中图版选修一 测定微生物的数量 作业 (3).docx

测定微生物的数量一、单选题1下列有关微生物实验室培养的说法正确的是（）a. 在对微生物培养前，需对微生物和培养基进行灭菌处理b. 分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源c. 用于培养不同微生物的培养基均应将ph调至中性或微碱性d. 稀释涂布平板法和平板划线法均可用于统计待测菌液中的活菌数目【答案】b【解析】在对微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，不能对微生物进行灭菌处理，a错误；分离能分解纤维素的细菌时要以纤维素作为培养基中唯一的碳源，b正确；配置培养不同微生物的培养基时都要将ph调至能够满足该种微生物的需要，如用于培养细菌的培养基应将ph调至中性或微碱性，而用于培养真菌的培养基应将ph调至碱性，c错误；稀释涂布平板法可用于统计待测菌液中的活菌数目，而平板划线法不可用于统计待测菌液中的活菌数目，d错误。【点睛】理清微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落（该方法可用于微生物的计数）。2在稀释涂布平板法对微生物进行计数时的错误操作是（）a. 将1ml样品稀释10倍，需加入10ml无菌水b. 吸取菌液的移液管需要干热灭菌避免杂菌污染c. 将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃d. 每一个稀释度涂布多个平板，计算各组平均值【答案】a【解析】将1ml样品稀释10倍，需加入9ml无菌水，a错误；吸取菌液的移液管需要干热灭菌避免杂菌污染，b正确；涂布器灭菌时，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却810s再用，c正确；每一个稀释度涂布多个平板，计算各组平均值，d正确。【点睛】本题主要考查稀释涂布平板法的操作过程，意在强化学生对相关实验操作的过程的识记、理解与运用。3分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（ ）加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐a. b. c. d. 【答案】b【解析】要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，正确、错误；分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂，正确，错误；培养基中需要加碳源即葡萄糖，正确，错误；不需要氮源，故不加硝酸盐，错误，正确，因此b正确。4关于菌种保藏叙述不正确的是a. 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法b. 长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法c. 临时保藏的菌种容易被污染或产生变异，因此保存时间不长d. 对于需要长期保存的菌种,可以采用4 冰箱中保藏的方法【答案】d【解析】对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏，a错误；对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法，采用-20 冰箱中保藏，b正确， d错误；临时保藏的菌种由于频繁转种，容易被污染或产生变异，c正确。5下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是a. 利用稀释涂布平板法可对微生物进行计数b. 接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落c. 酵母菌发酵过程产生的酒精，对其生长没有影响d. 利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌【答案】c【解析】稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数，在稀释涂布平板法计数时，选择“菌落数在30-300的实验组平板进行计数”以减少实验误差，a正确；接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落，b正确；酵母菌使葡萄汁产生葡萄酒，当酒精含量达到12%16%时对酵母菌有毒害作用，抑制其生长，c错误；当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，d正确。【点睛】微生物的这部分知识点常考的考点有微生物的实验室操作、微生物的分离及微生物的计数，这部分内容知识点比较多，要归类整理好，熟练的记忆，防止混淆。6若要通过稀释涂布平板法分离纯化土壤中的微生物，其正确的操作步骤是（）土壤取样；称取1g土壤加入盛有99ml无菌水的锥形瓶中，制备102土壤稀释液；吸取0.1ml土壤稀释液进行平板涂布；依次将土壤稀释液稀释至浓度为103、104、105、106、107的溶液a. b. c. d. 【答案】c【解析】稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是：土壤取样；称取1g土壤加入盛有99ml无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液；进行梯度稀释，即依次稀释至103、104、105、106、107稀释度，吸取0.1ml土壤稀释液进行平板涂布，故选c。7下列有关细菌纯培养的说法，不正确的是（ ）a. 实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒b. 每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌c. 培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆d. 菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数【答案】c【解析】在培养细菌时要获得纯净的培养物，需要进行严格的消毒或灭菌，实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，a正确。每次划线后为了保证划线时的菌种只来自上次划线区域的末端，所以每次划线后都要灼烧灭菌，最后一次是为了杀死菌种，防止污染环境，b正确。