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文档简介
微生物的实验室培养一、单选题1用10、102和103倍稀释液进行涂布培养(加入0.1ml)细菌后,其菌落平均数为2890、271和50,则菌落总数为a2.89105个/ml b2.71105个/mlc6.0105个/ml d3.85105个/ml【答案】d【解析】试题分析:计数应选择在30-300之间的进行,故应取271,而此时是0.1ml且稀释102后的数目,故每毫升中应是2.71105个/ml,故b正确,其余错误。考点:本题考查细菌计数相关知识,意在考察考生对知识点的理解和计算能力。2下列是关于“微生物接种以及单个菌落观察”实验操作的叙述,其中错误的是( )a配制牛肉膏蛋白胨固体培养基,经高温、高压灭菌后倒入培养皿备用b接种前接种环须经酒精灯火焰灼烧c接种时应用无菌刮铲在培养基表面涂匀d倒置培养皿,37恒温培养4872小时后观察【答案】c【解析】3暴露在空气中,下列哪种微生物不能生存( )a酵母菌 b真菌c放线菌 d产甲烷杆菌【答案】d【解析】:产甲烷杆菌和乳酸菌是厌氧异养型,即使短时间接触空气(氧气),也会造成生长停滞,甚至死亡;酵母菌是异养兼性厌氧型;大多数真菌和放线菌都是异养好氧型微生物。4在接种细菌的过程中,不正确的操作是a要将接种环灼烧灭菌b取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌c应将灼烧灭菌后的接种环立即伸入试管内挑取菌种,避免污染d接种后还要将管口灭菌加塞【答案】c【解析】试题分析:应将灼烧灭菌后的接种环冷却后再伸入试管内挑取菌种,避免污染,以防止高温杀死菌种,c错误。考点:本题考查微生物培养的相关操作。5下列不属于纤维素酶组分的是a. c1酶b. cx酶c. 葡萄糖苷酶d. 半乳糖苷酶【答案】d【解析】纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶,所以半乳糖苷酶不属于纤维素酶组分,a、b、c三项均错误,d项正确。【考点定位】分解纤维素的微生物的分离6培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础,下列有关微生物培养及培养基的描述正确的是a.微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼脂 b.不论何种培养基,在各成分溶化后都要进行灭菌操作,灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌 c.接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法 d.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴定分解尿素的细菌【答案】bcd【解析】琼脂不是微生物培养基中的必备成分,它是配制固体培养基的凝固剂。微生物培养需要在无菌条件下进行,利用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌操作是制作培养基的关键步骤。微生物接种的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。分解尿素的细菌能够以尿素为氮源,所以可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。7下列关于遗传与变异的叙述,正确的是( )a体细胞发生的基因突变是可遗传的变异 b用杂交育种的方法可选育出黄色短杆菌的赖氨酸高产菌株c细胞工程和基因工程技术依据的遗传学原理是基因重组d改良缺乏某种抗病性的水稻品种宜采用单倍体育种方法【答案】a【解析】8下列关于微生物分离和培养的有关叙述,不正确的是()a分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度b测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜直接计数法c提纯和分离严格厌氧型微生物,一般不用稀释涂布平板法d分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源【答案】b【解析】试题分析:镜检时很难区别死的微生物细胞和土壤颗粒,测定土壤样品中的活菌数目,常用菌落计数法,b错误。考点:本题考查微生物分离和培养, 意在考查考生的理解能力。9下列有关稀释涂布平板法,叙述错误的是( )。a首先将菌液进行一系列的梯度稀释b然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面c在适宜条件下培养d结果都可在培养基表面形成单个菌落【答案】d【解析】稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,在适宜条件下进行培养,因此a、b、c三个选项正确。在不同稀释度的菌液接种后,只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物才能分散成单个细胞,从而能够在培养基表面形成单个菌落,而不是所有培养基上均可形成单个菌落,因此d错误。10下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤,其中正确的是a培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后,直接补充蒸馏水至100mlb用lmollnaoh调试ph值,使ph值为5.06.0c.水加热煮沸,彻底排出锅内的冷空气后再密闭d将接种环放在酒精灯上烧灼,灭菌后立即伸入菌种试管内挑取少量菌种【答案】c【解析】试题分析:应是当琼脂溶化后,补充蒸馏水至100ml,故a错误。要使ph值为酸性应用盐酸进行调节,故b错误。水加热煮沸应彻底排出锅内的冷空气后再密闭,故c正确。将接种环放在酒精灯上灼烧,灭菌后应等冷却后在伸入菌种试管内挑取少量菌种,否则会将菌种烧死,故d错误。考点:本题考查细菌的培养相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。11以含(nh4)235so4、kh231po4的培养基培养大肠杆菌,再向大肠杆菌培养液中接种以32p标记的t2噬菌体(s元素为32s),一段时间后,检测子代噬菌体的放射性及s、p元素,下表对结果的预测中,最可能发生的是选项s元素p元素a全部32s全部31pb全部35s多数32p、少数31pc全部32s少数32p、多数31pd全部35s少数32p、多数31pa. a b. b c. c d. d【答案】d【解析】噬菌体侵染大肠杆菌时,只有dna进入细菌中并作为模板控制子代噬菌体的合成,而合成子代噬菌体所需的原料、场所、能量、酶等所有的条件,均由大肠杆菌提供,因此子代噬菌体外壳中只含35s,但由于dna复制方式为半保留复制,因此子代噬菌体均含有31p,但只有少数含有32p。故d项正确,a、b、c项错误。【考点定位】噬菌体侵染细菌实验12在分解纤维素的微生物的分离实验中,为了判断选择培养基是否起到了对分解纤维素细菌的选择作用,需要设置的对照是()。a. 未接种的只有纤维素为唯一碳源的培养基b. 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基c. 接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d. 接种了的只有纤维素为唯一碳源的培养基【答案】c【解析】试题分析:题目中筛选的能分解纤维素的细菌,故可采用含纤维素碳源的选择培养基筛选,含除纤维素以外的其他碳源的培养基作为对照,其他处理相同。c正确。考点:本题考查微生物分离实验的对照组设计,意在考查考生验证简单生物学事实,并对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。13下列对微生物连续培养优点的叙述中,不正确的是( )a.能及时补充微生物所需要的营养物质,提高产量b.