（江苏专用）2020版高考生物总复习 第45讲 DNA的粗提取与鉴定练习（含解析）.docx

第45讲DNA的粗提取与鉴定一、单项选择题1.(2018江苏扬州期末)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是()A.向鸡血溶液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物B.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂C.DNA在2 mol/L的 NaCl溶液中溶解度较高D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热后变蓝答案A向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可使细胞破裂,释放DNA,DNA溶于蒸馏水,观察不到白色絮状物,A错误;洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂,B正确;DNA在2 mol/L的 NaCl溶液中溶解度较高,C正确;DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,D正确。2.(2018江苏南师附中等四校联考)关于DNA的实验,叙述正确的是()A.DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物B.PCR的每个循环一般依次经过变性延伸复性三步C.用兔的成熟红细胞可提取DNAD.用甲基绿、吡罗红将细胞染色,细胞质呈绿色,细胞核呈红色答案ADNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物,A正确;PCR的每个循环一般依次经过变性复性延伸三步,B错误;兔的成熟红细胞中没有DNA,C错误;用甲基绿、吡罗红试剂对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色,D错误。3.(2018江苏南通考前模拟)下表有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作所选取的试剂中,错误的是()选项相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内DNA浓度为2 mol/L的NaCl溶液C提取杂质较少的DNA冷却的体积分数为95%的酒精DDNA的鉴定双缩脲试剂答案D在鸡血细胞液中加入蒸馏水,使得血细胞吸水涨破,A正确; 2 mol/L NaCl溶液能溶解核内DNA,去除不溶解的杂质,B正确; DNA不溶解于酒精,而其他杂质能溶解于酒精,则用体积分数为95%的冷酒精能提取杂质较少的DNA,C正确; DNA用二苯胺鉴定呈蓝色,双缩脲用来检测蛋白质,D错误。4.(2018江苏南通考前模拟)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是()A.鸡的红细胞和菜花均可作为提取DNA的材料,处理方法有所不同B.在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤收集滤液C.将NaCl溶液浓度调至2 mol/L,用单层滤纸过滤获取析出物D.利用某些蛋白质在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理,可以提纯DNA答案C鸡的红细胞和菜花均可作为提取DNA的材料,处理方法有所不同,例如在破碎细胞,释放DNA 时,若是鸡的红细胞,则需加入一定量的蒸馏水使其吸水涨破即可,若是菜花则需要用洗涤剂溶解细胞膜,A正确;在提取菜花的DNA时,在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤收集滤液,B正确;DNA在2 mol/L的NaCl溶液中的溶解度较大,将NaCl溶液浓度调至2 mol/L,过滤去除不溶的杂质,获取含有DNA的滤液,C错误;利用某些蛋白质在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理,可以提纯DNA,D正确。5.(2018江苏南京师大附中考前模拟)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()提取细胞中的DNA必须用蒸馏水涨破细胞用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取将丝状物加入二苯胺试剂,沸水浴冷却后呈蓝色DNA既溶于2 mol/L的NaCl溶液,也溶于蒸馏水含DNA的滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质A.B.C.D.答案C提取植物细胞中的DNA需要用研磨的方法破坏细胞,错误;用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质,正确;常温下菜花匀浆中有些酶类会破坏DNA,影响DNA的提取,正确;将丝状物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴冷却后呈蓝色,错误;DNA既溶于2 mol/L的NaCl溶液,也溶于蒸馏水,正确;含DNA的滤液中加入少许嫩肉粉,其中的木瓜蛋白酶有助于去除杂质,正确,故选C。6.图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作示意图,下列有关叙述正确的是()A. 图1、2中加入蒸馏水的目的相同B. B.图1、2中完成过滤之后都保留滤液C. 图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.014 mol/LD. D.在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质答案D图1表示加入蒸馏水让鸡血细胞吸水涨破,释放DNA,图2表示加水稀释,使DNA逐渐析出。