培养基上的单个菌落是由一个细菌细胞繁殖而来的多个细菌，c错误。菌液梯度稀释后用涂布平板法接种，有利于得到单菌落方便计数，d正确。8下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述，错误的是a. 经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上b. 当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时，选择培养这一步可以省略c. 可先在固体培养基上培养微生物，再用刚果红溶液染色d. 鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物【答案】a【解析】分离纤维素分解菌时，经选择培养后，样品应稀释后涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，a项错误；选择培养的目的是增加菌体浓度，当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时，选择培养这一步可以省略，b项正确；可先在固体培养基上培养微生物，再用刚果红溶液染色，也可以在倒平板时加入刚果红，c项正确；鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物，d项正确。9下列不属于菌落特征的是（ ）菌落的形状 菌落的大小 菌落的多少 隆起程度 颜色 有无荚膜a. b. c. d. 【答案】d【解析】一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征，这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面，因此本题应选答案d。10如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是a. 3号试管的稀释倍数为103倍b. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7108个c. 5号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为4号试管的10倍d. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高【答案】b【解析】3号试管的稀释倍数为104倍，a错误；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）310510=1.7108个，b正确；5号试管中稀释液进行平板培养，稀释倍数比4号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，c错误；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，d错误。【点睛】本题主要考查尿素分解菌的筛选与分离过程的稀释与计数，意在强化学生对相关知识点的理解与运用。11关于用涂布平板法培养和计数土壤中仅以尿素为氮源的微生物的实验，以下操作不正确的是()a. 需制备系列浓度梯度的土壤悬液b. 所选用的培养基中，尿素为唯一氮源c. 接种时从浓度最低的土壤悬液开始，每个浓度设置3个重复d. 涂布平板上形成的每个菌落，都是由样品中的单个个体形成的【答案】d【解析】由于土壤中含有较多的微生物，因此需稀释制备系列浓度梯度的土壤悬液，a项正确；所选用的培养基中，尿素为唯一氮源，b项正确；接种时从浓度最低的土壤悬液开始，每个浓度设置3个重复，c项正确；由于待测样品往往不易完全分散成单个个体，长成的菌落，也有可能来源于样品中的23个或更多个个体，d项错误。【点睛】稀释涂布平板法对细菌密度计数时，计算值往往会小于真实值，原因是在涂布平板时可能有23个细胞贴在一起，最终形成一个菌落。12急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的，因此检测饮用水中的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施检测水中大肠杆菌的含量时，通常将水样进行系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为（ ）a. 稀释涂布平板法 b. 平板划线法 c. 显微镜直接观察法 d. 目测估计法【答案】a【解析】稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，a正确；平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，b错误；利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量，c错误；目测估计法不适合微生物的计数，d错误。13下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是a. 分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶能分解尿素产生氮气b. 将实验组和对照组平板倒置后，15恒温培养810小时c. 统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在300以上的平板进行计数d. 用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红【答案】d【解析】分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳，a错误；将实验组和对照组平板倒置后，37恒温培养2448小时，b错误；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30300以上的平板进行计数，求其平均值，c错误；用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，d正确。14在加入刚果红的培养基中会出现透明圈，产生的透明圈是（ ）a. 刚果红与纤维素形成的复合物b. 刚果红与纤维二糖形成的复合物c. 纤维素分解后形成的葡萄糖导致的d. 