中图版选修一 测定微生物的数量 作业.docx

测定微生物的数量一、单选题1苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物，某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是（ ）a. 使用平板划线法可以在上获得单个菌落b. 如果要测定中的活细菌数量，常采用稀释涂布平板法c. 图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源d. 微生物培养前，需对培养基和培养皿进行消毒处理【答案】d【解析】图示为平板划线法，可以在上获得单个菌落，a正确；测定活细菌数量常用稀释涂布平板法，b正确；根据题干信息分析可知，图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源，c正确；微生物培养前，需对培养基和培养皿进行灭菌处理，以防止杂菌污染，d错误。2下列关于微生物实验室培养的叙述，错误的是a. 平板划线法是在培养基上连续划线以纯化菌种的接种方法b. 培养霉菌时需将培养基的ph调至中性或微碱性c. 培养硝化细菌可不用在培养基中加有机碳源d. 培养乳酸菌时需要提供无氧条件【答案】b【解析】平板划线法是茬培养基上连续划线以纯化菌种的接种方法，a项正确；培养霉菌时需将培养基的ph调至酸性，b项错误；硝化细菌为自养菌，培养可不用在培养基中加有机碳源，c项正确；乳酸菌为厌氧菌，培养时需要提供无氧条件，d项正确。3要将土壤中的自生固氮菌与其它细菌分离开，应将它们接种在（）a. 含所有营养物质的培养基上b. 无氮的选择培养基上c. 含蛋白胨等营养物质的培养基上d. 加入某种指示剂的鉴别培养基上【答案】b【解析】自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加含蛋白胨等氮源物质，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖，所以b选项正确。【点睛】注意：自生固氮微生物是指在土壤中能够独立进行固氮的微生物，其中多数是一类叫做自生固氮菌的细菌。自生固氮菌中,人们应用得最多的是圆褐固氮菌，其代谢类型是异养需氧型。选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。4南洋东华公司研发了两种石油降解产品bdb-n生物降解菌（厌氧型）和bdb-a生物降解菌（好氧型），降解菌是通过产生酶对石油进行分解的。如图为不同条件下，某种降解菌对某湖泊污泥中石油分解能力的测定结果。下列有关分析错误的是a. 该实验的自变量为ph和污泥含水量b. 该实验的检测指标是2天后污泥中的石油含量c. 该实验中使用的降解菌最可能是bdb-a生物降解菌d. 在不同污泥含水量条件下，降解菌体内酶的最适ph相同【答案】c【解析】分析图解可知，该实验的自变量是ph和污泥含水量，因变量是2天后石油含量，ab正确；根据图中的实验数据分析可知，当污泥含水量6080%、ph=7时，石油含量最少，说明石油降解酶分解能力最强的条件为污泥含水量6080%、ph=7，则该实验用的应该是厌氧菌，即bdb-n生物降解菌，c错误；根据三条曲线的最低点可以判断，在不同污泥含水量条件下，降解菌体内酶的最适ph相同，d正确。【点睛】解答本题的关键是分析曲线图，找出实验的自变量和因变量，判断最适宜的ph和污泥含水量，进而判断出分解菌的类型。 5分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（ ）加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐a. b. c. d. 【答案】b【解析】要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，正确、错误；分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，正确，错误；培养基中需要加碳源即葡萄糖，正确，错误；不需要氮源，故不加硝酸盐，错误，正确，因此b正确。6在做分离分解尿素的细菌实验时，a同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。产生a同学结果的原因可能有（ ） 土样不同 培养基污染 操作失误 没有设置对照a. b. c. d. 【答案】d【解析】同一稀释浓度下菌落数不同，产生a同学结果的可能的原因可能是土样不同、培养基污染，或者操作失误，未达到相应的稀释倍数。7（2010桂林二模）下列有关叙述与细菌生长曲线相符的是（ ）a.细菌只有接种于固体培养基上，才能表现出图示生长曲线b.图中1时期大量合成酶、atp及其他细胞成分c.图中3时期的细菌不再进行增殖d.