KAI1基因在人肺癌细胞表达水平及调控机制的研究知识讲解.ppt

KAI1基因在人肺癌细胞株中表达水平及调控机制的研究 本研究受到国家自然科学基金重点项目 N0 30430300 和天津市科技支撑计划重点项目 No 06YFSZSF05300 资助 尤嘉琮1赵颖2陈军1马力1朱大兴1周清华11 天津医科大学总医院天津市肺癌研究所2 四川大学华西医院肿瘤中心 一 研究不同组织学类型的人肺癌细胞株和正常人肺成纤维细胞株MRC 5中KAI1的mRNA表达水平及其差异 二 研究不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株中KAI1的mRNA表达水平 探讨KAI1与nm23 H1在调控肺癌转移中的相互关系 三 研究甲基化抑制剂5 杂氮脱氧胞苷 5 Aza CdR 对肺癌细胞株L9981 GLC 82和NCI H460中KAI1的mRNA表达水平和体外增殖能力的影响 研究目的 主要材料与方法 实验用细胞株 MRC 5 正常人肺成纤维细胞株L9981 人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 nm23 H1 稳定转染nm23 H1基因的L9981细胞株NL9980 人低转移大细胞肺癌细胞株肺腺癌细胞株 A549 GLC 82 A2 SPCA 1和LTEP 2人大细胞肺癌细胞株 NCI H460人小细胞肺癌细胞株 SH 77和NCI H446肺鳞癌细胞株 YTMLC 90 主要实验方法 实时荧光定量PCRMTT法绘制细胞生长曲线 甲基化抑制剂 5 杂氮脱氧胞苷 5 Aza CdR 实验结果 比较MRC 5与不同组织类型肺癌细胞株间KAI1基因mRNA表达水平 1 MRC 5 正常人肺成纤维细胞株 2 L9981 人高转移大细胞肺癌细胞株 3 NL9980 人低转移大细胞肺癌细胞株 4 L9981 nm23 H1 pEGFP 稳定转染nm23 H1的L9981细胞株 5 A549 6 GLC 82 7 A2 8 SPCA 1 肺腺癌细胞株 9 NCI H460 人大细胞肺癌细胞株 10 SH 77 11 NCI H446 人小细胞肺癌细胞株 12 LTEP 2 肺腺癌细胞株 13 YTMLC 90 肺鳞癌细胞株 P 0 000 0 002 不同细胞株间KAI1基因表达水平比较的P值表 1 MRC 5 正常人肺成纤维细胞株 2 L9981 人高转移大细胞肺癌细胞株 3 NL9980 人低转移大细胞肺癌细胞株 4 L9981 nm23 H1 pEGFP 稳定转染nm23 H1的L9981细胞株 5 A549 6 GLC 82 7 A2 8 SPCA 1 肺腺癌细胞株 9 NCI H460 人大细胞肺癌细胞株 10 SH 77 11 NCI H446 人小细胞肺癌细胞株 12 LTEP 2 肺腺癌细胞株 13 YTMLC 90 肺鳞癌细胞株 在L9981细胞中转染nm23 H1可显著上调KAI1的mRNA表达水平 1 L9981 2 NL9980 3 L9981 nm23 H1 pEGFP 比较L9981细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 L9981 2 A549 3 GLC 82 4 A2 5 SPCA 1 6 NCI H460 7 SH 77 8 NCI H446 9 LTEP 2 10 YTMLC 90 比较NL9980与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 NL9980 2 L9981 nm23 H1 pEGFP 3 A549 4 GLC 82 5 A2 6 SPCA 1 7 NCI H460 8 SH 77 9 NCI H446 10 LTEP 2 11 YTMLC 90 比较A549细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 A549 2 GLC 82 3 A2 4 SPCA 1 5 NCI H460 6 SH 77 7 NCI H446 8 LTEP 2 9 YTMLC 90 比较GLC 82细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 GLC 82 2 A2 3 SPCA 1 4 NCI H460 5 SH 77 6 NCI H446 7 LTEP 2 8 YTMLC 90 比较A2细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 A2 2 SPCA 1 3 NCI H460 4 SH 77 5 NCI H446 6 LTEP 2 7 YTMLC 90 比较SPCA 1细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 SPCA 1 2 NCI H460 3 SH 77 4 NCI H446 5 LTEP 2 6 YTMLC 90 比较NCI H460细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的表达水平 1 NCI H460 2 SH 77 3 NCI H446 4 LTEP 2 5 YTMLC 90 比较SH 77细胞与不同组织学类型的人肺癌细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 SH 77 2 NCI H446 3 LTEP 2 4 YTMLC 90 比较NCI H446 LTEP 2和YTMLC 90细胞株间KAI1的mRNA表达水平 1 NCI H446 2 LTEP 2 3 YTMLC 90 5 Aza CdR上调了NCI H460和L9981细胞中KAI1的mRNA表达水平 1 Control 2 2 mol L5 Aza CdR 3 10 mol L5 Aza CdR NCI H460和L9981细胞株对照组与实验组间KAI1基因表达水平比较的P值表 1 Control 2 2 mol L5 Aza CdR 3 10 mol L5 Aza CdR NCI H460cells L9981cells 5 Aza CdR对GLC 82细胞中KAI1的mRNA表达水平无显著影响 1 对照组 2 2 mol L5 Aza CdR 3 10 mol L5 Aza CdR GLC 82细胞株对照组与实验组间KAI1基因表达水平比较的P值表 5 Aza CdR能够抑制人肺癌细胞株NCI H460 L9981的增殖 5 Aza CdR对人肺癌细胞株GLC 82的增殖无显著影响 结论 1 不同组织学类型人肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平均显著低于正常人肺成纤维细胞株MRC 5 2 不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平有明显差异 nm23 H1基因转