以纤维素分解菌为中心形成的【答案】d【解析】刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物，而纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖，因此在纤维素分解菌的菌落周围，由于缺少纤维素而出现透明圈，所以产生的透明圈是以纤维素分解菌为中心形成的，故d正确。【点睛】解答本题关键能理解透明圈产生的原因，是由纤维素分解菌产生的纤维素酶分解纤维素后形成的。15将大肠杆菌接种在彻底灭菌的培养基表面时，关于接种环划线的操作，下列叙述不正确的是a. 划线前灼烧接种环 b. 将最后一区的划线与第一区相连c. 每区划三至五条平行线 d. 不要划破培养基【答案】b【解析】平板划线法中，为了防止杂菌污染，划线前灼烧接种环，a正确；划线时不能将最后一区的划线与第一区相连，b错误；每区划三至五条平行线，c正确；划线时不要划破培养基，否则不能分离得到单菌落，d正确。16下列有关微生物培养的叙述，正确的是 （）a. 测定土壤样品中的细菌数目，常用平板划线法进行计数b. 在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌c. 酵母菌发酵过程产生的酒精，对其生长没有影响d. 鉴定能分解纤维素的细菌时，需要在培养基中加入刚果红染料【答案】d【解析】平板划线法只能用于微生物的分离，不能用于微生物的计数，微生物的计数可以用稀释涂布平板法，a错误；在对微生物进行培养前，需要对培养基进行灭菌，但是微生物不能灭菌，b错误；酵母菌发酵过程产生的酒精，对其生长有影响，当酒精浓度达到一定值时，会对自身造成毒害，c错误；鉴定能分解纤维素的细菌时，需要在培养基中加入刚果红染料，d正确。17下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，正确的是 （ ）a. 纤维素酶的发酵方法有液体发酵和半固体发酵b. 对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验c. 纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定d. 两种刚果红染色法不会出现相同的透明圈【答案】c【解析】纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵，a项错误；对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，b项错误；纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定，c项正确；两种刚果红染色法只是刚果红加入的时间不同，会出现相同的透明圈，d项错误。18下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是（ ）a. 在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落b. 在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒c. 土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌d. 在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液【答案】a【解析】在固体培养基上涂布稀释后的菌液能够得到单个菌落，a正确；在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气，有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，b错误；牛肉膏蛋白胨培养基不能筛选出分解尿素的细菌，应在以尿素为唯一氮源的培养基上筛选尿素分解菌，c错误；在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物全部被杀死，不能用于制取土壤稀释液，d错误。19能够测定样品活菌数的方法是()a. 稀释涂布平板法 b. 直接计数法c. 平板划线法 d. 比浊法【答案】a【解析】稀释涂布平板法能推测出样品中大约含有多少活菌，a正确；直接计数法不能区分死菌与活菌，b错误；平板划线法不能对微生物进行计数，c错误；比浊法不能对微生物进行计数，d错误。20鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色，加入刚果红的操作可在（ ）制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时培养基上长出菌落时a. b. c. d. 【答案】c【解析】加入刚果红的操作有两种：先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应，正确；在倒平板时就加入刚果红，正确。21下图表示利用划线分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是a. 步骤倒平板操作时，只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁进行b. 步骤使用的工具是接种环，接种前需在明火上烧红后冷却c. 步骤恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中蘸取菌液4次d. 该方法使单菌落更容易分开，但操作复杂些【答案】b【解析】步骤倒平板操作时，为了防止杂菌污染，在超净台中进行的同时，也需要在酒精灯火焰旁进行，a错误；步骤使用的工具是接种环，接种前需在明火上灼烧灭菌，冷却后再进行划线操作，b正确；步骤恒温培养箱培养后的结果说明整个过程进行4次划线操作，c错误；该方法不易分离出单个菌落，d错误。22为了解土壤微生物是否能分解农药，并尽快得出实验结论，有人用“敌草隆”（一种除草剂）进行了实验，取等量砂土分装于相同的两容器中，a组高压灭菌，b组不灭菌，下列有关事项正确的是a. 再增加c组作为对照，不喷入“敌草隆”，其他处理与a、b组相同b. 向a、b中喷入等量敌草隆，再置于同一温箱中培养相同时间c. 检测敌草隆消失的情况，预计a组敌草隆含量不变，b组敌草隆全部分解d. 用砂土进行该实验，和用几种典型土壤混合后进行实验效果相同【答案】b【解析】本实验是验证土壤中的微生物能对农药“敌草隆”具有分解作用，若不喷入“敌草隆”，则不能证明土壤中的微生物的此种作用，a错误；实验的自变量是土壤是否灭菌（有无土壤微生物），敌草隆的使用量、培养条件是无关变量，应保持一致且适宜，所以向a、b中喷入等量敌草隆，再置于同一温箱中培养相同时间，b正确；b组的敌草隆不可能全部分解，c错误；不同的土壤微生物的种类和数量不同，只用砂土实验效果不如几种典型土壤混合后的好，d错误。