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第一单元第二章 细胞工程第1节 动物细胞培养一、选择题1下列关于动物细胞培养的叙述,不正确的是()a培养基为液体培养基b培养结果只能获得大量细胞及生物制品,而不能获得生物体c原代培养到一定时间后细胞核型可能会发生变化d通过细胞培养可以检测有毒物质,判断某物质的毒性2下列关于动物细胞培养液的叙述,不正确的是()a为了防止培养过程中出现细菌污染,可以在培养液中添加抗生素b细胞培养液中必须有糖、氨基酸等化合物以及动物血清等天然成分c空气中再混入5%co2的主要作用是维持培养液的phd培养液应该定期更换,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害3下列属于动物细胞培养技术应用的是()a生产生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等b用于检测物质的毒性c用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据d以上三项全是$来&源:4下列关于动物细胞培养的过程叙述,错误的是()a制作细胞悬液时可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理b悬液中分散的细胞很快贴附在细胞壁上,细胞贴壁体现了细胞的适应性c细胞进行有丝分裂,数量增加到相互接触时可以使用胃蛋白酶处理后分瓶培养d10代以内的细胞保持细胞正常的二倍体核型5下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()a动物细胞培养的目的就是获得细胞分泌蛋白b动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开c动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象d可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体二、非选择题6回答下列有关动物细胞培养的问题。(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的_。此时,瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是_。资*源%库(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成有_特点的细胞,该种细胞的黏着性_,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。资*源%库(3)现用某种大分子染料对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中,通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中_的活性降低,细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。参考答案1答案:c2解析:动物细胞培养液通常需要加入动物血清、血浆,有时候也采用无血清培养。答案:b3解析:考查动物细胞培养技术的应用前景。动物细胞培养技术的应用是多方面的,许多有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产;利用烧伤病人皮肤的健康细胞可培养出人工皮肤;利用细胞培养还可以检测有毒物质;培养各种正常的或病变的细胞,可用于生理、病理、药理等方面的研究。答案:d4解析:胃蛋白酶在ph7时就会变性失活,而细胞培养的ph一般是7.27.4。答案:c5解析:动物细胞培养的目的主要是利用有丝分裂的原理,获得大量具有相同遗传特性的细胞;通常培养前要将动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间,这样组织就会分散开;分散的细胞在培养瓶中很快就贴附在瓶壁上生长,当生长到细胞间表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,即接触抑制;通过细胞培养技术只能获得大量的细胞或细胞产物,而不能获得完整的动物个体。答案:b6解析:细胞增殖过程中存在接触抑制现象,需用胰蛋白酶处理后再分瓶培养;在细胞培养过程中,部分细胞的遗传物质发生改变,会增加细胞分裂的次数;活细胞的细胞膜具有选择透过性,大分子染料无法进入细胞内部,因此不能着色;进行器官移植时,会发生免疫排斥,移植的器官会被机体当作抗原。www.答案:(1)相互接触接触抑制单层(或一层)胰蛋白酶www.(2)衰老甚至死亡癌变降低减少(3)由于活细胞的细胞膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细胞的细胞膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色)(4)中(5)冷冻(或超低温、液氮)酶新陈代谢(6)抗原第2节 植物组织培养一、选择题1可以成为植物组织培养条件的是()co2有机物生长素细胞分裂素水矿质元素a bc d2下列各项关于植物细胞工程的叙述,正确的是()a植物细胞只要在离体状态下即可表现出全能性b制备原生质体时可利用酶或植物激素去除细胞壁c愈伤组织经过细胞的增殖会形成新的植物组织、器官d叶肉细胞经脱分化形成愈伤组织离不开植物激素的作用3下列不属于植物组织培养的用途的是()a快速繁殖 b生产新品种c生产杀虫剂 d生产白细胞介素24在植物组织培养过程中,愈伤组织的形成和形态的发生是十分关键的。