图中4时期是获取次级代谢产物的最佳时期【答案】b【解析】试题分析：将生长曲线粗分为4个时期：调整期、对数期、稳定期、衰亡期（1）调整期：刚刚接种到培养液中的细菌，由于新旧环境差异，在细菌的细胞内就要重新合成相应的诱导酶，以适应新环境（2）对数期：一方面，调整期为细胞分裂做了充分准备另一方面，营养物质丰富，空间宽裕，ph、温度、o2均适宜，即细胞处于无任何环境阻力的理想条件下；微生物个体间无种内竞争，种群年龄组成为增长型，绝大多数细菌细胞内合成代谢远远大于分解代谢因此出生率远远大于死亡率，导致种群密度上升，出现“j型生长曲线”（3）稳定期：随着种群密度增大，营养物的耗尽、有害代谢产物的积累、ph变化，进而使种群进入稳定期，在稳定期，环境阻力明显加大，年龄组成为稳定型，合成代谢=分解代谢，出生率=死亡率，微生物数目达到最高，整个生长曲线呈“s”型（4）衰亡期：营养物质过度消耗，有害代谢产物大量积累、ph剧烈变化，外界环境对继续生长越来越不利，阻力进一步加大，种内竞争剧烈，出生率远远小于死亡率、呈负生长、种群密度显著下降此阶段生长曲线迅速下降解：a、细菌无论接种于固体培养基上还是液体培养基，均能表现出图示生长曲线，a错误；b、刚刚接种到培养液中的细菌，由于新旧环境差异，在细菌的细胞内就要重新合成相应的诱导酶和atp及其他细胞成分，以适应新环境，b正确；c、进入稳定期后，由于环境条件的改变，繁殖率=死亡率，既有新细胞产生，也有细胞的死亡，活菌数达到最大值，c错误；d、获取次级代谢产物的最佳时期是3稳定期，d错误故选：b点评：本题考查的是微生物生长曲线的有关内容，意在考查学生对微生物代谢知识的掌握情况，以及对相关问题的分析能力8下列有关平板划线的正确操作是a. 是用已灭菌的接种环、培养基，操作过程中不再灭菌b. 打开含菌种的试管后需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c. 把沾有菌液的接种环迅速伸入平板内，划三到五条平行线即可d. 最后将平板倒置放入培养箱中培养【答案】d【解析】平板划线时，是用已灭菌的接种环、培养基，操作过程中仍需灭菌，因为接种环会感染细菌，a项错误；打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞，b项错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，c项错误；最后待平板冷却凝固后将平板倒置放入培养箱中培养，可以使培养皿表面的水分更好低挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养皿造成污染，d项正确。9急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的，因此检测饮用水中的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施检测水中大肠杆菌的含量时，通常将水样进行系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为（ ）a. 稀释涂布平板法 b. 平板划线法 c. 显微镜直接观察法 d. 目测估计法【答案】a【解析】稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，a正确；平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，b错误；利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量，c错误；目测估计法不适合微生物的计数，d错误。10下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是a. 分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶能分解尿素产生氮气b. 将实验组和对照组平板倒置后，15恒温培养810小时c. 统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在300以上的平板进行计数d. 用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红【答案】d【解析】分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳，a错误；将实验组和对照组平板倒置后，37恒温培养2448小时，b错误；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300以上的平板进行计数，求其平均值，c错误；用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，d正确。11两种刚果红染色法的结果是()a. 均出现透明圈b. 均不出现透明圈c. 方法一出现，方法二不出现d. 方法一不出现，方法二出现【答案】a【解析】常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；另一种是在倒平板时就加入刚果红，两种方法均会出现透明圈，故本题正确答案为a。12下列检测某熟制食品中大肠杆菌是否超标的实验操作，不合理的是a. 待检测食品需要经过灭菌操作后取样检测b. 应设置未接种的培养基，作为实验的对照c. 用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数d. 接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养【答案】a【解析】待检测食品灭菌后会将大肠杆菌杀死，则不能检测大肠杆菌是否超标，a错误；应设置未接种的培养基，作为实验的对照，b正确；用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数，c正确；接种后应该将培养皿倒置，并在适宜温度下培养，d正确。13下列有关微生物培养的叙述，正确的是 （）a. 测定土壤样品中的细菌数目，常用平板划线法进行计数b. 在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌c. 酵母菌发酵过程产生的酒精，对其生长没有影响d. 