23下列有关生物学研究的叙述，正确的有a. “35s标记的t2噬菌体侵染细菌”的实验中，若未经搅拌就进行离心，则上清液放射性低b. “探究细胞大小与物质运输效率的关系”的实验中，naoh扩散速度是因变量c. 在电子显微镜下拍摄到的叶绿体的结构照片属于物理模型d. 对酵母菌计数时，应吸取培养液滴满血细胞计数板的计数室，然后再盖上盖玻片并镜检【答案】a【解析】试题分析：35s标记t2噬菌体蛋白质外壳，没有进入细菌，吸附在细菌表面，如果没有搅拌就进行离心，会与细菌一同在下层，则沉淀物放射性较高，故a正确。naoh扩散/整个琼脂块体积比值为因变量，故b错。以实物或者图画直观表达认识对象特征，为物理模型，拍摄照片不是，故c错。.对酵母菌计数时，先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴与盖玻片边缘，让培养液自行渗入，待酵母菌沉降到计数室底部再计数，故d错。考点：本题考查生物学研究和实验相关知识，意在考查考生）关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件能力；能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。24下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是a. 利用高温条件筛选耐热的taq细菌b. 加入高浓度食盐可以筛选出金黄色葡萄球菌c. 含酚红的尿素培养基初步鉴别出分解尿素的细菌d. 筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质【答案】d【解析】耐热的taq细菌可以生存在高温环境中，所以可以利用高温条件筛选耐热的taq细菌，a正确；金黄色葡萄球能够生活在高渗环境下，利用添加高浓度食盐的培养基可实现对金黄色葡萄球菌的筛选，b正确；尿素分解菌可以将尿素分解成氨使酚红指示剂呈红色，c正确；筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源，也要加其他营养物质，d错误。25分离出分解尿素的细菌的方法是a. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂b. 以蛋白胨为唯一氮源的培养基中加入伊红-美蓝试剂c. 以牛肉膏为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂d. 以尿素为唯一氮源的培养基中加人双缩脲试剂【答案】a【解析】在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的ph升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素，a项正确，b、c、d三项均错误。26某学者欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是()a. 利用平板划线法对细菌进行计数b. 利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌c. 采用涂布平板法分离菌种d. 称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁操作【答案】a【解析】平板划线法能对细菌分离纯化但不能计数，通常将被石油污染过的土壤浸出液稀释后，采用涂布平板法分离分解石油的细菌菌种，并对菌种进行计数，a项错误，c项正确；筛选能分解石油的细菌只能利用以石油为唯一碳源的选择培养基，b项正确；称取土壤和稀释土壤溶液过程中的每一步都要在火焰旁操作，d项正确。【点睛】培养纯净微生物的关键是防止杂菌感染。27对无菌操作转接培养物的叙述中，正确的是()接种环在火焰上灼烧灭菌在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞打开棉塞的试管口通过火焰将已冷却的接种环伸入菌液，蘸取一环菌液转移到一装有无菌培养基的试管中将试管口塞上棉塞接种环进行灭菌a. b. c. d. 【答案】c【解析】在无菌操作转接培养物的过程中，刚开始应灼烧接种环进行灭菌，在操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，转接完成后还应对接种环进行灭菌，以防止培养物扩散到环境中。因此，各项叙述均是正确的，c项正确。28淀粉酶可通过微生物发酵生产获得，生产菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。为了提高酶的产量，研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株。下列实验步骤中不正确的是（ ）a. 将生产菌株分为两组，实验组用一定剂量的诱变剂处理，对照组不做处理b. 制备含水、淀粉、氮源和无机盐等成分的固体培养基，并进行灭菌处理c. 把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养d. 观察两组菌株的菌落周围是否出现透明圈，选出有透明圈的菌株即为所需菌株【答案】d【解析】本实验的目的是利用诱变育种的方法获得能产生较多淀粉酶的菌株，需要有对照实验，所以对照组是不做处理的菌株，实验组是用一定剂量的诱变剂处理菌株，a正确。培养基中至少要包括水、无机盐、氮源和碳源，因为是分解淀粉的酶，所以要以淀粉为碳源，培养基要进行高压蒸汽灭菌，b正确。因为诱变育种利用的是基因突变，基因突变具有不定向性，所以实验组应多做几个，即把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中，同时接种对照组，相同条件下培养。观察两组菌株的菌落周围透明圈大小，选择透明圈比对照组大的为所需菌株，d错误。29用稀释涂布平板法统计样品中细菌的数目时，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验。下列叙述错误的是a. 对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物b. 对照组和实验组的培养基都应该放在相同条件下培养c. 对照组所用培养基的成分及ph大小完全与实验组一致d. 