北师大版选修一 4.3 聚合酶链式反应技术 作业.doc

聚合酶链式反应技术基础达标知识点一pcr的原理1下列关于pcr的描述中，不正确的是 ()a是一种酶促反应b引物决定了扩增的特异性cpcr反应中的目的片段一般以2n指数扩增d扩增对象是氨基酸序列2dna扩增过程中，dna片段经若干次扩增，与其数目的理论值变化相符的图是 ()3dna的复制需要引物，其主要原因是 ()a可加快dna的复制速度b引物可与dna母链通过碱基互补配对结合c引物的5端有助于dna聚合酶延伸dna链ddna聚合酶只能从3端延伸dna链4如图为dna变性和复性示意图，下列相关说法正确的是 ()a向右的过程为加热(80100 )变性的过程b向左的过程是dna双链迅速致冷复性c变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同d图中dna片段共有4个游离的磷酸基、4个3端知识点二dna片段的pcr扩增和产物检测5pcr技术扩增dna，需要的条件是 ()目的基因引物四种脱氧核苷酸dna聚合酶mrna核糖体a bc d6用15n标记的一个dna分子放在含14n的培养基中复制三次，含15n的dna分子占全部dna分子的比例和含15n的dna单链占全部dna单链的比例依次是 ()a1/4,1/6 b1/4,1/8c1/2,1/8 d1/2,1/47下图所示为pcr扩增的产物，请分析此产物是哪次循环的产物 ()a第一次循环 b第二次循环c第三次循环 d第四次循环8下列关于琼脂糖凝胶电泳检测pcr扩增产物的说法中不正确的是 ()a在dna样品中加入0.2倍体积的载样缓冲液混匀b当指示剂电泳到凝胶底部时，切断电源c电泳后将胶板浸入溴酚蓝溶液中染色510 mind在紫外透射仪上观察电泳条带能力提升9下列关于pcr操作过程的叙述，错误的是 ()apcr实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌bpcr所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在20 储存cpcr所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化d在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换10关于pcr技术的应用，错误的一项是 ()a化石样品分析、刑侦破案、dna序列测定b诊断遗传病、基因克隆、化石样品分析cdna序列测定、基因克隆、刑侦破案d诊断遗传病、合成核苷酸、dna序列测定11pcr利用了dna的热变性原理，pcr仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。下列关于pcr过程中“温度的控制”的说法中，错误的是 ()apcr反应需要高温，是为了确保模板是单链b延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度c要用耐高温的dna聚合酶d需要耐高温的解旋酶12在pcr扩增dna的实验中，预计一个dna分子经过30次循环后，应该得到230个dna分子，但是结果只有约210个dna分子，那么出现该现象的原因不可能是 ()ataq dna聚合酶的活力不够，或活性受到抑制b系统设计欠妥c循环次数不够d引物不能与亲链结合13pcr一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物延伸而成的dna单链做模板时将 ()a仍与引物结合进行dna子链的延伸b无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链c同时与引物和引物结合进行子链延伸d与引物结合进行dna子链的延伸14近20年来，pcr(多聚酶链式反应)技术成为分子生物学实验室的一种常规实验手段，其原理是利用dna半保留复制，在试管中进行dna的人工复制(如图)，在短时间内，将dna扩增几百万倍甚至几十亿倍，从而使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热使dna双链间的_键完全打开，称为_；而在细胞中是在_酶的作用下进行的。(2)如果只需要大量克隆模板dna中间的某个特定区段，应该加入_种特定的引物。当温度降低至40 时，引物与两条“舒展”的模板的特定位置结合，在dna聚合酶的作用下，只能在引物的_端连接脱氧核苷酸，两条子链的延伸方向都是_。(3)pcr技术的必需条件，除了模板、原料、酶之外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的_和_，前者由_自动调控，后者则靠_来维持。(4)通过pcr技术使dna分子大量复制，如果将一个用15n标记的dna分子放入试管中，以14n标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次之后，则15n标记的dna分子占全部dna分子总数的比例是_。15pcr技术有效地解决了因为样品中dna含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种taq dna聚合酶。请回答有关问题：(1)体内dna复制过程中用解旋酶打开双链dna，而pcr技术中应用_。(2)taq dna聚合酶是从水生耐热细菌taq中分离的。为什么taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？_。taq dna聚合酶的功能是_。taq dna聚合酶的化学本质为蛋白质，可用_法和_法进行分离。(3)与体内dna复制相比较，pcr反应要在_中才能进行，并且要严格控制_条件。(4)pcr中加入的引物有_种，加入引物的作用是_。个性拓展16pcr技术是一种体外迅速扩增dna片段的技术，操作步骤简介如下：第步：准备“汤”和模板dnaa配制多聚酶链式反应“汤”配方：无菌水100 spu缓冲液 15 spu氯化镁溶液 8 spu引物 3 spu引物 3 spudna聚合酶 1 spu矿物油 1 spudntp每一种各加 4 spu注：spu是一种溶液的计量单位；矿物油可防止聚合酶在冻结时受伤害，以保证酶的活性；dntp有四种：datp、dgtp、dctp、dttp。b准备要拷贝的dna如果要拷贝自己的dna，可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热使蒸馏水沸腾，使细胞破碎释放出dna。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的dna。第步：多聚酶链式反应将dna(b)放入汤(a)中。水浴加热。首先，94 ，使dna双螺旋打开，历时1 min；然后，40 ，使引物结合到dna上，历时30 s；最后，72 ，与dna聚合酶结合使dna复制，历时1 min。重复步骤。每重复一次，即完成一次拷贝。根据上述操作过程回答下列问题：(1)以上材料可以说明 ()adna的复制必须在活细胞中才能完成bdna能指导蛋白质的合成c在合适的条件下，非细胞环境也能进行dna的复制dpcr技术是一种无性生殖技术(2)若用人体细胞内的遗传物质做pcr扩增，则扩增后的几百亿个dna分子起码可分为46种。要将其分开，可用电泳、染色等技术，常用的试剂有溴化乙锭等。有些试剂毒性较强，因此应戴上化学实验专用手套作为保护措施，以避免其与皮肤接触。溴化乙锭是一种强烈的诱变物，若接触皮肤活细胞，很可能会引起 ()a基因重组b该个体会产生变异较大的后代c癌变d皮肤外层是死细胞，该物质接触皮肤后对人体不会有影响(3)pcr技术中用到的dna聚合酶，取自生长在热泉中的一种细菌。就pcr技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的dna聚合酶的优势是_。(4)pcr技术能将某一dna分子扩增成许多相同的dna片段，原因是：dna分子具有_结构；dna复制时遵循_原则。(5)dna分子进行扩增时，除了所要扩增的dna片段外，还需要四种_、_和_等条件。若已知dna的一条单链的碱基组成为atccgat，则与它互补的另一条单链的碱基组成为_。答案1d2c3d4a 5a6b7a8c9c10d11d12d13d14(1)氢解旋解旋(2)两3从子链的5端向3端延伸(3)温度酸碱度