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文档简介
梯度洗脱程序的设置梯度洗脱:乙腈/水体系。初始比例:乙腈:水=70%:30%。保持2分钟;10分钟内渐变为100%:0。保持10分钟。液相的软件界面如下图(泵的控制部分):1、 将“泵数”处设置为“2”。在上图的左下角位置。2、 在“初始流量”处设置为A泵(输乙腈):70%;软件会自动将B泵(输水)设为30%。设置后见下图。3、 在时间表的时间处输入“2”(指初始比例保持时间),A处输入“70”,按“加入”。设置后见下图。4、在时间表的时间处输入“12”(10分钟加上初始保持时间等于12),A处输入“100”,按“加入”。设置后见下图。5、 在时间表的时间处输入“22”(见下面的注1),A处输入“100”,按“加入”。设置后见下图。 注1:到前一步的总时间为12分钟,加上这一步需要10分钟,等于22分钟。6、 在时间表的时间处输入“22.001”,A处输入“70”,按“加入”。设置后见下图。当切换进样阀至INJECT状态时,软件就会自动按上面的梯度程序来控制泵了。当按下软件的停止按钮时,梯度程序会自动中止。上面的操作步骤中,第5步和第6步也可以不设置。等样品中所有组份都出峰后按下软件的停止按钮时,梯度程序会自动中止,同时流动相比例回到初始流量处所设置的比例。两次进样的间隔时间要求不少于十分钟(需要等基线稳定后才能进下一次样品)。重要提示:1、液相色谱所用的水必须为超纯水或双蒸水,也可以直接购买“娃哈哈”等品牌的纯净水代替。绝对不能使用矿泉水。2、 如果是超纯水或双蒸水,一般要求当天制备当天使用(不要超过三天)。3、 如果是购买的市售的纯净水,必须当天开封当天使用(不要超过三天)。4、 实验表明,纯水放置一天后即有细菌存在。如果纯水中含有5%-10%的有机物(如甲醇、乙腈),可以放置三至五天,放置三天后即有细菌存在。
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