若对照组出现了菌落，则统计结果应减去对照组的菌落数【答案】d【解析】对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对照组，a正确；对照组和实验组的培养基都应该放在相同条件下培养，以保证单一变量，b正确；对照组所用培养基的成分及ph大小完全与实验组一致，以保证单一变量，c正确；若对照组出现了菌落，说明有杂菌污染，应该重做实验，d错误。30下列关于微生物实验室培养的叙述，错误的是a. 平板划线法是在培养基上连续划线以纯化菌种的接种方法b. 培养霉菌时需将培养基的ph调至中性或微碱性c. 培养硝化细菌可不用在培养基中加有机碳源d. 培养乳酸菌时需要提供无氧条件【答案】b【解析】平板划线法是茬培养基上连续划线以纯化菌种的接种方法，a项正确；培养霉菌时需将培养基的ph调至酸性，b项错误；硝化细菌为自养菌，培养可不用在培养基中加有机碳源，c项正确；乳酸菌为厌氧菌，培养时需要提供无氧条件，d项正确。二、非选择题31【生物选修1:生物技术实践】“口嚼酒”因日本著名动画电影导演新海诚的新作你的名字而引起人们的关注。世界上有些地方很就有口嚼酒的记载。请回答下列相关问题：（1）口嚼酒的做法是:首先需要将米煮熟，然后放入口中咀嚼段时间，直至米粒变为糊状，再将其吐入特制容器中，令其发酵，经过几天便成为甜酸味的酒。上述的制作过程中，“咀嚼”可能具有两个作用，分别是_和_。参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的_，末期形成酸味，可能是因为密封不严,产生了_等物质。（2）口嚼酒是一种自酿酒，不仅品质不高，而且卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的危险。某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物，进行了进一步的实验，实验步骤如下：制作口嚼酒。制作培养基：计算称量溶化_倒平板。接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后按照图1和图2的方法进行操作，该方法是_。并在每天接种的培养皿上注明培养日期，最后将所有培养基放在相同且适宜的环境下培养。经过一段适宜时间后，观察不同培养基上的菌落数和菌落的形态，并进行品种鉴定。图3是三个不同时间获得的培养基，其时间先后为_（填字母）。上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是_。（3）兴趣小组成员在实验后期看到培养基上长满了许多杂菌菌落，若他们采用图4的方法对杂菌中的母的菌进行纯化，则在_（填数字）区最可能获得纯净的母的菌。【答案】 增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵 使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖 酵母菌 醋酸 灭菌（或高压蒸汽灭菌） 稀释涂布平板法 b、c、a 检验培养基灭菌是否彻底（答案合理即可给分) 5【解析】试题分析：无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。（1）将熟的米饭放入嘴里“咀嚼”，一方面增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵，另一方面使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖。口嚼酒形成初期，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精，末期密封不严,醋酸菌进行有氧呼吸产生了醋酸。（2）微生物培养基的配制过程：计算称量溶化灭菌倒平板。图1和图2显示的接种方法是稀释涂布平板法，该方法获得的菌种随着时间的推移，会越来越多，所以图3中的先后顺序为b、c、a。上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，以检验培养基灭菌是否彻底。（3）图4为平板划线法，该方法随着划线次数的增加，细菌的数量越来越少，最后为单一菌了，所以5区最可能获得纯净的母的菌。【点睛】微生物这部分内容是高考试题的一个热点一般体现在对生物工程中的应用，考察的知识点有微生物的无菌操作、微生物的分离以及产品的提取，注意总结。32“创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验证明痰液中含有细菌，来倡导同学们不要随地吐痰，为 “创卫”添一份力。请回答下列问题：(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、nacl、_、h2o等；该培养基中微生物所需的氮源来自_，制备该培养基的步骤是：计算一称量一溶化一灭菌一倒平板，其中灭菌常用的方法是_ ；培养基灭菌后，需要冷却到_左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是_。(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是_。(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：_。【答案】 琼脂 牛肉膏、蛋白胨 高压蒸汽灭菌法 50 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 排除实验组中非测试因素对实验结果的影响 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落【解析】本题考查微生物的实验室培养，要求考生掌握牛肉膏蛋白胨培养基的制备过程，知道微生物培养过程中的无菌操作方法，掌握对照实验的设计原则及其应用，明确如何对培养基中的微生物进行计数，此题难度一般。(1)实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂（凝固剂）、h2o等；该培养基中微生物所需的氮源来自牛肉膏、蛋白胨，制备该培养基的步骤是：计算一称量一溶化一灭菌一倒平板，其中灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法；培养基灭菌后，需要冷却到50左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。(2)为了使实验更有说服力，应设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，即证明培养基中的细菌仅来自于痰液。