有利于微生物尽快将代谢产物释放到培养基中c.只有利于初级代谢产物的获得d.提高了设备的利用率【答案】c【解析】所谓连续培养就是在一个流动装置中,以一定的速度不断添加新的培养基,同时又以同样的速度不断放出老的培养基,这样保证了及时补充微生物所需的营养物质,延长稳定期,能提高产量,同时有利于微生物尽快将代谢产物释放到培养基中,提高了设备的利用率。14下列在微生物的实验室培养过程中,关于平板划线操作的叙述正确的是a. 使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌b. 打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞好棉塞c. 将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可d. 最后应将平板倒置,放入培养箱中培养【答案】d【解析】试题分析:微生物培养接种实验中在每次使用的接种环、培养皿在使用后均要灭菌,a错误;操作过程是在无菌条件下进行的,打开的菌种管口通过火焰以防止杂菌进入试管造成污染,但并不是将试管进行灭菌,b错误;平板划线要分区域 多次划线,第二次划线要从第一次划线的末端开始,c错误;接种完成后,将平板倒置,放人培养箱中培养,d正确。考点:本题考查微生物培养的知识。意在考查能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。15培养基下列成分中属于供微生物生长繁殖的营养物质是( )水 无机盐 碳源 氮源 琼脂 a b c d【答案】b【解析】试题分析:培养基的成分主要是水、无机盐、碳源和氮源。考点:本题主要考查培养基的成分的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解,把握知识间的内在联系的能力。二、非选择题16经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:(1)过程接种的方法是_。待测培养皿中的培养基是_(答“基本”或“完全”)培养基。(2)过程是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_(答“基本”或“完全”)培养基上,原因是_。(3)完成过程的转印并在28的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落a和菌落b中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_菌落(答“a”或“b”),原因是_。(4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个平板中营养成分的差异是_。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是_,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。【答案】 稀释涂布平板法 完全 基本 防止基本培养基中混入氨基酸 b b菌落在基本培养基上能生长繁殖,说明它能合成天冬氨酸 是否含有天冬氨酸 含有天冬氨酸的平板上生长有菌落,另一个平板上不能生长【解析】试题分析:分析题图,图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌,然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中:基本培养基、完全培养基,则在基本培养基中,氨基酸缺陷型菌株不能生长,而在完全培养基中能够生长,因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。(1)分析图解可知,过程导致菌落均匀分布,因此该方法为稀释涂布平板法;两种培养基分别培养是为了筛选出氨基酸缺陷型菌株,因此与基本培养基相比,待测培养皿中特有的成分有氨基酸,类似于完全培养基。(2)过程应将印在丝绒布上的菌落先转印至基本培养基上,原因是防止基本培养基中混入氨基酸。(3)比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知,b菌落在基本培养基上能生长繁殖,说明它能合成天冬氨酸,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株。(4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,对照实验的两个平板中营养成分的差异是是否含有天冬氨酸,接种后若两个平板中菌落的生长情况是含有天冬氨酸的平板上生长有菌落,另一个平板上不能生长,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。17多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质,呈油状液体,污染土壤后很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用,为消除这种污染,科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。(1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品_,接种到以_为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于_。(2)对初步提取到的菌株要进行_,一般操作方法有两种,右图表示_法。(3)将l ml酵母菌溶液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 ml稀释液经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57、58,据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为_。【答案】 稀释(溶解) 多氯联苯 选择培养基 纯化 平板划线 5.7107个/l【解析】试题分析:从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株应用选择性培养基,其中以多氯联苯为唯一碳源。微生物的分离纯化方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品稀释,接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上。在该培养基上只有能分解多氯联苯的菌株才能生长,因此从功能上讲,该培养基属于选择培养基。(2)对初步提取到的菌株要分离纯化,有两种操作方法:平板划线法和稀释涂布平板法,图示有接种环,说明纯化方法是平板划线法。(3)由题意可知,每升水样中的活菌数为(56+57+58)30.1100103=5.7107个。18(15分)在实验室中,经稀释后用平板分离纯化微生物的方法有稀释涂布平板法和稀释倒平板法。两种方法的主要区别在于:前者是取一定稀释度的样品,用无菌涂布器将其均匀涂布于预先制备好的琼脂平板上;后者则是取一定稀释度的样品与熔化的琼脂培养基混合均匀后,倒入无菌培养皿中。请回答下列相关问题:(1)在进行稀释倒平板时,已熔化并用 (填实验仪器)灭菌的琼脂培养基,需要冷却到 左右才能与样品稀释液混合并倒平板。(2)若要从某土壤中分离数量极少的、能降解对羟基苯甲酸(一种含碳化合物)的微生物,在样品稀释之前,最好先用液体培养基进行 ,该培养基中除了含有对羟基苯甲酸以外,还应加入 等主要营养物质。(3)若稀释得当,两种方法均可得到 菌落,但菌落生长的区域不同。其中,稀释倒平板法的菌落可能生长在平板的 。(4)上述两种方法都只能初步分离纯化菌种。若要保证得到的是纤维素分解菌,还需要通过 来确定。(5)有同学在对某种霉菌接种培养的24h之内,每隔8h统
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