故图1、2中加入蒸馏水的目的不相同,A错误;图1中完成过滤之后要保留滤液,而图2中加水后DNA逐渐析出,因此过滤后要去除滤液,B错误;图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.14 mol/L(此时DNA的溶解度最低),C错误;嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解去除蛋白质,因此在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质,D正确。7.在DNA粗提取与鉴定实验中,将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次,则DNA主要集中在标号()操作黏稠物滤液2 mol/L的NaCl溶液搅拌过滤0.14 mol/L的NaCl溶液搅拌过滤95%的冷酒精搅拌过滤A.B.C.D.答案B由于DNA可以溶于氯化钠溶液中,在2 mol/L的氯化钠溶液中DNA的溶解度较高,搅拌过滤后,DNA存在于得到的滤液中,而黏稠物只含有少量DNA而可以丢弃;DNA在0.14 mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低,此时DNA会从溶液中析出,搅拌过滤后,得到黏稠物主要就是DNA,因此滤液可以丢弃;由于DNA不溶于酒精,而其他杂质可以溶于酒精,因此放入冷却的95%的酒精溶液中,搅拌过滤后,DNA存在于黏稠物中,滤液可以丢弃,故B正确。8.下列有关生物技术实践应用的叙述,正确的是()A.固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显B.牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基,可用高压蒸汽灭菌法灭菌C.相同pH时,加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D.向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精,可以获得无杂质的DNA答案B固定化酶技术只能固定一种酶,因此不能催化多步连续反应,A错误;牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基,可用高压蒸汽灭菌法灭菌,B正确;酶的催化作用需适宜的pH,pH不适宜时,加酶洗衣粉洗涤效果不一定好于普通洗衣粉,C错误;向溶解有DNA的氯化钠溶液中加入冷却的95%的酒精,可以进一步纯化DNA,但获得的DNA中仍有少量的杂质,D错误。9.(2018江苏通泰扬等六市二模)下列是“肝脏细胞DNA粗提取”实验的两个关键操作步骤,相关叙述错误的是()步骤1:向8 g猪肝中加入25 mL 0.1 molL-1 NaCl-0.05 molL-1柠檬酸钠缓冲液冰浴、研磨、离心步骤2:取沉淀,加入40 mL缓冲液、20 mL异戊醇,振匀后,缓慢加固体NaCl使溶液浓度达到2 molL-1,再离心A.步骤1中,加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持pH的稳定B.步骤1中,冰浴处理的主要原理是低温下DNA水解酶容易变性C.步骤2中,异戊醇的作用可能是使与DNA结合的蛋白质因变性而沉淀D.步骤2中,离心后应取上清液,因为DNA在2 molL-1NaCl溶液中溶解度比较大答案B步骤1中,加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持pH的稳定,A正确;步骤1中,冰浴处理的目的是降低DNA的溶解度,使DNA析出,B错误;步骤2中,异戊醇的作用可能是使与DNA结合的蛋白质因变性而沉淀,C正确;DNA在2 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大,因此加固体NaCl使溶液浓度达到2 mol/L后再离心过滤取上清液,D正确。10.(2018江苏苏锡常镇调研)下列有关酒精在生物学实验中作用的叙述正确的是 ()A.常用无水乙醇分离绿叶中的色素B.常用体积分数为95%的酒精解离洋葱根尖分生区细胞C.常用体积分数为95%的酒精使滤液中析出白色丝状DNAD.常用体积分数为12%的米酒特异性抑制腐乳中醋酸杆菌的生长答案C常用无水乙醇提取绿叶中的色素、用纸层析法分离绿叶中的色素,A错误;常用体积分数为95%的酒精和质量分数为15%的盐酸解离洋葱根尖分生区细胞,B错误;DNA在95%的冷酒精中凝集效果最佳,因此常用体积分数为95%的酒精使滤液中析出白色丝状DNA,C正确;常用体积分数为12%的酒精抑制腐乳中醋酸杆菌的生长,D错误。二、多项选择题11.(2018江苏盐城三模)下列有关利用新鲜的菜花进行“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A.向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNAB.加入洗涤剂和食盐的作用分别是瓦解细胞膜和溶解DNAC.利用DNA不溶于冷酒精的原理可进一步提纯DNAD.含DNA的氯化钠溶液与二苯胺在常温下混合呈蓝色答案BC菜花细胞为植物细胞,有细胞壁保护,因此加蒸馏水不会吸水涨破,A错误;加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜,加入食盐的作用是溶解DNA,B正确;DNA在冷酒精中的溶解度很低,蛋白质在冷酒精中的溶解度较高,因此可以利用DNA不溶于冷酒精的原理可进一步提纯DNA,C正确;含DNA的氯化钠溶液与二苯胺在沸水浴下混合呈蓝色,D错误。12.(2018江苏泰州中学阶段检测)利用鸡血粗提取DNA,在滤液中含有较多DNA的操作是()A.向鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水,用玻璃棒搅拌后过滤B.向DNA溶液中加入冷却的95%酒精,用玻璃棒卷起丝状物后过滤C.将含DNA的黏稠物加入2 mol/L的NaCl溶液中,用玻璃棒搅拌后过滤D.