鉴定能分解纤维素的细菌时，需要在培养基中加入刚果红染料【答案】d【解析】平板划线法只能用于微生物的分离，不能用于微生物的计数，微生物的计数可以用稀释涂布平板法，a错误；在对微生物进行培养前，需要对培养基进行灭菌，但是微生物不能灭菌，b错误；酵母菌发酵过程产生的酒精，对其生长有影响，当酒精浓度达到一定值时，会对自身造成毒害，c错误；鉴定能分解纤维素的细菌时，需要在培养基中加入刚果红染料，d正确。14如下图所示,自来水经滤膜过滤后,转移到牛肉膏蛋白胨培养基上,适宜条件下培养48 h,染色后统计变色菌落数目为165个。下列说法正确的是 ( ) a. 若培养基含伊红美蓝,大肠杆菌菌落呈蓝绿色b. 自来水中大肠杆菌浓度是33个l-1,比真实值偏大c. 为了提高准确度,需设重复实验,但不用空白对照d. 若培养基菌落数目大于300,可适当减少自来水量【答案】d【解析】若培养基含伊红-美蓝，大肠杆菌菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽，a错误；自来水中大肠杆菌浓度是1655=33个/l，由于两个或多个大肠杆菌可能长成一个菌落，因此比真实值偏小，b错误；为了提高准确度，需设重复实验，同时需要设置空白对照，c错误；若培养基菌落数目大于300，说明细菌数目较多，可适当减少自来水量，d正确。15（2013徐州模拟）下列高中生物的实验中必须使用无菌水的是（ ）a.将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释b.破碎鸡血细胞获得含有dna的滤液c.配制培养大肠杆菌的固体培养基d.制备固定化酵母细胞时活化干酵母【答案】a【解析】试题分析：解答时注意实验中用的是蒸馏水还是无菌水，将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释，防止杂菌污染，必须使用无菌水；破碎鸡血细胞获得含有dna的滤液用蒸馏水；配制培养大肠杆菌的固体培养基可以用蒸馏水，然后高压蒸汽灭菌；制备固定化酵母细胞时活化干酵母用蒸馏水解：a、将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释，防止杂菌污染，必须使用无菌水，a正确；b、破碎鸡血细胞获得含有dna的滤液用蒸馏水，b错误；c、配制培养大肠杆菌的固体培养基可以用蒸馏水，然后高压蒸汽灭菌，c错误；d、制备固定化酵母细胞时活化干酵母用蒸馏水，d错误故选：a点评：本题考查了实验操作中材料的使用，考查了学生的实验操作能力和应用能力，试题难度中等16焦化厂活性污泥中富含难降解的有机物苯甲酰肼,是当前焦化行业环保治理的难点。某同学通过查阅资料发现可通过微生物降解方法处理焦化厂污染物。下列有关分析错误的是（ ）a. 应该从农田土壤中筛选目的菌b. 配制以苯甲酰肼作为唯一碳源的选择培养基进行筛选c. 利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化d. 逐步提高培养基中苯甲酰肼的浓度可以得到能高效降解污染物的优质菌株【答案】a【解析】能降解焦化厂污染物的细菌生物应生活在有焦化厂污染物的环境周围，故应从焦化厂活性污泥（焦化厂污染物）中筛选，a错误；培养基中应用苯甲酰肼为唯一的碳源，作为选择培养基，b正确；利用平板划线法可以对初步筛选出的目的菌进行纯化，c正确；若要选出高效降解污染物的优质菌株，可采用逐步提高苯甲酰肼浓度进行筛选，培养出的目的菌经稀释涂布分离后得到单一菌落为纯化的细菌，d正确。17下列有关实验的叙述错误的是a. 肺炎双球菌体外转化实验可以证明蛋白质不是遗传物质b. 低温诱导洋葱染色体数目变化的实验中，用改良的苯酚品红染液进行染色，观察到视野中既有正常的二倍体细胞，也有染色体数目发生改变的细胞c. 用抽样检查法统计培养液中酵母菌种群数量变化时，先用吸管吸取培养液，滴于计数室内，再将盖玻片放在计数室上，多余培养液用滤纸吸取d. 健那绿染液可以使我细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近于无色【答案】c【解析】a. 肺炎双球菌体外转化实验可以证明蛋白质不是遗传物质，a正确；b. 部分细胞不分裂，不会受低温影响，部分细胞分裂，能被低温诱导染色体数目加倍，b正确；c. 用吸管吸取培养液之前，要先摇匀，c错误；d. 健那绿染液将线粒体染成蓝绿色，而细胞质接近于无色，d正确。18产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）a. 一个细菌、液体培养基 b. 许多细菌、液体培养基c. 一个细菌、固体培养基 d. 许多细菌、固体培养基【答案】c【解析】菌落是一个细菌的子细胞群体，在固体培养基上，有一定的形态结构，肉眼可见（液体培养基中肉眼不可见），菌落可作为菌种鉴别的重要依据。19有关平板划线操作正确的是a. 使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再进行灭菌处理b. 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c. 将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可完成平板划线操作d. 将划线结束后的平板倒置，放入培养箱中培养【答案】d【解析】使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中接种环需要再灭菌，a错误；打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞即可，b错误；将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线，灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线重复上述过程，完成三、四、五区域内划线注意不要将第五区的划线与第一区划线相连，c错误；划线操作结束后，将平板倒置，放入恒温培养箱中培养，d正确。