这除了需要必备的营养和一些刺激因素外,还需要有诱导作用的物质,即()a铜、锌等微量元素b细胞分裂素和生长素c蔗糖和葡萄糖 d维生素和氨基酸5下列有关植物组织培养的叙述,正确的是()a愈伤组织是一团有特定形态和功能的薄壁细胞资*源%库 b二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株c用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子d植物耐盐突变体可通过添加适量nacl的培养基培养筛选而获得二、非选择题6下图所示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作接入试管后,在一定的条件下形成试管苗的培育过程。请据图回答下列问题。(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。营养物质包括_和小分子有机物,激素包括细胞分裂素和_两类植物激素。(2)此过程依据的原理是_。a 和 b阶段主要进行的分裂方式是_,b 阶段除了细胞分裂外,还进行细胞_等。资*源%库(3)此过程要进行_操作。b阶段需要光照,原因是_。(4)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞中有叶绿素,这是基因_的结果。7转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。质粒上有pst 、sma 、ecor 、apa 四种限制性内切酶切割位点。请回答下列问题。(1)构建含抗病基因的表达载体a时,应选用限制性内切酶_,对_进行切割。(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体a中含有 _,作为标记基因。www.(3)香蕉组织细胞具有_,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_。8科学家将分离得到的成熟的胡萝卜韧皮部细胞进行如下图所示的处理,最终由单个细胞发育成了完整的新植株。请回答下列问题。z(1)科学家所用的这种生物技术叫做_。该技术表明,当植物细胞处于离体状态时,在一定的营养物质、_和其他外界条件的作用下,可能表现出_,发育成完整植株。(2)图中b过程称为_。通过b过程产生的愈伤组织细胞与根韧皮部细胞形态结构_(填“相同”或“不同”),其根本原因是_。(3)某课外小组同学用愈伤组织同时进行了两组实验:甲组培养基中含3%的蔗糖,乙组培养基中不含蔗糖,经灭菌后接种,每组实验再分成两个小组,分别在光下和暗处培养。1个月后,观察植物体生长、分化情况,结果如下表所示。培养条件甲组乙组光下正常生长,分化不生长,死亡暗处正常生长,不分化不生长,死亡由此得出的结论是:_;_参考答案1解析:植物组织培养的条件是营养物质、激素和其他适宜条件。答案:c2解析:植物细胞表现出全能性的前提条件是处于离体状态,同时也需要其他条件配合,如需要一定的营养物质、激素、环境条件等;制备原生质体时可利用酶去除细胞壁,但植物激素无法去除细胞壁;愈伤组织形成新的植物组织、器官的过程是分化,而不是增殖;植物组织培养过程中的脱分化和再分化过程都需要由植物激素诱导。答案:d3解析:白细胞介素2是由效应t细胞产生的,与植物组织培养无关。答案:d4解析:微量元素的作用是满足植物对各种矿质元素的需求,参与各种物质的合成及代谢调节;在植物组织培养过程中,培养基中通常添加蔗糖而非葡萄糖,蔗糖可以作为重要营养成分;维生素可以促进离体组织的生长;细胞分裂素和生长素可以诱导高度分化的植物细胞脱分化形成愈伤组织,也可诱导愈伤组织再分化成为植株。答案:b5解析:愈伤组织是一团无固定形态的薄壁细胞。二倍体植株的花粉经脱分化与再分化处理后会得到单倍体植株,然后再经秋水仙素处理,才能得到能稳定遗传的二倍体植株。胚状体外包上人工薄膜,可制成人工种子,而愈伤组织不可以。答案:d6解析:进行植物组织培养,要将离体的植物组织、器官或细胞接种到经灭菌处理的培养基中,培养基含有组织细胞生长发育所需要的无机物和小分子有机物,还有调节细胞脱分化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育到试管苗,脱分化阶段细胞进行有丝分裂,再分化阶段愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗,此阶段需要光照,原因是叶中叶绿素的合成需要光照条件。 答案:(1)无机物生长素(2)细胞的全能性有丝分裂分化资*源%库 (3)无菌芽发育成叶, 叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件(4)选择性表达7解析:(1)抗病基因在pst 与ecor 之间,所以应选用限制性内切酶pst、ecor,对含抗病基因的 dna、质粒进行切割。(2)抗卡那霉素基因应是标记基因,根据是否能在含卡那霉素的培养基上生长来判断是否有抗病基因。$来&源:(3)植物组织培养过程包括外植体脱分化形成愈伤组织、愈伤组织再分化形成根和芽或胚状体、试管苗的形成等。答案:(1)pst、ecor含抗病基因的dna、质粒(2)抗卡那霉素基因(3)全能性脱分化、再分化8答案:(1)(植物)组织培养(植物)激素全能性(2)脱分化不同基因的选择性表达(3)愈伤组织的生长、分化过程需要蔗糖光能够促进细胞分化第3节 细胞融合技术一、选择题1能使动物细胞融合的特有的诱导因子是()a离心b灭活的病毒c电刺激 d振动2要获得一个杂种植株需要下列哪些步骤?()a分离原生质体诱导原生质体融合组织培养得到杂种植株b分离原生质体原生质体杂种植株c获取细胞原生质融合组织培养杂种植株d获取细胞原生质融合组织培养3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括()细胞培养细胞融合胚胎移植细胞核移植a b c d4植物体细胞杂交是利用不同物种的两个体细胞融合成一个杂交细胞的过程。