食品问题分析及对策.doc

苏丹红的特性与检测姓名：袁德生 学号：0902061018 班级：09食品（1）摘要； “苏丹红”是一种化学染色剂，并非食品添加剂。它的化学成份中含有一种叫萘的化合物，该物质具有偶氮结构，由于这种化学结构的性质决定了它具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。苏丹红属于化工染色剂，主要是用于石油、机油和其他的一些工业溶剂中，目的是使其增色，也用于鞋、地板等的增光。 又名“苏丹”。关键词；苏丹红 液相色谱 挚爱 化学结构1 范围本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。本标准规定了食品中苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红的高效液相色谱测定方法。方法最低检测限：苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红均为10ug/kg.苏丹红的基本信息：（1）.苏丹红是一种人工合成的红色染料，常作为一种工业染料，被广泛用于如溶剂、油、蜡、汽油的增色以及鞋、地板等增光方面。 （2）.物理性质：黄色粉末，熔点为134 ，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于油脂、矿物油、丙酮和苯。乙醇溶液呈紫红色，在浓硫酸中呈品红色，稀释后成橙色沉淀（3）.结构式和化学式： 苏丹红为亲脂性偶氮化合物，主要包括、和四种类型。 苏丹红I(SudanI)：化学名称为1-苯基偶氮-2-萘酚(1-phenylazo-2-naphthalenol)，结构式为C6H5=nC10H6OH。苏丹红II（SudanII）：化学名称为1-(2,4-二甲基苯)偶氮-2-萘酚(1-(2,4-dimethylphenyl)azo-2-naphthalenol)。（4）苏丹红在体内的代谢过程：进入体内的苏丹红主要通过胃肠道微生物还原酶、肝和肝外组织微粒体和细胞质的还原酶进行代谢，在体内代谢成相应的胺类物质。在多项体外致突变试验和动物致癌试验中发现苏丹红的致突变性和致癌性与代谢生成的胺类物质有关。 苏丹红I在体内可以被还原代谢为初级产物苯胺（aniline）和1-氨基-2-萘酚（1-amino-2-naphthol）。 苏丹红II在体内代谢可产生二甲基苯胺（2,4-xylidine）和1-氨基-2萘酚。 苏丹红III在体内代谢可产生4氨基偶氮苯（4-aminoazobenzene）、1-氨基-2萘酚、苯胺、对苯二胺（p-phenylenediamine）和1-4氨基-苯基偶氮-2萘酚1-(4-aminophenyl)azo-2-naphthol。 苏丹红IV在体内代谢可产生邻氨基偶氮甲苯（ortho-aminoazotoluene）、4-氨基-2-甲苯基偶氮-2-萘酚1-(4-amino-2-methylphenyl)azo-2-naphthol、2,5-二氨基甲苯（2,5-diaminotoluene）、1-氨基-2萘酚和 邻-甲苯胺（ortho-toluidine）。 苏丹红的危害性评价： (1)致癌性 国际癌症研究机构将苏丹红I归为三类致癌物，即动物致癌物，主要基于体外和动物试验的研究结果尚不能确定对人类有致癌作用。肝脏是苏丹红I产生致癌性的主要靶器官，此外还可引起膀胱、脾脏等脏器的肿瘤。 （2)遗传毒性 研究显示，苏丹红 I 在S-9存在的条件下，对沙门氏伤寒杆菌具有致突变作用；对小鼠淋巴瘤L5178Y TK+/-细胞具有致突变作用；大鼠骨髓微核试验呈阳性；可增加CHO细胞姐妹染色单体交换。彗星试验表明可引起小鼠胃和结肠细胞的DNA断裂。 (3)致敏性 苏丹红I具有致敏性，可引起人体皮炎。印度妇女习惯使用一种点在前额的Kumkums牌化妆品。但目前有报道称，有人因涂抹kumkum而引发过敏性接触性皮炎。通过气相色谱分析，7个kumkums品牌中有3个可检测到不同浓度的苏丹红I。 (4)代谢产物 代谢产物苯胺和1-氨基-2萘酚：苏丹红I的代谢产物苯胺有毒，依据其对血红蛋白毒性作为敏感终点，其最小观察到有害作用剂量（LOAEL）为7mg/kg/day，但在慢性毒性试验中尚未求出最大未观察到有害作用剂量(NOAEL)。基于通过食品、空气和饮水的暴露途径，依据LOAEL为7mg/kg/day，得出其安全限（MOS）为0.7 106 mg/kgbw/day。