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37 细菌的分离计数(总分86分)一选择题(每小题2分)1下列哪项不是菌落的特征( )a大小和形状b光泽度和透明度c颜色和硬度d气味和ph2下列关于微生物分离和培养的有关叙述,错误的是()a微生物培养前,需对培养基进行消毒b测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法c分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度d分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源3能合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分别是( )aco2和n2b葡萄糖和nh3cco2和尿素d葡萄糖和尿素4统计细菌数目的方法有( )涂布平板法直接计数法滤膜法abcd5欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,下列实验操作中不正确的是()a将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释b同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板c可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照d用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出能分解尿素的细菌6关于测定土壤中细菌的数量,正确的叙述是a一般选用103107倍的稀释液分别涂布b测定放线菌的数量,一般选用103、104和105倍稀释c测定真菌的数量,一般选用103、104和105倍稀释d当第一次测量某种细菌的数量时,可以将104106倍的稀释液分别涂布到平板上培养7在本课题的实验中,下列关于土壤取样的叙述,错误的是( )a土壤取样时应选取肥沃、湿润的土壤b先铲去表层土3cm左右,再取样c取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌d应在火焰旁边称取土壤8用稀释涂布夹板法测定同一土壤样品中的细菌数,大对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是( )a涂布了一个平板,统计的菌落数是230b涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238c涂布了3 个平板,统计的菌落数分别是21、212、256,取平均值163d涂布了3 个平板,统计的菌落数分别是210、240、250,取平均值2339在做分离分解尿素的细菌实验时,a同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其它同学只选择出50个菌落。a同学的结果产生的原因可能有( )土样不同培养基污染操作失误没有设置对照abcd10关于测定土壤中细菌、放线菌、真菌的数量,下列叙述正确的是( )a测定细菌的数量一般选用103107倍的稀释液分别涂布培养b测定放线菌的数量一般选用103、104和105倍的稀释液分别涂布培养c测定真菌的数量一般选用103、104和105倍的稀释液分别涂布培养d当第一次测某细菌的数量时,可以将101107倍的稀释液分别涂布到平板上培养11从土壤中筛选蛋白酶产生菌时,所用培养基为( )a加富培养基b选择培养基c基础培养基d鉴别培养基12以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养细菌后,指示剂将( )a变蓝色b变红色c变黑色d变棕色13下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( ) a用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板b取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml,分别涂布于各组平板上c将实验组和对照组平板倒置,37恒温培养24-48小时d确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数14用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )a未接种的选择培养基b未接种的牛肉高蛋白胨培养基.comc接种了的牛肉高蛋白胨培养基d接种了的选择培养基15用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目,其结果与实际值比( )a比实际值要高b 比实际值要低 c和实际值一样d 比实际值可能高也可能低16下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( )akh2po4、na2hp04、mgs047h20、葡萄糖、尿素、琼脂、水bkh2po4、na2hp04、mgs047h20、葡萄糖、琼脂、水ckh2po4、na2hp04、mgs047h20、尿素、琼脂、水dkh2po4、na2hp04、mgs047h20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水17下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中,正确的是( )土壤取样 称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中 吸取0.1ml进行平板涂布依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度abcd18下列有关微生物分离和培养的有关叙述,错误的是( )a微生物培养前,需对培养基进行消毒b测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法 c分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度 d分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源19需在火焰旁操作的有( )土壤取样 称取土壤 稀释土壤溶液 涂布平板 微生物培养abcd20下列关于微生物的培养叙述错误的是 ( )a细菌一般在3037的温度下培养12 d b放线菌一般在2528的温度下培养57 dc霉菌一般在2528的温度下培养34 dd不同种类的微生物,一般需要相同的培养温度和培养时间21以下操作用到接种环的是( )a平板划线操作b系列稀释操作c涂布平板操作d倒平板操作二填空题22(12分)人的粪便中含有致病菌,但是通常因数量少而不易检测。