该过程是指()a不同植物的精子与卵细胞的融合b不同植物的原生质体的融合c完整的两个植物体细胞的融合d植物花粉细胞的两两融合5用细胞工程技术将天竺葵与香茅草杂交产生了驱蚊香草,有关培育过程的叙述错误的是()a需要用酶解法制备原生质体b愈伤组织的代谢类型是自养需氧型资*源%库zc克服了远缘杂交不亲和的障碍d包含了有丝分裂和细胞分化的过程6单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是()a单克隆抗体的特异性强、理化性质单一b单克隆抗体与抗癌药物结合可制成“生物导弹”c体外培养的b淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体d单克隆抗体是由效应b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌的7利用动物细胞融合技术可以获得杂交瘤细胞,下列针对单个杂交瘤细胞的叙述不正确的是()a需经筛选过程方可获得b具有双亲细胞的遗传物质c可分泌多种特异性抗体d体外培养条件下可大量繁殖8下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述,不正确的是()a制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养b需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞c需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞d利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞9(2012上海高考)以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏b淋巴细胞,再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞克隆群,由此筛选出的单克隆杂交瘤细胞所产生的抗体()a能识别绵羊整个红细胞www.b只识别绵羊红细胞表面的特定分子c能识别绵羊所有体细胞d只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子二、非选择题10现有两种不同属的农作物,甲植物高产不耐盐,乙植物低产但耐盐; 欲培育出既高产又耐盐的植株,以适应盐碱地栽培。请回答下列问题。(1)采用_(杂交、嫁接、基因工程)方法可以达到上述目的,这种育种方法的优点是_。www.(2)如采用细胞工程育种,做法如下:甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是_。以胚状体为材料经过人工薄膜包装得到的人工种子,在适宜条件下,同样能够萌发成幼苗,与天然种子相比,人工种子具有哪些显著的优点 ?(列举2条)_。11人类在预防与治疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为rna病毒,该病毒表面的a蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图所示。请回答下列问题。(1)过程代表的是_。(2)过程构建a基因表达载体时,必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_,获得的x是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行核酸序列比较;或用图中的 _进行特异性结合检测。12下图表示高等动植物细胞融合的部分过程,请据图回答下列问题。(1)若上图表示植物体细胞杂交的部分过程,欲将丁细胞培育成植株,可选用_技术,这一技术的两个关键步骤是_和_。(2)若上图表示制备单克隆抗体的部分过程,甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞,则乙细胞为_。在分离乙细胞之前,应对小鼠进行的处理是_。过程区别于植物细胞常用的诱导因素是_,过程可利用_培养基进行筛选,筛选得到的丁细胞还需进行_和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。上述制备过程涉及的生物技术有_。参考答案1答案:b2解析:获得一个杂种植株首先要分离得到原生质体,再诱导原生质体融合,最后通过组织培养获得杂种植株。答案:a3解析:单克隆抗体的制备属于细胞工程范畴,主要包括细胞融合和细胞培养两大技术。$来&源:答案:a4解析:精子与卵细胞属于生殖细胞,所以二者的融合不属于体细胞杂交;两个完整的植物体细胞由于有细胞壁无法融合,必须去除细胞壁,去除细胞壁的植物细胞叫原生质体,因而植物体细胞杂交的实质是不同植物的原生质体的融合。答案:b5解析:在植物组织培养过程中,由培养基中的糖类提供能量,愈伤组织并不通过光合作用自己制造有机物,所以其代谢方式属于异养。答案:b6解析:单克隆抗体具有特异性强、理化性质单一等特点。可以与抗癌药物结合制成“生物导弹”。杂交瘤细胞可以分泌单克隆抗体,而b淋巴细胞在体外培养过程中会很快死亡,所以c项错误,d项正确。答案:c7解析:单克隆抗体制备过程中,需要对融合细胞、杂交瘤细胞进行筛选,选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,进一步培养获得单克隆抗体。一种杂交瘤细胞只能产生一种特异性抗体。答案:c8解析:生物导弹由单克隆抗体与药物、酶或放射性同位素配合而成,因带有单克隆抗体而能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,由其携带的药物产生治疗作用。答案:d9解析:单克隆抗体具有特异性强的特点,只能针对特定的抗原。本题中的抗原是绵羊红细胞表面的特定分子,并非整个红细胞,也非其他体细胞,故b选项正确。答案:b10解析:因为两种植物之间存在着远缘杂交不亲和的障碍,而嫁接则不适于产量、抗逆性等性状的组合,所以只能选择基因工程的方法,基因工程的方法可以打破远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的性状。采用细胞工程育种,即采用植物体细胞杂交的手段:先将两个物种的细胞用酶水解的方法去掉细胞壁,获得原生质体
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