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文档简介

酵母细胞的固定化 研究目的 在应用酶的过程中 人们发现了一些实际问题 酶通常对强酸 强碱 高温和有机溶剂等条件非常敏感 容易失活 溶液中的酶很难回收 提高了生产成本 也可能影响产品质量 在本课题中 我们将动手制备固定化酵母细胞 体会固定化酶的作用 基础知识 1 固定化酶的应用实例 生产高果糖浆 1 高果糖浆的生产原理 2 葡萄糖异构酶固定 将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上 装入反应柱中 3 高果糖浆的生产操作 识图4 5反应柱 从反应柱上端注入葡萄糖溶液 从下端流出果糖溶液 一个反应柱可连续使用半年 比较 酶和细胞的固定方法和特点 2 固定化技术的方法 识图4 6固定方法 将酶和细胞固定化方法有包埋法 化学结合法和物理吸附法 思考1 对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么 思考2 将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应 应当固定 酶 细胞 若将蛋白质变成氨基酸 应当固定 酶 细胞 吸附法 3 固定细胞的材料 固定细胞时应当选用不溶于水的多孔性载体材料 如明胶 琼脂糖 海藻酸钠 醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等 2 实验设计1 制备固定化酵母细胞 1 酵母细胞的活化 1g干酵母 10ml蒸馏水 50ml烧杯 搅拌均匀 放置1h 使之活化 思考3 活化是指什么 2 配制cacl2溶液 0 83gcacl2 150ml蒸馏水 200ml烧杯 溶解备用 活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程 3 配制海藻酸钠溶液 0 7g海藻酸 10ml水 50ml烧杯 酒精灯微火 或间断 加热 并不断搅拌 使之溶化 蒸馏水定容到10ml 思考4 微火加热并不断搅拌的目的是什么 4 海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合 将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温 加入活化酵母细胞液 搅拌后吸入到注射器中 防止海藻酸钠焦糊 思考5 为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞 5 固定化酵母细胞 以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到cacl2溶液中 形成凝胶珠状颗粒 防止高温杀死酵母细胞 2 固定化酵母细胞的发酵 6 冲洗 将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2 3次 7 发酵 150ml10 葡萄糖 固定化酵母细胞 200ml锤形瓶 密封 25 发酵24h 思考6 发酵过程中锥形瓶为什么要密封 思考7 锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的 思考8 在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中 需要无菌操作吗 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件 酵母菌进行无氧呼吸产生的 需要 例1 下列有关固定化技术的叙述 正确的是 a 固定化酶只是在细胞内才能发挥作用b 固定化酶能提高酶的利用率c 酶的固定是酶分离纯化的常用方法d 固定化酶的固定化方式就是吸附在固体表面上 b 例2 关于固定化细胞的叙述 正确的是a 催化效率高 低耗能 低污染b 对环境的条件非常敏感 容易失活c 既能与反应物充分接触 又能与产物分离d 成本低 操作简单 但反应效果可能很低 c 例3 溶解海藻酸钠 最好采用加热的方法a 小火间断b 小火持续c 大火间断d 大火持续 a 例4 关于酵母菌的叙述 正确的是a 酵母菌在营养物质充足时 环境适宜时 依靠有性生殖进行繁殖b 酵母菌的代谢类型时异养厌氧型c 酵母菌的生物膜系统包括细胞膜 核膜 各种的细胞器膜等膜d 用酵母菌酿酒时 应先密封后通气 c 例5 将酵母菌的培养液由富氧状态变为缺氧状态 下面加快的一项是a co2的释放b 丙酮酸的氧化c 葡萄糖的利用d atp的形成 c 例6 固定化酶的优点是a 有利于增加酶的活性b 有利于产物的纯化c 有利于提高反应速度d 有利于酶发挥作用 b 例7 下列不是用于包埋法

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