【点睛】理清平板划线操作的过程：将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划35条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线，重复上述过程，完成三、四、五区域内划线，注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在培养箱中培养。20“培养液中酵母菌种群数量变化”实验中所用的血球计数板如图1所示，图2是其计数室某一个方格中酵母菌的分布示意图，有关叙述错误的是（ ）a. 吸取培养液前应将培养瓶轻轻振荡b. 培养液中酵母菌数目较多时，样液可稀释后再取样计数c. 先将培养液滴在图1的计数室上后，再盖上盖玻片d. 图2的方格中酵母菌的数量应计为7个【答案】c【解析】培养过程中，酵母菌可能会沉在试管底部，如果取样取的是试管底部，实验数据则会偏大，如果取样取的是试管上部，则实验数据则会偏小，因此制片前要轻轻震荡试管使酵母菌分布均匀，a正确；培养液中酵母菌数目较多时，尤其到了后期培养液中菌体数量多，不易计数，因而为了便于计数先要进行稀释再计数，b正确；利用血细胞计数板时，应先放置盖玻片，在盖玻片的边缘滴加培养液，待培养液从边缘处自行渗入计数室，吸去多余培养液，再进行计数，c错误；该方格中酵母菌的数量应计为7个，只计数内部和相邻两边及其夹角处的酵母菌，d正确。【点睛】本题综合考查培养液中酵母菌种群数量变化实验的相关知识。解答本题的关键是熟记血细胞计数板的使用方法。21筛选出纤维素分解菌后还需要用下列哪一实验来确定()a. 发酵产纤维素酶 b. 发酵产生纤维素c. 纤维素酶分解滤纸 d. 纤维素分解产生葡萄糖【答案】a【解析】纤维素分解菌因能产生纤维素酶，所以具有分解纤维素能力。因此筛选出该菌后还需通过发酵产生纤维素酶来确定是否为所需要的菌种，所以选a。22反刍动物能以富含纤维素的草料为食，是因为它们有特殊的器官瘤胃， 瘤胃中生活着许多微生物，其中有一些微生物能分解纤维素，反刍动物胃内这些分解纤维素的微生物的代谢类型最可能是()a. 自养需氧型 b. 异养厌氧型 c. 异养需氧型 d. 自养厌氧型【答案】b【解析】纤维素分解菌依靠分解纤维素获得的葡萄糖进行细胞呼吸得到能量，所以为异养型；而动物胃内氧气很少，纤维素分解菌进行的是无氧呼吸，为厌氧型；综上分析，选b。23下列有关微生物实验室培养的说法正确的是（）a. 在对微生物培养前，需对微生物和培养基进行灭菌处理b. 分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源c. 用于培养不同微生物的培养基均应将ph调至中性或微碱性d. 稀释涂布平板法和平板划线法均可用于统计待测菌液中的活菌数目【答案】b【解析】在对微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，不能对微生物进行灭菌处理，a错误；分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源，b正确；配置培养不同微生物的培养基时都要将ph调至能够满足该种微生物的需要，如用于培养细菌的培养基应将ph调至中性或微碱性，而用于培养真菌的培养基应将ph调至碱性，c错误；稀释涂布平板法可用于统计待测菌液中的活菌数目，而平板划线法不可用于统计待测菌液中的活菌数目，d错误。【点睛】理清微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落（该方法可用于微生物的计数）。24有关平板划线操作正确的是()a. 灼烧接种环后，为避免其他杂菌的干扰，应立即伸入菌液取菌种b. 划线结束后，为避免实验菌污染环境和感染操作者，必须再次灼烧接种环c. 在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同d. 划线时最后一区域一定要与第一区域相连，达到首尾相接【答案】b【解析】接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，a错误；划线结束后，为避免实验菌污染环境和感染操作者，必须再次灼烧接种环，b正确；在第一次划线前灼烧接种环是为了消灭杂菌，每次划线前灼烧接种环是为了杀灭残留的目的菌种，c错误；划线时要避免最后一区的划线与第一区线连，因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，d错误。【点睛】解答本题的关键是明确每次操作前都需要灭菌，但是与第一次操作前的灭菌的目的不同，且注意最后因此的划线千万不要与之前的任何一条相连。25某学者欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是()a. 利用平板划线法对细菌进行计数b. 利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌c. 采用涂布平板法分离菌种d. 称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁操作【答案】a【解析】平板划线法能对细菌分离纯化但不能计数，通常将被石油污染过的土壤浸出液稀释后，采用涂布平板法分离分解石油的细菌菌种，并对菌种进行计数，a项错误，c项正确；筛选能分解石油的细菌只能利用以石油为唯一碳源的选择培养基，b项正确；称取土壤和稀释土壤溶液过程中的每一步都要在火焰旁操作，d项正确。