 实验原理含有cu2 和fe3 的水溶液涂在滤纸一端 丙酮作展开剂 在滤纸的毛细作用下 展开剂携带cu2 和fe3 沿滤纸纤维向上移动的速度不同 一段时间后 cu2 和fe3 距起点的距离会不同 从而达到分离的目的 cu2 和fe3 可用氨熏显色 固定相 流动相 丙酮 水 2 裁纸 3 画原点 6 展开 7 显色 裁剪适当尺寸的滤纸条 滤纸不可触及试管的内壁 纸条末端浸入展开剂约0 5cm 不能让试样点浸入展开剂 静置 二 操作方法 1 配制试样溶液 离滤纸末端约2cm处铅笔画一原点 4 点样 用毛细管取样品溶液 轻轻点样于原点上 晾干 重复3 5次 斑点直径需 0 5cm 5 加展开剂 不能粘到试管壁上 约2cm 试样点 将滤纸置于浓氨水试剂瓶口上方 进行氨熏 三 实验方案设计 装置制作 点层析试样 操作步骤 操作要点 滤纸剪成约1cm宽 10cm长 保证下端能浸入展开剂中1cm 的滤纸条 一端固定在橡胶塞上 在距滤纸条一端2cm处用铅笔画一小圆点 配试样后 用毛细管蘸取试样在 原点 处点直径0 3 0 5cm的斑点 晾干后再点 重复3 5次 也在滤纸下方距离底边2cm处画出混合液细线代替点样 配展开剂 层析操作 显色反应 用丙酮9ml 6mol l盐酸1ml配成展开剂 展开剂不可沾到试管壁 点样后的滤纸条不可接触试管内壁 滤纸条下端浸入展开剂中1cm 注意不要让试样点触及展开剂 注意观察滤纸条上色带的变化 滤纸条取下后用氨气熏 观察颜色变化 氨熏应在通风橱中进行 交流与讨论 显色反应 点样为什么要重复3 5次 斑点的直径为何不宜太大 3 为什么不要让试样点接触展开液 斑点过大会导致试样各组分在分离过程中色带容易出现重叠 增加试样中各组分的含量 试样接触展开液会溶解在展开液中导致无法分离 2 为什么展开剂中要加盐酸 防止cu2 和fe3 的水解 层析过程中的实验现象 四 主要实验现象 用小烧杯代替大试管 用铁丝横穿过滤纸 架在烧杯上方 如图 调节完滤纸高度后 盖上培养皿形成气室 氯化铁层 颜色较深 硫酸铜层 颜色稍浅 氨熏后的实验现象 用纸层析法分离铁离子和铜离子 1 为防止水解 饱和fecl3和cuso4可加少量hcl或h2so4酸化 不影响实验效果 五 其他注意事项 4 滤纸吸水性很强 点样操作要求迅速 等到滤纸完全干燥以后才能再次点样 2 氨熏需在通风实验室内进行 3 层析速度开始较快 后逐渐减慢 大约10分钟即可分离完全 拓展课题1 2菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 1 药品准备 菠菜叶4 5克 石英砂1克 可用细砂代替 丙酮 层析液按石油醚9份 丙酮1份 体积比 配制 也可用20份石油醚 2份丙酮 1份苯配制 或用汽油代替 2 实验现象 3 用圆滤纸改进实验的实验现象 5分钟 20分钟 青菜 用粉笔进行层析分离红墨水和蓝墨水的混合物 课外探究 问题与解决 1 下列关于纸层析法实验的说法正确的是 a 滤纸作为固定相 滤纸上吸附的水作为流动相b 滤纸作为惰性支持物 滤纸上吸附的水作为流动相c 滤纸上吸附的水作为固定相 不溶于水的有机溶剂作为流动相d 滤纸上吸附的水作为流动相 不溶于水的有机溶剂作为固定相 c 巩固应用 2 色谱分析法是现代分离实验技术中的一种 试回答下列问题 1 已知两种液态有机色素a与b混合在一起 经测定a的亲脂性比b弱 则下列说法正确的是 a 用溶解过滤法分离
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