将含DNA的黏稠物加入0.14 mol/L的NaCl溶液中,用玻璃棒搅拌后过滤答案AC向鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水,鸡血细胞会因吸收涨破而释放出DNA,因此用玻璃棒搅拌后过滤,在滤液中含有较多的DNA,A正确;DNA不溶于冷却的95%的酒精,因此向DNA溶液中加入冷却的95%酒精后DNA会析出,用玻璃棒卷起丝状物后过滤得到的滤液中几乎不含DNA,B错误;DNA在2 mol/L的NaCl溶液中的溶解度高,因此将含DNA的黏稠物加入2 mol/L的NaCl溶液中,用玻璃棒搅拌后过滤,在滤液中含有较多的DNA,C正确;DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低,因此将含DNA的黏稠物加入0.14 mol/L的NaCl溶液中,用玻璃棒搅拌后过滤,在滤液中几乎不含DNA,D错误。13.有同学用三种方法进行DNA的粗提取和鉴定,使用分光光度计测量提取物吸光值并得到了相应的数据,过程和结果如表。下列相关分析正确的是()实验1实验2实验31.提取口腔上皮细胞温开水漱口,手指轻揉双颊1 min后将漱口水吐入100 mL小烧杯中2.溶解DNA取 50 mL漱口水倒入小烧杯中, 再加入 5 g NaCl 和10 mL稀释了 68 倍的洗涤剂,搅拌至溶解,平均分为3组3.分组粗提取DNA不做任何处理加入半匙嫩肉粉60 热水浴10分钟4.分离DNA加入2倍体积95%的冷酒精,不搅动,十几秒后看到丝状的DNA析出,轻轻晃动小烧杯,用玻璃棒缠绕带出漂到液面上层的DNA5.鉴定数据10 mL漱口水0.0720.1250.06515 mL漱口水0.0910.1460.07420 mL漱口水0.1210.1680.101A.实验中加入 NaCl是因为DNA溶于 NaCl溶液不溶于水B.进行本实验之前,应该用生理盐水多次漱口,避免食物残渣影响实验结果C.数据表明增加原材料用量、使用嫩肉粉可以提高 DNA的提取量D.60 热水浴提取DNA的量比对照组少是因为高温破坏了细胞内的DNA酶答案BCDNA能溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,也溶于水,A错误;进行实验前应用生理盐水多次漱口,避免食物残渣影响实验结果,B正确;实验2中加入了嫩肉粉,其吸光值比较大,说明提取液中DNA含量较多,从而可以得出使用嫩肉粉可以提高DNA的提取量的结论,C正确;60 热水浴提取DNA的量更少,说明60 时,DNA可能被DNA酶水解了,DNA酶还保留了活性,因此该温度下没有破坏DNA酶,D错误。三、非选择题14.(2018江苏南通、泰州一模)下图是南通某中学生物兴趣小组进行的DNA粗提取实验,其中SDS(一种表面活性剂)除了能瓦解细胞膜和核膜,还能与脂质和蛋白质结合。当SDS遇到钾离子时,钾离子可以置换SDS中的钠离子,产生不溶于水的PDS沉淀。请回答下列问题:(1)实验中,向剪碎的猪肝中加入食盐的主要作用是。将猪肝匀浆放入65 水浴锅中水浴10 min以除去部分杂质的主要实验原理是。(2)方法一的步骤中加入洗涤剂的作用是。方法三的步骤中,离心后应取。(3)方法一、二获得的絮状物均带黄色,从DNA在细胞中的存在形式分析,杂质分子最可能是,可用试剂鉴定。(4)要比较三种方法获得的絮状物中DNA含量,请写出实验思路:。答案(1)溶解DNA蛋白质在65 高温下会变性而DNA能耐受这一温度(2)瓦解细胞膜和核膜上清液(3)蛋白质双缩脲(4)分别取等量的三种絮状物,并用等量的2 mol/L NaCl溶液溶解;再向各试管中加入等量的二苯胺试剂并水浴加热;比较三支试管中蓝色的深浅解析(1)DNA粗提取的原理主要有DNA分子在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低而蛋白质等杂质在此浓度中溶解度比较大;蛋白质在高于60 溶液中容易变性、沉淀,而DNA能耐受较高的温度;DNA不溶于酒精而蛋白质等物质可溶。(2)根据题意,SDS与K+发生转换反应,产生PDS沉淀,因此可以通过沉淀、离心,去除实验中加入的SDS,在离心后取含有DNA的上清液。(3)DNA在真核细胞中主要存在细胞核内,与蛋白质结合形成染色体,因此,与DNA分子结合较牢的杂质最主要的是蛋白质,蛋白质用双缩脲试剂鉴定。(4)由于DNA遇二苯胺在水浴加热条件下发生反应,出现蓝色,并且蓝色深浅与DNA含量呈正相关,因此实验中可以通过将等量的三种絮状物溶解、加二苯胺试剂并水浴加热、比较蓝色深浅,实现三种絮状物中DNA含量的比较。15.(2018江苏南通考前模拟)“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法,CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分,SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构,使蛋白质变性,提高DNA在提取液中的溶解度;SDS能破坏膜结构,使蛋白质变性,EDTA能螯合Mg2+、Mn2+,抑制DNA酶的活性。某科研小组为了寻找提取腊梅DNA的优良方法,比较了两种提取DNA的方法,主要操作如下:实验测定结果如下(表中OD260反映溶液中核酸的浓度,OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上,纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8,纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0)。CTABSDSOD260OD280OD260/OD280OD260OD280OD260/OD2800.0330.0181.8330.0060.0051.200请回答下列问题。(1)与常温下研磨相比,液氮中研磨的优点是;CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是。(2)氯仿异戊醇密度均大于水且不溶于水,DNA不溶于氯仿异戊醇,蛋白质等杂质可溶于氯仿异戊醇,实验过程中加入氯仿异戊醇离心后,应取加异丙醇(异丙醇与水互溶)并离心进行纯化,利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是。(3)两种方法中,法提取的D