【点睛】培养纯净微生物的关键是防止杂菌感染。26淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。下列实验步骤中不正确的是（ ）a. 将生产菌株分为两组，实验组用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理b. 制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养基，并进行灭菌处理c. 把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养d. 观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株【答案】d【解析】本实验的目的是利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株，需要有对照实验，所以对照组是不做处理的菌株，实验组是用一定剂量的诱变剂处理菌株，a正确。培养基中至少要包括水、无机盐、氮源和碳源，因为是分解淀粉的酶，所以要以淀粉为碳源，培养基要进行高压蒸汽灭菌，b正确。因为诱变育种利用的是基因突变，基因突变具有不定向性，所以实验组应多做几个，即把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养。观察两组菌株的菌落周围透明圈大小，选择透明圈比对照组大的为所需菌株，d错误。27在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有（ ）土样不同培养基污染操作失误没有设置对照a. b. c. d. 【答案】a【解析】土样不同可能导致计数偏差，正确；培养基污染，会导致菌落增多，正确；操作失误可能增加微生物的数量和种类，菌落会增多，正确；没有设置对照不会影响菌落数目，错误。28在做分离“分解尿素的细菌”实验时，a同学从对应106培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落下列有关叙述不正确的是（）a. a同学出现这种结果的原因可能是土样不同b. 可以将a同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染c. 让其他同学用与a同学一样的土壤进行实验，如果结果与a同学一样，则可证明a同学无误d. b选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，而c选项的没有【答案】d【解析】甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，a正确；a同学的实验结果可能是培养基污染造成的，可以将a同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，b正确；如果是a同学实验操作过程中污染造成的，让其他同学用与a同学一样的土壤进行实验，如果结果与a同学一样，则可证明a同学无误，c正确；b选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而c选项的也有对照实验，d错误。【点睛】本题主要考查微生物培养的相关知识，意在强化学生微生物实验操作遵循的原则及其运用，生物实验应遵循对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。29用稀释涂布平板法统计样品中细菌的数目时，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验。下列叙述错误的是a. 对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物b. 对照组和实验组的培养基都应该放在相同条件下培养c. 对照组所用培养基的成分及ph大小完全与实验组一致d. 若对照组出现了菌落，则统计结果应减去对照组的菌落数【答案】d【解析】对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对照组，a正确；对照组和实验组的培养基都应该放在相同条件下培养，以保证单一变量，b正确；对照组所用培养基的成分及ph大小完全与实验组一致，以保证单一变量，c正确；若对照组出现了菌落，说明有杂菌污染，应该重做实验，d错误。30漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有若广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是a. 生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品b. 筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落c. 在涂布平板上通过划线获得单菌落d. 斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株【答案】b【解析】生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，a错误；筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，从而获得漆酶菌株，b正确；在涂布平板上长出的菌落，需要再通过平板划线法进一步纯化，c错误；菌种的长期保存应该在低温下进行，d错误。