课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (3).doc

课 时 教 案第3周 星期二 2018年3月13日科目：生物 授课人：陈相莉课题土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 习题讲解教学要求教学重点教学难点教 具教 学 过 程2.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需要的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用培养基、分别能从混杂的微生物群体中分离出()大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌A.B.C.D.解析:缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,而固氮细菌能生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌,而霉菌能生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌,而放线菌能生长。答案:A3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)()A.2.34108个B.2.34109个C.234个D.23.4个解析:根据计算方法“每克样品中的菌落数=(CV)M”,则题中每克样品中的菌落数为(2340.1)106=2.34109(个)。答案:B7.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着能降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,为土壤样品。请回答下列问题。(1)中培养目的菌株的选择培养基中应加入作为唯一碳源,中不同浓度碳源的培养基(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要测定中活细菌数量,常采用法。 (2)为对照,与培养基的主要区别在于的培养基没有加入任何碳源,的培养基加入苯酚作为碳源,微生物在中不生长,在中生长;使用法可以在上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是。(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染?。解析:根据微生物对营养的需求,在培养基中加入或不加某些物质以达到促进目的菌生长,抑制或阻止其他杂菌生长的目的,然后再用稀释涂布平板法、平板划线法或其他方法筛选出单个目的菌落,再接种培养即可获得纯目的菌。固体平板培养细菌过程中,为防止培养基中水分蒸发形成的水珠落入培养基中,造成污染,要将培养皿倒置。在设计实验时要注意单一变量原则和对照原则,操作中要严格进行无菌操作。答案:(1)苯酚A稀释涂布平板(2)稀释涂布平板(或平板划线)防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上造成污染(3)培养基灭菌,接种环灭菌,接种过程进行无菌操作8.抗生素可由微生物产生,具有抑菌作用,能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时,先在琼脂培养基上用平板划线法接种一种从土壤中获得的甲菌,在27 下培养3天,形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(如图1),继续在同样条件下培养3天,结果如图2。分析结果,得出的结论是()A.甲菌产生了抗生素抑制乙、丙、丁三种致病菌的生长B.丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制C.乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制D.丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长解析:从图2来看,乙菌落在距离甲菌落较近处不能生长,而丙、丁菌落不受影响,最可能的原因是甲菌产生了抗生素,此种抗生素能抑制乙菌的生长,而对丙菌和丁菌没有影响。答案:C9.从土壤中分离可以以尿素为氮源的细菌时,下列相关实验操作不正确的是()A.将土壤用无菌水稀释,制备103105倍的土壤稀释液B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于平板上C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株解析:从土壤中分离可以以尿素为氮源的细菌时,将土壤用无菌水稀释,制备土壤稀释液,将不同浓度的土壤稀释液涂布于平板上,用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以鉴别分解尿素的细菌,从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株。答案:C13.(2017全国理综)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题。(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。解析:(1)有些细菌能分解尿素是因为其能产生分解尿素的酶,即脲酶。能分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物。葡萄糖既能作为能源,为细胞的代谢提供能量,也能作为碳源,为其他有机物的合成提供原料。(2)利用尿素作为唯一氮源的选择培养基可筛选分解尿素的细菌。其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用。(3)培养基中的KH2PO4和Na2HPO4既可为细菌生长提供无机营养,又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。答案:(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定14.导学号56514023图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。(1)图中选择培养基应以为唯一氮源;鉴别培养基还需添加作指示剂,产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成色。(2)在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数的数值分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是,每克土壤样品中的细菌数量为108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的细菌数较。(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活,突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸,使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中,终止密码为,突变基因表达的蛋白含个氨基酸。解析:(1)脲酶能够催化尿素分解为氨,故图中选择培养基应以尿素作为唯一氮源。由于尿素被分解成了氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高,可使酚红指示剂变红色,故用酚红作为指示剂。(2)本题用于计数细菌菌落数的接种方法是稀释涂布平板法,应统计菌落数介于30300之间的平板,故应选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数,每克土壤样品中的细菌数量为(156+178+191)/30.1105=1.75108。由于两个或多个细菌连接在一起时,往往统计的是一个菌落,故用此方法测得的细菌数偏低。(3)密码子由