人教版选修三 动物细胞融合和单克隆抗体 课件 (26张).pptx

杂种植株 融合的原生质体ab 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞a 原生质体b 原生质体a 杂种细胞ab 去壁 去壁 人工诱导 方法 促进融合的方法 融合完成的标志 植物细胞b 植物体细胞杂交 2 2动物细胞工程 2 2 2动物细胞融合和单克隆抗体 一 动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 受精作用 荧光标记的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图 人工诱导 1 1动物细胞融合的概念 动物细胞融合 也称细胞杂交 是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程 细胞融合完成的标志 细胞核融合成一个核 病毒颗粒黏附细胞表面 细胞膜连接 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞融合 形成杂种细胞 物理法 化学法 生物法 灭活的病毒 原理 离心 电激 振动 聚乙二醇 peg 细胞膜的流动性 丧失感染性 保留融合活性 1 2动物细胞融合的诱导 病毒颗粒黏附细胞表面 使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 细胞膜打开 细胞发生融合 3 意义 4 应用 突破有性杂交方法的局限 使远缘杂交成为可能 制备单克隆抗体 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶 果胶酶去壁 用胰蛋白酶使细胞分散 物理 化学方法 物理 化学 灭活的病毒 获完整植株 主要用于制备单克隆抗体 问题 抗体由什么细胞产生 其化学本质是什么 与抗原作用的特点 1抗体 抗原不纯 抗体不纯 传统抗体制备方法及缺陷 缺陷 产量低 纯度低 且抗体的特异性差 灵敏度低 读下面一段文字资料 找出单克隆抗体的概念 人们发现 在动物发生免疫反应的过程中 体内的b细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体 但是每个b细胞只分泌一种化学性质单一 特异性强的抗体 要想获得大量的单一抗体 必须用单个b细胞进行无性繁殖 即克隆 1 单克隆抗体的概念 单 单个细胞克隆 无性繁殖 单克隆抗体 单个细胞克隆产生的化学性质单一 特异性强的抗体 提示 对b细胞进行细胞培养可行吗 提示 我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的 问题 如何大量生产单克隆抗体 单克隆抗体的制备 相关常识 效应 b细胞 每个b淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 但不能增殖 骨髓瘤细胞 能无限增殖 但不能产生抗体 一个效应b细胞只分泌一种特异性抗体 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 思路 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体 又能大量繁殖的细胞 骨髓瘤细胞能无限增殖 单克隆抗体制备过程 bb b瘤 瘤瘤 b 瘤 一筛选 选择性培养基 只有杂交瘤细胞才能存活 二筛选 选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内培养 获得产生相应抗体的b淋巴细胞 抗原 抗体杂交法 诱导其融合的方法有哪些 注射抗原的目的是什么 大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法 融合后培养液中有几种细胞 两次筛选的原因 获得能产生相应抗体的b淋巴细胞 物理 离心 振动 电激化学 聚乙二醇生物 灭活的病毒 三种融合方式 bb bg gg 第1次筛选得到杂交瘤细胞 多种 第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群 体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖 效应b细胞 b淋巴细胞 注射抗原 骨髓瘤细胞 融合 b b细胞 杂交瘤细胞 瘤 瘤细胞 选择性培养基筛选1 多种杂交瘤细胞 符合要求的杂交瘤细胞 抗原 抗体杂交法 筛选2 克隆化 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 效应b细胞 b淋巴细胞 注射抗原 骨髓瘤细胞 融合 b b细胞 杂交瘤细胞 瘤 瘤细胞 选择性培养基筛选1 多种杂交瘤细胞 符合要求的杂交瘤细胞 抗原 抗体杂交法 筛选2 克隆化 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 杂交瘤细胞特点 既可以产生特异性抗体 又可以大量增殖 单克隆抗体制备中包括几个阶段 动物细胞融合 动物细胞培养 原理 膜的流动性 细胞增殖 单克隆抗体的优点 特异性强 灵敏度高 可大量制备 多孔细胞培养板 怎样二次筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 将杂交瘤细胞群稀释 约每孔1个进行培养 克隆化培养 一段时间后 检测每个孔内的抗体 分泌抗体能跟抗原结合的细胞即为所需细胞 抗体检测板 单克隆抗体的制备 2 2单克隆抗体的应用 诊断试剂 最广泛应用准确 高效 简易 快速 单克隆抗体最主要的优点 特异性强 灵敏度高 并能大量制备 生物导弹 单克隆抗体 药物单抗导向 药物为弹头 治疗疾病和运载药物 主要用于癌症治疗 单克隆抗体作为载体 运载抗癌药物 形成 生物导弹 准确杀伤癌变细胞 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个 一 一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒 一个新细胞 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强 灵敏度高的优势 单克隆抗体 例1 能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 a 离心b 灭活的病毒c 电刺激d 振动 例2 融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点 a 具有原来两个或多个细胞的遗传信息b 能无限增殖c 可形成新个体d 培养过程会贴壁 b a 你掌握了吗 例3 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合 得到杂交细胞 经培养可产生大量的单克隆抗体 与骨髓瘤细胞融合的是 a 经过免疫的b淋巴细胞b 不经过免疫的t淋巴细胞c 经过免疫的t淋巴细胞d 不经过免疫的b淋巴细胞 a 初试牛刀 例4 用动物细胞工程技术获取单克隆抗体 下列实验步骤中错误的是 a 将抗原注入小鼠体内 获得能产生抗体的b淋巴细胞b 用纤维素酶处理b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞c 用聚乙二醇作诱导剂 促使能产生抗体的b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合d 筛选杂交