二、非选择题31生物技术与我们的生活息息相关。请根据所学知识，回答下列有关问题：（1）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量会发生变化,测定亚硝酸盐含量的方法是_。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为_，进而可能引发人体细胞癌变。（2）制作葡萄酒的菌种主要来源是_。检验是否产生酒精可在_ 条件下，用_试剂检测。（3）若要提髙果酒的产量,发酵过程中要控制好哪些条件?_ (至少写出两项）。（4）为获得一种能高效降解有机磷农药的细菌，应使用含有_的选择培养基；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，目的是_。【答案】 (1). 比色法 (2). 亚硝胺 (3). 野生的酵母（葡萄皮上的酵母） (4). 酸性 (5). 重铬酸钾 (6). 适宜的温度、ph、通气量等 (7). 有机磷农药 (8). 防止造成环境污染【解析】(1)在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发重氮化反应后，与n1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量，此种测定亚硝酸盐含量的方法为比色法。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为亚硝胺。 (2) 制作葡萄酒的菌种主要来源是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。检验是否产生酒精可在酸性条件下，用重铬酸钾试剂检测。(3) 果酒的制作，选用的菌种为酵母菌，20左右最适合酵母菌繁殖；制作的思路为：发酵瓶中留有一定量的氧气，让酵母菌早期进行有氧呼吸，快速繁殖，以增加酵母菌的数量，当氧气消耗完后进行无氧呼吸产生酒精，而酵母菌的细胞呼吸离不开酶的催化作用。因此，若要提髙果酒的产量,发酵过程中要控制好适宜的温度、ph、通气量等条件。 (4) 为了获得能高效降解有机磷农药的细菌，应选用含有机磷农药的选择培养基进行培养，在该培养基中，只有能降解有机磷农药的细菌才能生长，而其他微生物则不能生长。为了防止造成环境污染，使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理。32下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用_的培养基进行分离，并加入_指示剂进行鉴别。（2）若取土样5g，应加入_ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液，分别吸取0.1ml的稀释液涂布到固体培养基上，这种接种方法称为_。某同学用该方法接种后，在某个平板上没有得到菌落，可能的原因是_（3）将接种的培养皿放置在37恒温培养箱中培养24h48h，观察并统计符合要求的菌落数，结果如下表，其中_倍的稀释比较合适。稀释倍数103104105106107菌落数5003672483618（4）若需要将分离的菌种进行长期保藏，应使用的方法是_。【答案】 以尿素为唯一氮源 酚红 45 稀释涂布平板法 涂布器灼烧后未冷却就用于涂布，杀死了菌种 105和106 甘油管藏的方法【解析】试题分析：本题考查微生物的分离、计数，考查土壤中分解尿素细菌分离原理、方法的理解和应用。（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用以尿素为唯一氮源的培养基进行分离，并加入酚红指示剂进行鉴别。尿素分解产生的nh3使指示剂表现为红色。（2）取土样5g，制成稀释10倍土壤溶液，应加入45ml的无菌水配。分离细菌并计数，应使用稀释涂布平板法。用该方法接种后，在某个平板上没有得到菌落，可能的原因是涂布器灼烧后未冷却就用于涂布，杀死了菌种。（3）菌落数在30300之间的平板符合技术要求，据表可知，105和106倍的稀释比较合适。（4）长期保藏分离的菌种，应使用甘油管藏的方法。33生物一选修1:生物技术实践长期使用除草剂会污染环境，研究发现一除草剂（有机物）能被土壤中某细菌（m）降解。下图为分离能降解该除草剂的m菌种的过程。请回答下列相关问题：（1）在液体培养基的基础上制备固体培养基时常用的凝固剂是_。（2）土壤有“微生物的天然培养基”之称。为了获取能降解该除草剂的m菌种，选择的土壤样品应来自_。图中过程所用的培养基中需要加入_作为唯一碳源。进行选择培养的目的是_。 （3）图中过程划线所用的工具为_，该工具在使用前后都要进行_灭菌。 （4）若要检测土样中的细菌含量，应采用_法进行接种。先将1ml土壤溶液稀释100倍，然后随机选取4个经灭菌处理的平板，其中3个平板上分别涂布0.1ml稀释液，1个平板未涂布稀释液，适当培养后，4个平板上的菌落数分别为39、38、37和0，则可计算得出每升土壤溶液中的活菌数为_个。【答案】 琼脂 该除草剂严重污染的土壤 该除草剂 增加目的菌的浓度 接种环 灼烧 稀释涂布平板 3.8107【解析】本题考查微生物接种与选择培养、微生物计数等知识，要求考生掌握无菌技术，掌握微生物接种、培养基制备等方法，能利用选择培养基进行微生物选择培养和计数，此题难度不大。（1）在液态培养基的基础上制备固体培养基时常用的凝固剂是琼脂。（2）土壤有“微生物的天然培养基”之称，根据题意，为了获取能降解该除草剂的m菌种，选择的土壤样品应来自被该除草剂严重污染的土壤。