大肠杆菌是生存在人体肠道中的正常菌群,每天粪便中约有109个,且能与致病菌混杂生长。如果食物中出现大肠杆菌,就意味着食物可能被粪便污染而带上致病菌,因而常将大肠杆菌的数量作为食品卫生的检测的指标之一。请回答下列问题:(1)用稀释涂布平板法来测定大肠杆菌的数目,实际统计的是培养基上 的数目。(2)计数时所用的培养基是固体培养基,接种前需要对其灭菌,常用的方法是 。(3)某班不同实验小组在测定牛奶中大肠杆菌数是否超标时,分别得到如下数据,a组:457个/平板,b组:76个/平板,c组:9个/平板。你认为哪组同学的数据比较准确_,此数据比实际值要_(低/高),其原因是_ 。实验完成后需要对培养基进行_处理,然后才能倒掉。23(10分)自然界中的微生物往往是混杂生长的,人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验步骤:制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液为了得到更加准确的结果,你选用_接种样品适宜温度下培养请回答有关问题:结果分析:(1)测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是( )a一个平板,统计的菌落数是23b两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24c三个平板,统计的菌落数分别是21、5和52,取平均值26d四个平板,统计的菌落数分别是21、30、24和25,取平均值25(2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为02ml) _。(3)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现,在培养基上还有其他杂菌的菌落,能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了?为什么? 24(6分)在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时,出现如下问题,请给予解答:(1)一位同学用稀释倍数为106的稀释液在培养基中涂布了3个平板,统计的菌数数为21、212和256,该同学以这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这一结果是否接近真实值?如果需要改进,如何改进?_ 。 (2)a同学筛选出的菌落为150个,其他同学只选择出50个,并且他在设计实验时并没有设置对照。你认为a同学结果产生的原因可能有哪些?_ 。如何设计对照实验排除可能影响实验结果的因素:_ 。25(16分)尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,某同学试图从土壤中筛选出能高效降解尿素的细菌(目的菌),表中所示是该同学配制的培养基成分:kh2po41.4 gna2hpo42.1 gmgso47h2o0.2 g葡萄糖10.0 g(nh4)2so41.0 g琼脂15.0 g蒸馏水定容到1000 ml(1)该培养基中的主要营养物质包括_。从状态上看,该培养基属于_培养基。(2)在生物的培养中,一般要对配制的培养基采用高压灭菌,其中“高压”是为了_。(3)若培养从土壤中分离出来的目的菌,该培养基成分如何调整?_,依据是_。该目的菌同化作用类型是_。(4)该同学在纯化土壤中的目的菌时,最常用的接种方法是_。在纯化土壤中该目的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是_。附加题:1.(10分)将50ml牛奶煮沸,倒入经消毒的一个锥形瓶内,锥形瓶口用棉团堵住,每日观察牛奶的情况(如下图),共进行4天。 (1)这个实验可证明_。 (2)为这个实验设计的对照实验应该是_。 (3)实验结束时,牛奶会_,检测方法是_,产生这一现象的原因是_。 (4)牛奶在这个实验中的作用是_。 (5)实验前先将牛奶煮沸的原因是_。 (6)加入土样前,先让牛奶冷却至室温的原因是_。 (7)用棉团堵住锥形瓶的原因是_。 (8)实验前对锥形瓶进行消毒这一个步骤是否是必要的?_,理由是_。 2.(10分)不同微生物生长所要求的最适温度不同。请就测定大肠杆菌生长的最适温度的实验完成下列问题: (1)依次按称量、溶化、调ph、分装(每管5ml)、_、包扎的顺序,完成培养基的配制,再用_(方法)灭菌后,取8支试管分别标明20、28、37、45四种温度,每种温度2管。 (2)向每管中接入处于分裂旺盛期的大肠杆菌液0.1ml,混匀。在相应温度下培养24h。 (3)测定结果显示,45下菌体最少,因为细胞内的_等发生了不可逆的破坏。37 细菌的分离计数答案1-5daddd 6-10bcdab 11-15bbdcb 16-21acadda22(1)菌落(1分)(2)高压蒸汽灭菌法(2分) (3)b组(1分) 低(1分) 培养基中可能有两个或多个菌落紧挨在一起,共同形成一个菌落(2分) 灭菌(1分)23稀释涂布平板法、(1)d (2)1. 17107 (3)不能肯定、也可能是培养基污染或操作不当24(1)不接近真实值,接种前将菌液摇匀后重新实验 (2)可能是土样不同,也可能是培养基污染或操作失误;方案有二:一是由其他同学用与a同学一样的土壤进行实验,如果与a同学一致,则证明无误,如果结果不同,则证明a同学存在操作失误或培养基配制有问题。另一种方案是将a同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。(4分) 25(1)氮源、碳源、无机盐和水固体(2)杀死培养基中的细菌芽孢(3)将(nh4)2so4换成尿素要筛选出降解尿素的细菌,只能以尿素作为唯一的氮源异养型(4)稀释涂布平板法和平板划线法菌液浓度过高(或培养过程中被杂菌污染,或用接种针划

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