有研究显示，人体多次每日摄入0.4mg/kg苯胺可引起血红蛋白毒性。 苯胺在体内外均具有遗传毒性，被IARC列为三类致癌物，尚不能确定对人类有致癌性。动物试验显示，给大鼠喂饲苯胺(72mg/kg)104周，脾脏肿瘤发生率明显升高。 2 术语和定义2.1 苏丹红属偶氮系列化工合成染料。3 方法要点样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。4 试剂与标准品4.1 乙腈色谱纯4.2 丙酮 色谱纯、分析纯4.3 甲酸 分析纯4.4 乙醚 分析纯4.5 正己烷 分析纯4.6 无水硫酸钠 分析纯4.7 层析柱管：1cm（内径）5cm（高）的注射器管。4.8 层析用氧化铝（中性100目200目）：105干燥2h，与干燥器中冷至室温，每100g中加入2mL水降活，混匀后密封，放置12h后使用。 注：不同厂家和不同批号氧化铝的活度有差异，须根据具体购置的氧化铝产品略做调整，活度的调整采用标准溶液过柱，将1ug/mL的苏丹红的混合标准溶液1mL加到柱中，用5%丙酮正己烷溶液60mL完全洗脱为准，4种苏丹红在层析柱上的流出顺序为苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红，可根据每种苏丹红的回收率作出判断。苏丹红、苏丹红的回收率较低表明氧化铝活性偏低，苏丹红的回收率偏低时表明活性偏高。4.9 氧化铝层析柱：在层析柱管底部塞入一薄层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝至3cm高，轻敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL正己烷预淋洗，洗净柱中杂质后，备用。4.10 5%丙酮的正己烷液：吸取50mL丙酮用正己烷定容至1L。4.11 标准物质：苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红；纯度95%/4.12 标准储备液：分别称取苏丹红、苏丹红、苏丹红及苏丹红各10mg（按实际含量折算），用乙醚溶解后用正己烷定容至250mL。4 仪器与设备5.1 高效液相色谱仪（配有紫外可见光检测器）5.2 分析天平：感量0.1mg5.3 旋转蒸发仪5.4均质机5.5 离心机5.6 0.45um有机滤膜6 样品制备将液体、浆状样品混合均匀，固体样品需磨细。7 操作方法7 . 1 仪器与试剂 Wa t e r s 2 6 9 0高效液相色谱仪配紫外检测器; A c c u r e p M P S T M 凝胶渗透色谱净化系统; L A B C O N C O快速氮吹仪。 苏丹 I 号、苏丹I I 、苏丹I I、苏丹N、苏丹R,对位红标准品;乙睛为色谱纯;环己烷、乙酸乙酷、无水硫酸钠为分析纯;7 . 2 方法7. 2 . 1 提取超纯水由Mi l i - Q净化水系统制得。 称取试样2 . 0 0 g ，准确加入环己烷:乙酸乙醋( l : l ) I O m l ，用超声波提取3 0 m i n 。 辣椒油样品称取1 . 0 0 乡直接用环己 烷:乙酸乙M 定容到l O m l 混匀。含水试样需经无水硫酸钠脱水后再进行净化。7 . 2 . 2 G P C净化 G P C 色谱条件:色谱柱为E x p r e s s M C o l u m n ;流动相为环己烷:乙酸乙酷( 体积比1 : 1 ) ;进样量为0 . 5 m 1 ;收集时P a 段为9 -1 7 . 5 mi n o G P C色谱图见图t o 提取液按上述条件进凝胶渗透色谱仪进行净化、收集，收集液在氮吹仪上吹干，再用乙睛定容到0 . 5 ml ,待液相色谱分析。7 . 2 . 3 H P L C色谱条件 色谱柱为D i a m o n d ( 钻石) C 1 8 ( 2 5 0 m m X 4 . 6 m m i . d，5 4 m ) ;流动相为乙睛: 水( 体积比为9 5 : 5 ) ;流速:l m l /mi n ;柱温:3 0 C;检测波长:5 0 0 n m;进样量:3 0 1 1 .2 结果与分析2 . 1 提取溶剂的选择提取溶剂可选用甲醇、乙睛、正己烷等溶剂，它们的提取效率都满足要求。本方法中凝胶渗透色谱流动相为环己烷:乙酸乙酷( 体积比1 : 1 ) ，为了减少实验步骤，