图中过程是选择培养，目的是增加目的菌（即能降解该除草剂的m菌种）的浓度，故所用的选择培养基中需要加入该除草剂作为唯一碳源，以促进目的菌种的生长繁殖，抑制其它微生物生长繁殖。（3）图中过程所用的方法是平板划线法，划线所用的工具为接种环，接种环在使用前后都要进行灼烧灭菌，以避免杂菌污染。（4）若要检测土样中的细菌含量，应采用稀释涂布平板法进行接种；即先将1ml土壤溶液稀释100倍，然后随机选取4个经灭菌处理的平板，其中3个平板上分别涂布0.1ml稀释液，1个平板未涂布稀释液，适当培养后，4个平板上的菌落数分别为39、38、37和0，即对照组的菌落数为0，说明平板灭菌彻底，则根据三个实验组的数据可计算得出每升土壤溶液中的活菌数为（39+38+37）3x1000x100= 3.8107个。34为验证维生素e能延长红细胞体外保存时间，请根据以下提供的材料和用具，以血浆中的血红蛋白、红细胞内atp含量为测定指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。材料与用具：人红细胞悬液（血浆+红细胞）、阿维氏保存液（用以保存红细胞）、维生素e、人血红蛋白试剂盒、atp试剂盒、红细胞保存袋、恒温箱等。（要求与说明：各种检测的具体方法不做要求，不考虑加入物质对体积的影响，实验条件适宜）（1）实验思路：将等量人红细胞悬液加入a、b两组红细胞保存袋，a组各袋中加入适量且等量的阿维氏保存液， _。（2）预测实验结果（在坐标中以曲线图表示实验结果）_（3）分析与讨论：阿维氏保存液中含有葡萄糖与氯化钠等，其中葡萄糖可以提供红细胞生存所需能量，氯化钠的作用是_。活细胞中atp含量下降，致使红细胞活力降低。在atp 的作用下，atp试剂盒中的荧光素酶催化荧光素发出荧光。在测定细胞内atp含量前应该_红细胞。【答案】 b组个袋中加入与a组等量阿维氏保存液和适量且等量维生素e。用人血红蛋白试剂盒、细胞atp试剂盒分别检测两组红细胞，保存袋中的血浆中的血红蛋白和细胞内atp，并记录。将两组红细胞保存袋放在恒温箱中4条件下保存。每隔一段时间，重复步骤。统计和分析所得数据。 维持渗透压 裂解（破裂、涨破）【解析】本题结合动物细胞培养考查验证维生素e能延长红细胞体外保存时间的实验，要求考生掌握相关的实验理论，能利用相关实验理论分析题给信息，按照对照实验的设计原则设计实验步骤，并能对实验结果进行预期和分析。（1）根据题意可知，本实验的目的是验证维生素e能延长红细胞体外保存时间，属于验证性实验，其自变量为红细胞体外保存的液体中释放添加维生素e，因变量为不同保存时间内血浆中的血红蛋白含量及细胞内atp含量；对照实验的设计应遵循单一变量原则和对照原则，因此应将实验分为a、b两组，a组作为对照组其保存液中不添加维生素e，b组作为实验组其保存液中应添加维生素e，除是否添加维生素e以外，a、b两组其它量均应该相同且适宜；在保存过程中，每隔一定的时间应检测血浆中的血红蛋白含量及细胞内atp含量并记录。其实验思路具体如下：将等量人红细胞悬液加入a、b两组红细胞保存袋，a组各袋中加入适量且等量的阿维氏保存液，b组个袋中加入与a组等量阿维氏保存液和适量且等量维生素e。用人血红蛋白试剂盒、细胞atp试剂盒分别检测两组红细胞，保存袋中的血浆中的血红蛋白和细胞内atp，并记录。将两组红细胞保存袋放在恒温箱中4条件下保存。每隔一段时间，重复步骤。统计和分析所得数据。（2）验证性实验的实验结果和结论都是唯一的，即实验结果要能支持实验结论；根据本实验的目的可知，本实验的实验结论应该是：维生素e能延长红细胞体外保存时间；因此实验结果必需支持这一结论，故根据上述实验思路，预测实验结果如下：。（3）分析与讨论：阿维氏保存液中含有葡萄糖与氯化钠等，其中葡萄糖可以提供红细胞生存所需能量，无机盐氯化钠的作用是维持渗透压。活细胞中atp含量下降，致使红细胞活力降低。在atp 的作用下，atp试剂盒中的荧光素酶催化荧光素发出荧光，而正常情况下atp存在于细胞内部，因此在测定细胞内atp含量前应该裂解（破裂、涨破）红细胞。35自然界中有许许多多的微生物，若能进行合理的筛选、培养和运用，则这些微生物能给人类带来一定的经济效益。回答下列相关问题：（1）实验室中培养微生物要用到培养基。在液体培养基中加入常用凝固剂_后，制成_培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。下表是1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的菅养配方；其中分别表示_。培养基组成成分提供的主要营养牛肉膏(5g)碳源、氮源、磷酸盐和蛋白胨（10g)碳源、和维生素nac1(5g)h2o(定容至1000ml)氢元素、氧元素（2）实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是_。（3）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和_。下图是平板划线操作的其两个步骤，图甲的操作是将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红；图乙的操作是将已冷却的接种环伸入菌液中，沽取一环菌液。从图甲至图乙的操作过程中，还需进行的操作步骤是_。（4）统计菌液中活菌的数目时。若采用统计菌落数的方法，则统计结果往往偏_；若采用显微镜直接计数的方法，则统计结果往往偏_。