红细胞计数检验.pptx

第二章 第一节红细胞检查 1 2 3 4 正常情况下 红细胞生成与破坏保持动态平衡 血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围 血液中红细胞数量可通过红细胞计数获得 5 红细胞计数 redbloodcellcount RBC 测定单位体积血液中红细胞的数量诊断贫血及红细胞增多的指标之一红细胞计数的方法 显微镜计数法血液分析仪法 6 显微镜计数法 重点 用等渗液稀释血液后 滴入血细胞计数板 计数一定范围内的红细胞 经换算得每升血液中的红细胞数 检测原理 RBC未排除白细胞数量影响 7 10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血加入2ml等渗液中 混匀混悬液充入改良牛鲍计数板高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个中方格内的红细胞总数A 换算 操作 RBC L A 5 25 10 106 200 A 100 1012 8 Neubauer计数盘 9 血液分析仪法 采用电阻抗法或激光检测法 10 方法学评价 11 质量保证 显微镜法 技术误差仪器误差分布误差 显微镜法红细胞计数误差来源有三个 12 技术误差 13 参考值 成年男性 4 09 5 74 1012 L成年女性 3 68 5 13 1012 L新生儿 5 2 6 4 1012 L婴儿 4 0 4 3 1012 L儿童 4 0 4 5 1012 L RBC存在年龄与性别的差异 14 临床意义 RBC 参考值上限 RBC增多RBC 参考值下限 即贫血 生理性变化 病理性变化 15 生理性增多 生理性缺氧引起 16 6个月 2岁婴儿 17 相对性增多 见于呕吐 高热等引起暂时性血液浓缩 通过补液 血容量恢复正常 红细胞增多即消失 绝对性增多 继发性增多 由EPO代偿性或非代偿性增高引起 原发性增多 红细胞系统异常增殖性疾病 病理性增多 18 19 20 病理性减少 贫血 生成减少 破坏过多 血管丢失 贫血 红细胞计数 血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限 病因学分类 21 红细胞生成减少 骨髓造血功能减退或衰竭 再生障碍性贫血 造血物质缺乏或利用障碍 肾性贫血 缺铁性贫血 巨幼细胞性贫血 22 细胞内在缺陷 遗传性缺陷 膜缺陷 酶缺陷 血红蛋白异常致红细胞寿命缩短 细胞外在异常 获得性因素 免疫性因素 输血血型不合 新生儿溶血病等 非免疫性因素 机械损伤 化学物理因素 寄生虫及脾亢等 红细胞破坏过多 23 血液丢失 急 慢性失血性贫血 24 外伤引发的出血 25 血红蛋白 hemoglobin Hb 在有核红及网织红内合成是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白Hb在成熟红细胞内分布特点 近胞膜处多 中心部少 决定了红细胞的双凹圆盘形状合成速度受促红细胞生成素 EPO 与雄激素调节 26 Hb 四聚体 珠蛋白 血红素 2条 链 2条非 链 原卟啉 铁原子 血红蛋白组成 27 28 29 血液中血红蛋白的存在形式 存在形式所占比例还原血红蛋白 Fe2 正常成人 99 氧合血红蛋白碳氧血红蛋白硫化血红蛋白高铁血红蛋白 Fe3 1 Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度 30 血液的物理特性 比重法 折射仪法Hb的分子组成 全血铁法Hb与O2可逆性结合 血气分析法Hb衍生物光谱特点 HiCN SDS Hb等 检测原理 31 HiCN法检测原理 红细胞被溶血剂破坏后 高铁氰化钾可将各种血红蛋白 SHb除外 氧化为高铁血红蛋白 Hi 后者与试剂中的CN 结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白 HiCN 在540nm处测定HiCN的吸光度 直接换算Hb浓度或在标准曲线上查得Hb浓度 32 20ul血液加入5ml转化液中 充分溶血转化后 以转化液调零 测定标本 HiCN 在540nm的吸光度A 计算 操作 直接计算 符合WHO标准的分光光度计 Hb A 64458 44000 251 A 367 7以HiCN参考液绘制标准曲线 利用吸光度A在标准曲线上查出Hb浓度 33 方法学评价 缺点 试剂有毒 高WBC造成试剂混浊 HbCO转化慢 不能测SHb HiCN测定法 参考方法 优点 操作简单 反应速度快 产物稳定 便于质控 34 方法学评价 优点 操作简单 试剂无毒 结果准确 重复性好 缺点 SDS质量差异大 消光系数未定 不能直接计算Hb浓度 不能测定SHb SDS破坏白细胞 SDS Hb测定法 HiCN替代方法 35 方法学评价 优点 试剂简易无毒 呈色稳定 准确性与精密性较高 缺点 575nm波长比色 血液分析仪上应用受限 不能转化HbF AHD575测定法 36 方法学评价 优点 准确度 精密度较高 缺点 试剂有毒 HbCO转化慢 HiN3测定法 37 方法学评价 优点 溶血强 不破坏白细胞 适用于血液分析仪 缺点 精密度 准确度低 CATB测定法 38 质量保证 比色法 标本 引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高 器材及试剂 定期校准仪器 选用合格的微量采血管和刻度吸管 保证试剂质量 技术操作 控制技术误差 废弃物 妥善处理废液 39 参考值 成年男性 131 172g L成年女性 113 151g L新生儿 180 190g L婴儿 110 120g L儿童 120 140g L老年 70岁 男性94 122g L女性87 112g L Hb存在年龄与性别的差异 40 临床意义 同红细胞计数 判断贫血程度优于红细胞计数临床应用注意事项Hb和RBC不一定正确反应全身红细胞总容量的变化 某些贫血 Hb和RBC减少程度可不一致 同时测定Hb和RBC 对诊断更有意义 41 贫血程度的判定 分度Hb含量症状轻度 91g L 正常值下限症状轻微中