(3)用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目时，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。33生物选修1：生物技术实践中国经济的发展深刻地影响着农村生活，过去农村大多以农作物秸秆作为主要能源用于做饭、取暖等，现在基本上已经被电能、天然气等能源所取代，从而造成一些不必要的能源闲置及浪费。其实农作物秸秆是一种廉价易得的资源，有很大的利用价值，请回答下列相关问题：(1)秸秆的主要成分是_ ，植物细胞的_也是由该成分构成的。(2)从土壤中分离分解纤维素的微生物的实验流程如下：（一）土壤取样（二）选择培养（三）_（四）将样品涂布到鉴别培养基上（五）挑选菌落。该过程中步骤（二）选择培养基的营养物质的特点是_；步骤（五）挑选菌落霎时应该挑选出现_的菌落。（3）为了测定细菌含量，将稀释度为104的菌液均按0.1ml的用量各接种3个平板，在适宜条件下培养一段时间后，3个平板上长出的菌落分别为42、55、38，则每升菌液的活菌数约为_个。活菌实际数目往往比该方法没得的数据_（填“多”“少”或“相等”）【答案】 纤维素 细胞壁 梯度稀释 以纤维素作为唯一碳源 透明圈 4.5109 多【解析】试题分析：土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。（1）秸秆的主要成分是纤维素，植物细胞的主要成分是纤维素和果胶。（2）从土壤中分离分解纤维素的微生物的实验流程为：土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基上挑选菌落，其中选择培养基必须以纤维素作为唯一碳源；刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以挑选菌落时应该挑选出现透明圈的菌落。（3）已知3个平板上长出的菌落数分别为42、55、38，则三个平板上菌落的平均数=（42+55+38）3=45个，又因为稀释度为104，菌液均按0.1ml的用量，则每升菌液的活菌数=451040.11000=4.5109个。由于计数时，死亡的细胞也会被计数，且细菌会相互重叠，所以活菌的实际数目往往比该方法测得的数据多。【点睛】本题主要考查纤维素分解菌的分离与鉴别，意在强化学生对纤维素分解菌的筛选、分离与鉴别的过程的识记与理解，对于纤维素分解菌的鉴定、微生物的计数和计算方法的掌握是解答本题的关键。34大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。（1）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。 根据用途划分，该培养基属于_（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_换成_，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成_。（2）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是_。（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。对已使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1 ml水样至盛有9 ml无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0.1ml已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_。（5）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为_的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是_。【答案】 鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂 平板划线法和稀释涂布平板法 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 灭菌 5.6108 黑色 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌【解析】【试题分析】本题考查的培养、分离计数的相关知识，比较容易作答。需要考生理解所学知识的要点，并把握知识间的内在联系，在梳理所学知识的同时结合题意分析作答。第（4）小题需要用到公式：单位样品中的菌落数=（cv）m，其中c代表某一稀释度下的平板上生长的平均菌落数，v代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml）m代表稀释的倍数。据此答题。（1）伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此该培养基从用途上属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂，即需将伊红美蓝换成酚红指示剂。（2）培养微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。（3）在接种前检测固体培养基是否被污染，通常采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生；对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）题中稀释的倍数是103，三个菌落的平均数=（55+56+57）3=56个，图中则每毫升样品中菌株数=560.1103=5.6105个，所以每升土壤浸出液中的菌株数=5.6105103=5.6108个。（5）由题意可知，大肠杆菌的代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色，所以检测大肠杆菌数量时，在平板培养基中应选择颜色为黑色的菌落进行计数；通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。3535土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：土壤取样选择培养基梯度稀释鉴别培养基（1）纤维素酶是复合酶，由c1酶、cx酶和_组成。（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是_。