【答案】 琼脂 琼脂固体 维生素、氮源 防止外来杂菌的入侵 稀释涂布平板法 在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞，接着将试管口通过火焰 低（小） 高（大）【解析】试题分析：熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与计数等相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上依据表格信息和题图信息并结合题意作答。(1)实验室中配制培养微生物的培养基时，常用的凝固剂是琼脂。含有琼脂的培养基又称为琼脂固体培养基。牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏提供的主要营养有碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供的主要营养有碳源、氮源和维生素。可见，牛肉膏蛋白胨培养基中的分别表示维生素、氮源。(2)实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。(3)微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。在采用平板划线操作的如图2所示的从图甲至图乙的操作过程中，还需进行的操作步骤是：在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞，接着将试管口通过火焰。(4)采用统计菌落数的方法，实则是稀释涂布平板法；用稀释涂布平板法统计菌落时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计结果往往偏低（小）。采用显微镜直接计数的方法统计菌落时，统计的有活菌和死菌，则统计结果往往偏高（大）。36【生物选修1：生物技术实践】某研究小组按下图所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题。某研究小组按下图所示过程从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌。请回答下列问题。 （1）步骤是_。实验均需要振荡培养，原因是为目的菌提供_。（2）为了筛选目的菌，步骤的培养基中加入的唯一氮源为_，这种培养基属于_（填“鉴别”或“选择”）培养基。 （3）步骤中，需转为固定培养，常采用_法接种，其中需要用到的接种工具是_（填字母）。（4）为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_指示剂，若指示剂变成_色，则说明该菌种能够分解尿素。【答案】 系列稀释（或样品稀释、梯度稀释） 氧气 尿素 选择 稀释涂布平板 c 酚红 红【解析】试题分析：从土壤中筛选能高效降解尿素的细菌的实验流程：土壤取样样品的稀释将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上挑选能生长的菌落鉴定。因此，图中是土壤取样，是样品稀释，是将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上。（1）据图分析，步骤是样品稀释；实验均需要振荡培养，以为目的菌提供氧气。（2）为了筛选能高效降解尿素的细菌，步骤的培养基应以尿素为唯一氮源，这种培养基属于选择培养基。（3）是将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的固体培养基上，常用稀释涂布平板接种，需要用到c涂布器。（4）为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变成红色，则说明该菌种能够分解尿素。【点睛】本题是对用于微生物培养的培养基的配方及营养成分、选择培养基的选择作用、常用的接种方法、无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴定等相关知识的综合性考查，回忆微生物培养的培养基的配方和营养成分、选择培养基的选择作、常用的接种方法的具体操作和目的，无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴然后结合问题进行解答。37水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(pva)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，pva分解菌能产生pva酶分解pva，pva与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当pva被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：（1）下表是筛选出能高效分解pva的细菌的培养基配方，表中x物质最可能为_。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显_(多于/少于）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。成分mgso4蛋白质x物质水琼脂用量5g10g1000ml7g20g（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用_计数板直接计数。若将looml含有pva分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取o.lml稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为140个，空白对照组平板上未出现菌落，则looml原