为分离得到纤维素分解菌，使用的培养基应以_作为主要碳源。（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是_，这一步一般选用_（填“固体”或“液体”）培养基。（4）梯度稀释后用_（仪器）将菌种接种在培养基表面。（5）用_染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映_。【答案】 葡萄糖苷酶 根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计 纤维素 增加纤维素分解菌的浓度 液体 涂布器 刚果红 产生纤维素酶能力大小（或产生纤维素酶的多少）【解析】试题分析：分解纤维素的微生物的实验过程：土壤取样：采集土样时，应选择富含纤维素的环境；梯度稀释：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度；梯度稀释；涂布平板：将样品涂布于含刚果红的鉴别纤维素分解菌的固体培养基上；挑选产生中心透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈，从产生明显的透明圈的菌落上挑取部分细菌，并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在3037条件下培养，可获得较纯的菌种。（1）纤维素酶是复合酶，由c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶组成。（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计。筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物，在以纤维素为唯一碳源的液体培养基上进行选择培养，选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度。（3）梯度稀释前进行选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，这一步一般选用液体培养基。（4）梯度稀释后用涂布器将菌种接种在培养基表面。（5）用刚果红染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映 产生纤维素酶能力大小（或产生纤维素酶的多少）。36纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，能被土壤中某些微生物分解利用。请回答：（1）纤维素分解菌能产生_和葡萄糖苷酶以分解纤维素。其中，葡萄糖苷酶的作用是_。（2）利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理是_，可通过培养基上_来筛选纤维素分解菌。（3）筛选纤维素分解菌时，应选择的土壤作为样品。若要对样品中的纤维素分解菌进行计数，可用_法接种，该方法能够统计活菌数目的原因是_。【答案】 c1酶、cx酶 将纤维二糖分解成葡萄糖 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生反应 是否产生透明圈 富含纤维素 稀释涂布平板 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌【解析】试题分析：本题主要考查纤维素分解菌的相关知识，意在强化学生对纤维素分解菌的相关知识点的识记与理解。纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶，包括c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。（1）纤维素酶是一种复合酶，包括c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶，纤维素分解菌能产生这三种酶来分解纤维素，其中葡萄糖苷酶的作用是将纤维二糖分解成葡萄糖。（2）纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，其原理是刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生反应，可通过培养基上是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。（3）实验室中微生物的筛选，是人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长，用于筛选目的菌株的培养基称为选择培养基。筛选纤维素分解菌应选择富含纤维素的土壤作为样品。若要对样品中的纤维素分解菌进行计数，可用稀释涂布平板法接种，该方法能够统计活菌数目的原因是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。37烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。（1）获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有_、氮源、特殊营养物质、水和无机盐，调节ph至7，灭菌处理，待培养基冷却至50时，在_附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。（2）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉稀类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素_；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南_（填“强”或“弱”），含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落生的可能原因：一是_，二是_。（3）根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素_。【答案】 碳源 酒精灯火焰 涂布平板法 敏感 弱 杂菌污染 抗比阿培南的绿脓杆菌（或绿脓杆菌产生耐药性突变）形成的菌落 美罗培南【解析】试题分析：分析题干可知，该实验的目的是探究病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性，实验的自变量的抗生素的种类，培养基的基本成分、培养条件等属于无关变量，绿脓杆菌的生长状况是